黄连生物碱调节高脂C57BL/6J小鼠胆汁酸信号通路和肠道微生物改善血脂异常研究
发布时间：2020-12-24 22:58
目的:黄连（Rhizoma Coptidis）为毛茛科植物黄连、三角叶黄连或云连的干燥根茎。黄连作为降脂药物一直被广泛应用于临床治疗上。现代药理研究表明,黄连及其生物碱的降血脂机制主要有:增强胰岛素受体表达,降低血糖同时促进糖原、脂肪、蛋白质合成;降低胰岛素抵抗、提高胰岛素的敏感性;延长低密度脂蛋白受体m RNA半衰期,增加LDLR表达量;降低机体炎症反应,缓解肥胖症状;提高机体抗氧化水平,改善高血脂症状。在肝脏与脂代谢相关的众多信号通路中,胆汁酸膜受体TGR5（G蛋白偶联受体）和胆汁酸核受体FXR-α吸引了研究者的极大关注。最新研究发现,天然或人工合成的胆汁酸受体激动剂在控制血脂、治疗糖尿病、粥样动脉硬化等代谢异常疾病方面具有良好应用前景。目前,天然的胆汁酸受体激动剂只有关于齐墩果酸的报道。开发以胆汁酸信号通路为靶标的药物,不仅有助于治疗肥胖症、糖尿病、血脂异常等代谢性疾病,对炎症反应、肿瘤等疾病的治愈也大有裨益。本课题组前期研究发现,口服黄连生物碱的生物利用率小于5%,药物主要分布大鼠的肝脏、肠道、脑和肺,大部分药物最终经肠道随粪便排出体外。因此我们推测:黄连生物碱之所以有较好的降...
【文章来源】：西南大学重庆市 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：111 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
摘要
Abstract
第1章 文献综述
1.1 血脂异常概述
1.1.1 中医对血脂异常的认识
1.1.2 中、西医对血脂异常的治疗
1.2 胆汁酸受体通路与血脂异常的联系
1.2.1 胆汁酸-具有多种生物学功能的信号分子
1.2.2 胆汁酸通路与代谢性疾病
1.3 肠道微生物与代谢性疾病
1.3.1 肠道微生物：一个被忽略的调节机体代谢的“器官”
1.3.2 肠道微生物与机体健康密切相关
1.3.3 肠道微生物异常促进肥胖和血脂异常的机制
1.4 黄连生物碱对血脂异常和肠道微生物的调节作用
1.4.1 黄连及其活性成分
1.4.2 黄连及黄连生物碱对糖尿病、高血脂等代谢综合征的治疗
1.4.3 黄连对肠道微生物的影响概述
1.5 研究目的和意义
1.6 研究内容
第2章 高脂高胆固醇细胞模型研究黄连生物碱对脂代谢相关靶标的影响
2.1 实验材料和仪器
2.2 实验方法
2.2.1 细胞培养
2.2.2 高胆固醇高脂细胞模型的建立
2.2.3 黄连生物碱对高胆固醇高脂细胞内脂质沉积的影响
2.2.4 黄连生物碱对高胆固醇高脂细胞脂代谢相关蛋白靶标的影响
2.2.5 细胞免疫荧光检测黄连生物碱对高胆固醇高脂细胞脂代谢相关蛋白靶标的影响
2.2.6 统计方法
2.3 实验结果
2.3.1 黄连生物碱对高胆固醇高脂细胞细胞内脂肪酸积累的影响
2.3.2 黄连生物碱对高胆固醇高脂细胞细胞内脂代谢相关靶标的影响
2.3.3 免疫荧光法检测黄连生物碱对高胆固醇高脂细胞脂代谢相关蛋白靶标的影响
2.4 小结与讨论
第3章 黄连生物碱对高血脂C57BL/6J小鼠血脂代谢和胆汁酸受体通路的影响
3.1 实验材料和仪器
3.2 实验方法
3.2.1 动物造模、分组和给药
3.2.2 C57小鼠血脂水平的检测
3.2.3 C57BL/6j小鼠肝脏组织冰冻切片
3.2.4 C57BL/6j小鼠肝脏组织油红O染色及脂质沉积检测
3.2.5 RT-PCR分析C57BL/6j肝脏中与脂代谢相关基因表达
3.2.6 Western Blot分析C57BL/6j肝脏中与脂代谢相关蛋白表达水平
3.2.7 统计方法
3.3 实验结果
3.3.1 黄连生物碱对高血脂小鼠体内血脂水平的影响
3.3.2 黄连生物碱对高血脂小鼠肝脏脂质沉积的影响
3.3.3 黄连生物碱对高血脂小鼠肝脏与脂代谢相关基因表达的影响
3.3.4 黄连生物碱对高血脂C57BL/6J小鼠肝脏与脂代谢相关蛋白表达的影响
3.4 小结与讨论
第4章 黄连生物碱对高血脂C57BL/6J小鼠胆汁酸肝肠循环和炎症相关靶标的影响
4.1 实验材料和仪器
4.2 实验方法
4.2.1 动物造模、分组和给药
4.2.2 C57小鼠肝脏、血清和粪便中的胆汁酸测定
4.2.3 C57BL/6j小鼠脂肪组织冰冻切片、HE染色及脂肪细胞大小比较
4.2.4 Western Blot检测黄连生物碱对C57小鼠胆汁酸循环和炎症相关靶标的表达
4.2.5 C57BL/6j小鼠肝脏和小肠组织的免疫组化
4.2.6 统计方法
4.3 实验结果
4.3.1 黄连生物碱对C57BL/6j小鼠肝脏、血清和粪便中的胆汁酸水平的影响
4.3.2 黄连生物碱对高血脂小鼠与胆汁酸肝肠循环相关的靶标表达影响
4.3.3 C57BL/6j小鼠肝脏和小肠组织的免疫荧光组化检测
4.3.4 黄连生物碱对高血脂小鼠附睾脂肪细胞体积和组织炎症靶标的影响
4.4 小结和讨论
第5章 黄连生物碱对高血脂C57BL/6J小鼠肠道菌群的影响
5.1 实验材料和仪器
5.2 实验方法
5.2.1 C57BL/6j小鼠粪便的收集
5.2.2 小鼠粪便基因组DNA的提取和纯度检测
5.2.3 Illumina测序分析C57BL/6j小鼠的肠道微生物菌群
5.2.4 Alcaligenes faecalis, Escherichia coli的培养和黄连生物碱的体外抑菌活性
5.2.5 细胞与微生物共培养模型的建立
5.2.6 数据分析
5.3 实验结果
5.3.1 小鼠粪便DNA纯度检测结果
5.3.2 HFHC饮食和黄连生物碱在对C57BL/6j小鼠肠道微生物多样性的影响
5.3.3 HFHC饮食和黄连生物碱在纲水平上对C57BL/6j小鼠肠道微生物在门水平的影响
5.3.4 HFHC饮食和黄连生物碱在属水平上对C57BL/6j小鼠肠道微生物菌群的影响
5.3.5 HFHC饮食和黄连生物碱在种水平上对C57BL/6j小鼠肠道微生物菌群的影响
5.3.6 不同样品中细菌群落的聚类
5.3.7 黄连生物碱对Alcaligenes faecalis和Escherichia coli的抑制作用研究
5.3.8 细胞与微生物共培养模型的建立及肠道微生物对细胞脂代谢相关靶标表达的影响
5.4 小结和讨论
全文总结与展望
创新点及意义
参考文献
致谢
中英文缩略语对照表
博士研究生期间研究成果
发表论文
主持项目
本文编号：2936459
【文章来源】：西南大学重庆市 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：111 页
【学位级别】：博士
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Abstract
第1章 文献综述
1.1 血脂异常概述
1.1.1 中医对血脂异常的认识
1.1.2 中、西医对血脂异常的治疗
1.2 胆汁酸受体通路与血脂异常的联系
1.2.1 胆汁酸-具有多种生物学功能的信号分子
1.2.2 胆汁酸通路与代谢性疾病
1.3 肠道微生物与代谢性疾病
1.3.1 肠道微生物：一个被忽略的调节机体代谢的“器官”
1.3.2 肠道微生物与机体健康密切相关
1.3.3 肠道微生物异常促进肥胖和血脂异常的机制
1.4 黄连生物碱对血脂异常和肠道微生物的调节作用
1.4.1 黄连及其活性成分
1.4.2 黄连及黄连生物碱对糖尿病、高血脂等代谢综合征的治疗
1.4.3 黄连对肠道微生物的影响概述
1.5 研究目的和意义
1.6 研究内容
第2章 高脂高胆固醇细胞模型研究黄连生物碱对脂代谢相关靶标的影响
2.1 实验材料和仪器
2.2 实验方法
2.2.1 细胞培养
2.2.2 高胆固醇高脂细胞模型的建立
2.2.3 黄连生物碱对高胆固醇高脂细胞内脂质沉积的影响
2.2.4 黄连生物碱对高胆固醇高脂细胞脂代谢相关蛋白靶标的影响
2.2.5 细胞免疫荧光检测黄连生物碱对高胆固醇高脂细胞脂代谢相关蛋白靶标的影响
2.2.6 统计方法
2.3 实验结果
2.3.1 黄连生物碱对高胆固醇高脂细胞细胞内脂肪酸积累的影响
2.3.2 黄连生物碱对高胆固醇高脂细胞细胞内脂代谢相关靶标的影响
2.3.3 免疫荧光法检测黄连生物碱对高胆固醇高脂细胞脂代谢相关蛋白靶标的影响
2.4 小结与讨论
第3章 黄连生物碱对高血脂C57BL/6J小鼠血脂代谢和胆汁酸受体通路的影响
3.1 实验材料和仪器
3.2 实验方法
3.2.1 动物造模、分组和给药
3.2.2 C57小鼠血脂水平的检测
3.2.3 C57BL/6j小鼠肝脏组织冰冻切片
3.2.4 C57BL/6j小鼠肝脏组织油红O染色及脂质沉积检测
3.2.5 RT-PCR分析C57BL/6j肝脏中与脂代谢相关基因表达
3.2.6 Western Blot分析C57BL/6j肝脏中与脂代谢相关蛋白表达水平
3.2.7 统计方法
3.3 实验结果
3.3.1 黄连生物碱对高血脂小鼠体内血脂水平的影响
3.3.2 黄连生物碱对高血脂小鼠肝脏脂质沉积的影响
3.3.3 黄连生物碱对高血脂小鼠肝脏与脂代谢相关基因表达的影响
3.3.4 黄连生物碱对高血脂C57BL/6J小鼠肝脏与脂代谢相关蛋白表达的影响
3.4 小结与讨论
第4章 黄连生物碱对高血脂C57BL/6J小鼠胆汁酸肝肠循环和炎症相关靶标的影响
4.1 实验材料和仪器
4.2 实验方法
4.2.1 动物造模、分组和给药
4.2.2 C57小鼠肝脏、血清和粪便中的胆汁酸测定
4.2.3 C57BL/6j小鼠脂肪组织冰冻切片、HE染色及脂肪细胞大小比较
4.2.4 Western Blot检测黄连生物碱对C57小鼠胆汁酸循环和炎症相关靶标的表达
4.2.5 C57BL/6j小鼠肝脏和小肠组织的免疫组化
4.2.6 统计方法
4.3 实验结果
4.3.1 黄连生物碱对C57BL/6j小鼠肝脏、血清和粪便中的胆汁酸水平的影响
4.3.2 黄连生物碱对高血脂小鼠与胆汁酸肝肠循环相关的靶标表达影响
4.3.3 C57BL/6j小鼠肝脏和小肠组织的免疫荧光组化检测
4.3.4 黄连生物碱对高血脂小鼠附睾脂肪细胞体积和组织炎症靶标的影响
4.4 小结和讨论
第5章 黄连生物碱对高血脂C57BL/6J小鼠肠道菌群的影响
5.1 实验材料和仪器
5.2 实验方法
5.2.1 C57BL/6j小鼠粪便的收集
5.2.2 小鼠粪便基因组DNA的提取和纯度检测
5.2.3 Illumina测序分析C57BL/6j小鼠的肠道微生物菌群
5.2.4 Alcaligenes faecalis, Escherichia coli的培养和黄连生物碱的体外抑菌活性
5.2.5 细胞与微生物共培养模型的建立
5.2.6 数据分析
5.3 实验结果
5.3.1 小鼠粪便DNA纯度检测结果
5.3.2 HFHC饮食和黄连生物碱在对C57BL/6j小鼠肠道微生物多样性的影响
5.3.3 HFHC饮食和黄连生物碱在纲水平上对C57BL/6j小鼠肠道微生物在门水平的影响
5.3.4 HFHC饮食和黄连生物碱在属水平上对C57BL/6j小鼠肠道微生物菌群的影响
5.3.5 HFHC饮食和黄连生物碱在种水平上对C57BL/6j小鼠肠道微生物菌群的影响
5.3.6 不同样品中细菌群落的聚类
5.3.7 黄连生物碱对Alcaligenes faecalis和Escherichia coli的抑制作用研究
5.3.8 细胞与微生物共培养模型的建立及肠道微生物对细胞脂代谢相关靶标表达的影响
5.4 小结和讨论
全文总结与展望
创新点及意义
参考文献
致谢
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本文编号：2936459
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