玉郎伞多糖抗乳腺癌作用及机制研究
发布时间：2020-12-24 22:58
目的:乳腺癌（breast cancer）是发生在乳腺腺上皮组织的恶性肿瘤,严重影响女性身心健康甚至危及生命。然而,当前临床缺少对乳腺癌具有良好疗效的药物。据研究报道,玉郎伞多糖（Yu Lang San polysaccharides,YLSPS）具有抗S180肿瘤作用及免疫保护作用,但是,其对乳腺癌的作用未见有相关研究报道。基于此,本课题以YLSPS为研究对象,采用体外细胞实验模型,结合体内4T1荷瘤小鼠模型,对YLSPS抗乳腺癌作用及其作用机制进行研究。方法:1.体外培养小鼠乳腺癌细胞株4T1与人乳腺细胞HBL-100,加入以不同浓度的YLSPS灌喂大鼠所制备的含药血清。首先测定培养HBL-100细胞上清液中的LDH含量,同时用以CCK-8法、流式细胞术（flow cytometry,FCM）、透射电镜（transmission electron microscope,TEM）分别检测YLSPS含药血清的毒性及对4T1细胞增殖抑制与凋亡的影响。此外,采用实时定量PCR（real-time PCR,RT-PCR）、蛋白免疫印迹（Western blot,WB）法分别检测与4T1细胞凋...
【文章来源】：广西医科大学广西壮族自治区
【文章页数】：81 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
不同浓度的YLSPS含药血清处理后，用CCK-8法测定4T1细胞活性（图A），AnnexinV-FITC/PI流式细胞术检测的凋亡率（图B）及代表图（图C）
图 1-1. YLSPS、CTX 含药血清分别作用 24h 后对 4T1 细胞超微结构的影响。(A 对照组; （×10000）B CTX 组: 100 mg·kg-1·d-1; C YLSPS 低剂量组: 0.75 g·kg-1·d-1; D YLSPS 中剂量组: 1.50 g·kg-1·d-1; EYLSPS 高剂量组: 3.00 g·kg-1·d-1. （×15000）)。Fig 1-1. The results of cell of YLSPS or CTX drug serum for 24 hours treatmentand the changes ofultrastructure of 4T1 cells with different treatments. (A control group; （×10000）B CTX group: 100mg·kg-1·d-1; C YLSPS L group: 0.75 g·kg-1·d-1; D YLSPS M group: 1.50 g·kg-1·d-1; E YLSPS H group:3.00 g·kg-1·d-1. （×15000）)
3.6.1 标准曲线的制作各基因的标准曲线：线性相关系数（R2）均＞0.99，︱斜率差︱≤ 0.1，0.90≤扩增效率（E）≤ 1.10 之间，提示各基因扩增效率基本一致，故可用比较Ct 法，如图 1-3。3.6.2 对 4T1 细胞 Bax、Bcl-2 和 Caspase-3 mRNA 表达水平的影响各基因溶解曲线显示独立单一的峰形，RT-PCR 产物电泳图呈现单一条带，分子量大小与设计的引物分子量大小一致，表示扩增产物无非特异性扩增，如图 1-4，图 1-5。结果显示如图 1-6，与空白对照组相比，YLSPS 组和 CTX 组的 Bax、Caspase-3 基因表达显著上调（P<0.01），Bcl-2 在 YLSPS 组呈下调趋势，并具均有浓度依赖性。
本文编号：2936460
【文章来源】：广西医科大学广西壮族自治区
【文章页数】：81 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
不同浓度的YLSPS含药血清处理后，用CCK-8法测定4T1细胞活性（图A），AnnexinV-FITC/PI流式细胞术检测的凋亡率（图B）及代表图（图C）
图 1-1. YLSPS、CTX 含药血清分别作用 24h 后对 4T1 细胞超微结构的影响。(A 对照组; （×10000）B CTX 组: 100 mg·kg-1·d-1; C YLSPS 低剂量组: 0.75 g·kg-1·d-1; D YLSPS 中剂量组: 1.50 g·kg-1·d-1; EYLSPS 高剂量组: 3.00 g·kg-1·d-1. （×15000）)。Fig 1-1. The results of cell of YLSPS or CTX drug serum for 24 hours treatmentand the changes ofultrastructure of 4T1 cells with different treatments. (A control group; （×10000）B CTX group: 100mg·kg-1·d-1; C YLSPS L group: 0.75 g·kg-1·d-1; D YLSPS M group: 1.50 g·kg-1·d-1; E YLSPS H group:3.00 g·kg-1·d-1. （×15000）)
3.6.1 标准曲线的制作各基因的标准曲线：线性相关系数（R2）均＞0.99，︱斜率差︱≤ 0.1，0.90≤扩增效率（E）≤ 1.10 之间，提示各基因扩增效率基本一致，故可用比较Ct 法，如图 1-3。3.6.2 对 4T1 细胞 Bax、Bcl-2 和 Caspase-3 mRNA 表达水平的影响各基因溶解曲线显示独立单一的峰形，RT-PCR 产物电泳图呈现单一条带，分子量大小与设计的引物分子量大小一致，表示扩增产物无非特异性扩增，如图 1-4，图 1-5。结果显示如图 1-6，与空白对照组相比，YLSPS 组和 CTX 组的 Bax、Caspase-3 基因表达显著上调（P<0.01），Bcl-2 在 YLSPS 组呈下调趋势，并具均有浓度依赖性。
本文编号：2936460
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