清肺化痰汤通过抑制EGFR通路下调MUC5AC的表达治疗COPD的研究
发布时间：2020-12-25 23:44
目的:研究清肺化痰汤治疗慢性阻塞性肺疾病（COPD）可能的机制。方法:应用烟雾吸入联合脂多糖（LPS）灌肺复合因素的方法,建立COPD大鼠模型,造模成功后将大鼠随机分为6组,分别为模型对照组,清肺化痰汤7.5、15、30 g/kg组和氨溴索35 mg/kg组,另设正常对照组。造模28 d后开始给药,连续给药14 d。末次药后测定大鼠呼吸功能,观察肺的大体外观并观察大鼠肺组织粘液增生的AB-PAS染色情况。应用LPS诱导NCI-H292细胞建立粘液高分泌模型,将NCI-H292细胞分为8组分别是正常对照组、模型对照组（LPS 10μg/mL）、胎牛血清组、AG1478组（10μg/mL AG1478）、清肺化痰汤7.5 g/kg含药血清5%、10%、20%组、清肺化痰汤7.5 g/kg 10%含药血清+A1478组。用免疫细胞化学法和Real-time RT-PCR法观察MUC5AC的表达情况,用Western Blot法检测EGFR蛋白的表达情况。结果:与正常对照组比较,模型对照组大鼠肺功能明显降低,肺组织体积明显增大,质地变硬,AB-PAS染色结果显示模型对照组大鼠气道有较多杯状细胞...
【文章来源】：中药药理与临床. 2020年04期 北大核心
【文章页数】：7 页
【部分图文】：
清肺化痰汤对大鼠COPD模型肺大体外观的影响
AB-PAS染后图中酸性黏液物质或细胞呈蓝色,中性黏液物质或细胞呈红色,混合黏液物质或细胞呈紫红色。由图2可知,正常对照组大鼠的气管见到极其少量的杯状细胞存在,并且气道内无明显黏液分泌;模型对照组大鼠气道可见到较多杯状细胞增生,并且有大量黏液形成,堵塞气道;氨溴索35 mg/kg治疗后大鼠较模型对照组大鼠气道黏液分泌有所减少,杯状细胞增生减轻;相较模型对照组清肺化痰汤7.5、15、30 g/kg治疗后大鼠气道黏液分泌随着剂量的升高明显减少,杯状细胞增生也有所减轻。表明清肺化痰汤3个剂量对减轻COPD病症中气道黏液高分泌疗效显著,并呈现出剂量依赖性,见表2。表2 清肺化痰汤对大鼠COPD模型粘液量的影响 ( x ˉ ±s,n=10) 组别 剂量/(g/kg) PAS阳性表达/IOD值 正常对照 - 0.17±0.04** 模型对照 - 0.64±0.17 氨溴索 35×10-3 0.23±0.07** 清肺化痰汤 7.5 0.42±0.13** 清肺化痰汤 15 0.34±0.09** 清肺化痰汤 30 0.29±0.08**
免疫细胞化学法结果显示:MUC5AC蛋白阳性颗粒表现为紫蓝色,细胞核为淡红色。我们观察每张细胞片时,随机选取 5 个400 倍高倍视野,计算每个高倍视野的阳性细胞数占细胞总数的百分比。如图3所示:正常对照组呈弱阳性表达,表现为胞浆呈现紫蓝色的染色极少。在模型对照组可见强阳性MUC5AC的表达,表现为胞浆和细胞间隙内出现大量的紫蓝色染色。清肺化痰汤7.5 g/kg含药血清5%、10%、20%组治疗后胞浆和内紫蓝色染色变浅,与模型对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。见表3。表3 清肺化痰汤7.5 g/kg含药血清对LPS刺激后的NCI-H292细胞中MUC5AC蛋白表达的影响 ( x ˉ ±s,n=6) 组别 含药血清浓度 MUC5AC阳性细胞率/% 正常对照 19.1±1.3** 模型对照 78.5±3.4 胎牛血清 74.6±3.6 清肺化痰汤 5 45.5±2.7** 清肺化痰汤 10 36.1±3.2** 清肺化痰汤 20 40.2±2.9** 与模型对照组比较**P<0.01(下同)。
【参考文献】：
期刊论文
[1]N-乙酰半胱氨酸通过调控EGFR/MAPK信号通路对慢性阻塞性肺疾病气道黏液高分泌的作用研究[J]. 白学敏,邹立考,金珍木,姜利佳. 中国临床药理学与治疗学. 2019(10)
[2]慢性阻塞性肺疾病中医证候及证素分布规律与特征的文献分析研究[J]. 黄牧华,董竞成,魏颖,张红英,孙婧,吕玉宝,李璐璐. 中国中医基础医学杂志. 2019(10)
[3]清肺化痰汤对慢性阻塞性肺疾病大鼠模型气道炎症和黏液分泌的调控作用研究[J]. 屈飞,黄小婷,崔艳茹,李惠兰,邱沙英. 中华中医药学刊. 2019(09)
[4]清肺化痰汤治疗痰热壅肺型支气管扩张患者的临床观察[J]. 景菲菲. 中西医结合研究. 2019(02)
[5]慢性阻塞性肺疾病全球倡议2019:慢性阻塞性肺疾病诊断、治疗与预防全球策略解读[J]. 王晓娟,方向阳. 中国全科医学. 2019(18)
[6]慢性阻塞性肺疾病患者肺康复的研究进展[J]. 韩博学,张睢扬,韩永仕. 中国康复医学杂志. 2018(09)
[7]清肺化痰汤治疗小儿热性哮喘的效果探讨[J]. 赵迎霞. 当代医药论丛. 2018(12)
[8]中医治疗痰热型咳欶的临床效果分析[J]. 张光宇. 中国卫生标准管理. 2016(24)
[9]中药治疗COPD稳定期肺肾阴虚型患者的临床疗效及对肺功能的影响[J]. 王高岸,卢桂兰,邱世光,左敏芳. 中国实验方剂学杂志. 2014(14)
[10]熏香烟加气管注入脂多糖和结合臭氧暴露法建立大鼠慢性阻塞性肺病模型[J]. 李四维,张玲,李春雷,李友林. 北京中医药大学学报. 2014(05)
本文编号：2938608
【文章来源】：中药药理与临床. 2020年04期 北大核心
【文章页数】：7 页
【部分图文】：
清肺化痰汤对大鼠COPD模型肺大体外观的影响
AB-PAS染后图中酸性黏液物质或细胞呈蓝色,中性黏液物质或细胞呈红色,混合黏液物质或细胞呈紫红色。由图2可知,正常对照组大鼠的气管见到极其少量的杯状细胞存在,并且气道内无明显黏液分泌;模型对照组大鼠气道可见到较多杯状细胞增生,并且有大量黏液形成,堵塞气道;氨溴索35 mg/kg治疗后大鼠较模型对照组大鼠气道黏液分泌有所减少,杯状细胞增生减轻;相较模型对照组清肺化痰汤7.5、15、30 g/kg治疗后大鼠气道黏液分泌随着剂量的升高明显减少,杯状细胞增生也有所减轻。表明清肺化痰汤3个剂量对减轻COPD病症中气道黏液高分泌疗效显著,并呈现出剂量依赖性,见表2。表2 清肺化痰汤对大鼠COPD模型粘液量的影响 ( x ˉ ±s,n=10) 组别 剂量/(g/kg) PAS阳性表达/IOD值 正常对照 - 0.17±0.04** 模型对照 - 0.64±0.17 氨溴索 35×10-3 0.23±0.07** 清肺化痰汤 7.5 0.42±0.13** 清肺化痰汤 15 0.34±0.09** 清肺化痰汤 30 0.29±0.08**
免疫细胞化学法结果显示:MUC5AC蛋白阳性颗粒表现为紫蓝色,细胞核为淡红色。我们观察每张细胞片时,随机选取 5 个400 倍高倍视野,计算每个高倍视野的阳性细胞数占细胞总数的百分比。如图3所示:正常对照组呈弱阳性表达,表现为胞浆呈现紫蓝色的染色极少。在模型对照组可见强阳性MUC5AC的表达,表现为胞浆和细胞间隙内出现大量的紫蓝色染色。清肺化痰汤7.5 g/kg含药血清5%、10%、20%组治疗后胞浆和内紫蓝色染色变浅,与模型对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。见表3。表3 清肺化痰汤7.5 g/kg含药血清对LPS刺激后的NCI-H292细胞中MUC5AC蛋白表达的影响 ( x ˉ ±s,n=6) 组别 含药血清浓度 MUC5AC阳性细胞率/% 正常对照 19.1±1.3** 模型对照 78.5±3.4 胎牛血清 74.6±3.6 清肺化痰汤 5 45.5±2.7** 清肺化痰汤 10 36.1±3.2** 清肺化痰汤 20 40.2±2.9** 与模型对照组比较**P<0.01(下同)。
【参考文献】：
期刊论文
[1]N-乙酰半胱氨酸通过调控EGFR/MAPK信号通路对慢性阻塞性肺疾病气道黏液高分泌的作用研究[J]. 白学敏,邹立考,金珍木,姜利佳. 中国临床药理学与治疗学. 2019(10)
[2]慢性阻塞性肺疾病中医证候及证素分布规律与特征的文献分析研究[J]. 黄牧华,董竞成,魏颖,张红英,孙婧,吕玉宝,李璐璐. 中国中医基础医学杂志. 2019(10)
[3]清肺化痰汤对慢性阻塞性肺疾病大鼠模型气道炎症和黏液分泌的调控作用研究[J]. 屈飞,黄小婷,崔艳茹,李惠兰,邱沙英. 中华中医药学刊. 2019(09)
[4]清肺化痰汤治疗痰热壅肺型支气管扩张患者的临床观察[J]. 景菲菲. 中西医结合研究. 2019(02)
[5]慢性阻塞性肺疾病全球倡议2019:慢性阻塞性肺疾病诊断、治疗与预防全球策略解读[J]. 王晓娟,方向阳. 中国全科医学. 2019(18)
[6]慢性阻塞性肺疾病患者肺康复的研究进展[J]. 韩博学,张睢扬,韩永仕. 中国康复医学杂志. 2018(09)
[7]清肺化痰汤治疗小儿热性哮喘的效果探讨[J]. 赵迎霞. 当代医药论丛. 2018(12)
[8]中医治疗痰热型咳欶的临床效果分析[J]. 张光宇. 中国卫生标准管理. 2016(24)
[9]中药治疗COPD稳定期肺肾阴虚型患者的临床疗效及对肺功能的影响[J]. 王高岸,卢桂兰,邱世光,左敏芳. 中国实验方剂学杂志. 2014(14)
[10]熏香烟加气管注入脂多糖和结合臭氧暴露法建立大鼠慢性阻塞性肺病模型[J]. 李四维,张玲,李春雷,李友林. 北京中医药大学学报. 2014(05)
本文编号：2938608
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