白芍总苷对小鼠T淋巴细胞体外增殖及活化诱导细胞死亡的影响
发布时间：2020-12-28 00:43
目的:研究白芍总苷（total glucosides of paeony,TGP）对小鼠T淋巴细胞体外增殖及活化诱导细胞死亡（AICD）的影响,并初探其免疫抑制机制。方法:1.富集小鼠脾脏T淋巴细胞:利用免疫磁珠分选技术,无菌分离C57BL/6小鼠脾脏T淋巴细胞,流式细胞仪检测T淋巴细胞纯度。2.TGP对活化诱导T淋巴细胞死亡（AICD）的影响:将纯化后的T淋巴细胞悬液接种到24孔板中,7.5×l05个/孔,按照TGP溶液终浓度（0ug/ml、50ug/ml、100ug/ml、200ug/ml）设为空白组、TGP低中高剂量组,anti-CD3/CD28刺激T淋巴细胞活化,培养24h或48h后采用AnnexinV/7AAD染色检测细胞活性。3.TGP对小鼠T淋巴细胞增殖的影响:利用CFSE标记T淋巴细胞,然后将CFSE标记的T淋巴细胞接种到24孔板中,7.5×105个/孔,按照TGP溶液终浓度（0ug/ml、50ug/ml、100ug/ml、200 ug/ml）设为空白组、TGP低中高剂量组,anti-CD3/CD28刺激T淋巴细胞增殖,培养4...
【文章来源】：南方医科大学广东省
【文章页数】：70 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图２．２?ＴＧＰ对Ｔ淋巴细胞活化的影响??２１??
ＣＤ３／ＣＤ２８刺激细胞活化增殖，４８小时后，镜下观察ＴＧＰ处理组细胞集落明显??减少。流式细胞计数也提示：与空白对照组相比，ＴＧＰ低、中、高处理组ＣＤ４＋??或ＣＤ８＋Ｔ淋巴细胞活细胞绝对计数显著降低（图２．３）。提示：ＴＧＰ高、中、低??剂量组均可抑制ＣＤ４或ＣＤ８阳性Ｔ淋巴细胞克隆增殖，且ＴＧＰ浓度越高抑制??作用越显著。??２．２．４?ＴＧＰ对小鼠Ｔ淋巴细胞ＡＩＣＤ的影响（２４小时＞??将Ｔ淋巴细胞与不同浓度的ＴＧＰ溶液共培养，药物最终浓度分别为０?ｕｇ／ｍｌ、??５０ｕｇ／ｍｌ、１００ｕｇ／ｍｌ、２００ｕｇ／ｍｌ，ａｎｔｉ－ＣＤ３／ＣＤ２８?刺激?Ｔ?淋巴细胞活化，２４?小时??后采用ＡｎｎｅｘｍＶ／７ＡＡＤ染色检测Ｔ淋巴细胞存活情况。流式结果提示：共培养??２４小时后，高剂量组活细胞比例较空白组下降明显，提示高浓度（２００ｕｇ／ｍｌ）??ＴＧＰ可促进Ｔ淋巴细胞Ａ１ＣＤ，此外ＣＤ８＋Ｔ淋巴细胞活细胞比例下降更明显，??提示ＣＤ８叮淋巴细胞可能对药物更敏感（图２．４）。??２．２．５?ＴＧＰ对小鼠Ｔ淋巴细胞ＡＩＣＤ的影响（４８小时）??流式结果显示：ＴＧＰ处理活化Ｔ淋巴细胞４８小时后，与空白组相比，中剂??２２??
２?…圖吻．ＩＩ?吻?Ｅｌ?２００ｕｇ／ｍｌ??ｉ?＂ｉ?Ｉ?■?１?ｉ．??－ＨＢｌ?１１１?Ｂｌ?ｌｉｒｎ??图２．５?ＴＧＰ对活化诱导Ｔ淋巴细胞死亡的影响（４８小时）??２３??
本文编号：2942810
【文章来源】：南方医科大学广东省
【文章页数】：70 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图２．２?ＴＧＰ对Ｔ淋巴细胞活化的影响??２１??
ＣＤ３／ＣＤ２８刺激细胞活化增殖，４８小时后，镜下观察ＴＧＰ处理组细胞集落明显??减少。流式细胞计数也提示：与空白对照组相比，ＴＧＰ低、中、高处理组ＣＤ４＋??或ＣＤ８＋Ｔ淋巴细胞活细胞绝对计数显著降低（图２．３）。提示：ＴＧＰ高、中、低??剂量组均可抑制ＣＤ４或ＣＤ８阳性Ｔ淋巴细胞克隆增殖，且ＴＧＰ浓度越高抑制??作用越显著。??２．２．４?ＴＧＰ对小鼠Ｔ淋巴细胞ＡＩＣＤ的影响（２４小时＞??将Ｔ淋巴细胞与不同浓度的ＴＧＰ溶液共培养，药物最终浓度分别为０?ｕｇ／ｍｌ、??５０ｕｇ／ｍｌ、１００ｕｇ／ｍｌ、２００ｕｇ／ｍｌ，ａｎｔｉ－ＣＤ３／ＣＤ２８?刺激?Ｔ?淋巴细胞活化，２４?小时??后采用ＡｎｎｅｘｍＶ／７ＡＡＤ染色检测Ｔ淋巴细胞存活情况。流式结果提示：共培养??２４小时后，高剂量组活细胞比例较空白组下降明显，提示高浓度（２００ｕｇ／ｍｌ）??ＴＧＰ可促进Ｔ淋巴细胞Ａ１ＣＤ，此外ＣＤ８＋Ｔ淋巴细胞活细胞比例下降更明显，??提示ＣＤ８叮淋巴细胞可能对药物更敏感（图２．４）。??２．２．５?ＴＧＰ对小鼠Ｔ淋巴细胞ＡＩＣＤ的影响（４８小时）??流式结果显示：ＴＧＰ处理活化Ｔ淋巴细胞４８小时后，与空白组相比，中剂??２２??
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