CYP3A4酶对土茯苓黄酮类成分代谢的影响
发布时间：2021-01-12 09:28
以土茯苓6种黄酮类成分为底物,研究了不同孵育时间、不同CYP3A4酶浓度对6种成分代谢的影响。通过土茯苓6种黄酮类成分的酶促动力学,得到米氏常数（Km）、最大反应速度(Vmax)和代谢清除率(Clint)。结果表明,以表儿茶素、新落新妇苷、落新妇苷、异落新妇苷、黄杞苷、白藜芦醇为底物时,Km分别为1.39,1.38,2.37,1.59,0.79,2.01μmol/L; Vmax分别为0.02,0.01,0.02,0.02,0.01,0.02μmol/（L·min）; Clint分别为（1.14,0.96,0.90,0.99,1.42,0.97）×10-2min-1。
【文章来源】：分析试验室. 2020,39(07)北大核心
【文章页数】：6 页
【部分图文】：
空白组(a)，对照组(b)及样品组(c)孵育后的高效液相色谱图
在质量浓度为2.5 mg/m L的CYP3A4酶中分别加入浓度为10μmol/L的6种黄酮类成分，于30℃恒温箱中孵育30,60,90,120,180 min。结果如图2所示:土茯苓6种黄酮类成分在30～90 min内呈线性消除的趋势明显，孵化120 min后土茯苓6种黄酮类成分剩余百分数不高于20%，确定最佳孵化时间120 min。在质量浓度为1.0,1.5,2.0,2.5,3.0 mg/m L的CYP3A4酶中分别加入浓度为10μmol/L的6种黄酮类成分，于30℃恒温箱中孵育120 min。蛋白质量浓度-代谢消失率的关系如图3所示。结果表明随着CYP3A4酶浓度的增加，土茯苓6种黄酮类成分消失率有增加的趋势，当CYP3A4酶浓度为2.5 mg/m L，代谢消除率几乎不变，故选择2.5 mg/m L为最佳CYP3A4酶浓度。
在质量浓度为2.5 mg/mL的CYP3A4酶中，分别加入质量浓度为0.625,1.25,2.5,5,10μmol/L的6种黄酮类成分在NADPH再生反应系统中，30℃恒温箱中孵化120 min，底物质量浓度与代谢消失率的关系如图4所示。结果表明土茯苓6种黄酮类成分质量浓度大于5μmol/L时，其代谢速率并未随土茯苓6种黄酮类成分质量浓度的增加而呈线性增加，表现出明显的代谢饱和特性，确定最佳底物质量浓度为5μmol/L。图4 底物浓度对土茯苓6种黄酮类成分代谢的影响
【参考文献】：
期刊论文
[1]UHPLC-MS-MS同时测定化橘红中3个影响PXR-CYP3A4调控血脂成分[J]. 陈昭,张靖年,陈伟韬,胥爱丽,毕晓黎. 辽宁中医药大学学报. 2020(01)
[2]人参、甘草与附子配伍调控CYP450系统减轻肝毒性研究[J]. 李晗,张广平,马梦,苏萍,杨依霏,陈腾飞,叶祖光. 中国新药杂志. 2019(24)
[3]白及有效成分Militarine在肝微粒体中的体外代谢途径及其酶促动力学特征[J]. 夏涛,王昌权,陈浩,郑林,巩仔鹏,李月婷,李勇军,黄勇,潘洁. 中国药房. 2019(10)
[4]二氢杨梅素的肝病药理机制研究进展[J]. 李杜,王晓玲,叶(目亭)杰,闫晓风,胡旭东. 中西医结合肝病杂志. 2019(02)
[5]采用UPLC-MS/MS法研究辣薄荷基厚朴酚在不同种属肝微粒体中的代谢特征[J]. 邓星,罗莉娅,苟立平,温倩雯,汤明海,万丽. 中国药房. 2019(02)
[6]土茯苓药学研究概述[J]. 范九梅,马卓. 安徽农业科学. 2018(08)
[7]UPLC-TSQ-Endure质谱分析Rg3对2型糖尿病大鼠P450酶活性的影响[J]. 刘尚,戴雨霖,于珊珊,乔梦丹,郭云龙,郑飞,越皓. 分析试验室. 2018(01)
[8]斑蝥酸钠维生素B6和复方苦参注射液对人肝微粒体细胞色素P450酶活性的抑制作用[J]. 蔡小军,黄凯,宋惠珠,温浩,洪远. 中国临床药理学杂志. 2017(21)
[9]白藜芦醇对药物转运体和代谢酶影响的研究进展[J]. 贾永明,刘志浩,刘克辛. 药学学报. 2016(06)
本文编号：2972603
【文章来源】：分析试验室. 2020,39(07)北大核心
【文章页数】：6 页
【部分图文】：
空白组(a)，对照组(b)及样品组(c)孵育后的高效液相色谱图
在质量浓度为2.5 mg/m L的CYP3A4酶中分别加入浓度为10μmol/L的6种黄酮类成分，于30℃恒温箱中孵育30,60,90,120,180 min。结果如图2所示:土茯苓6种黄酮类成分在30～90 min内呈线性消除的趋势明显，孵化120 min后土茯苓6种黄酮类成分剩余百分数不高于20%，确定最佳孵化时间120 min。在质量浓度为1.0,1.5,2.0,2.5,3.0 mg/m L的CYP3A4酶中分别加入浓度为10μmol/L的6种黄酮类成分，于30℃恒温箱中孵育120 min。蛋白质量浓度-代谢消失率的关系如图3所示。结果表明随着CYP3A4酶浓度的增加，土茯苓6种黄酮类成分消失率有增加的趋势，当CYP3A4酶浓度为2.5 mg/m L，代谢消除率几乎不变，故选择2.5 mg/m L为最佳CYP3A4酶浓度。
在质量浓度为2.5 mg/mL的CYP3A4酶中，分别加入质量浓度为0.625,1.25,2.5,5,10μmol/L的6种黄酮类成分在NADPH再生反应系统中，30℃恒温箱中孵化120 min，底物质量浓度与代谢消失率的关系如图4所示。结果表明土茯苓6种黄酮类成分质量浓度大于5μmol/L时，其代谢速率并未随土茯苓6种黄酮类成分质量浓度的增加而呈线性增加，表现出明显的代谢饱和特性，确定最佳底物质量浓度为5μmol/L。图4 底物浓度对土茯苓6种黄酮类成分代谢的影响
【参考文献】：
期刊论文
[1]UHPLC-MS-MS同时测定化橘红中3个影响PXR-CYP3A4调控血脂成分[J]. 陈昭,张靖年,陈伟韬,胥爱丽,毕晓黎. 辽宁中医药大学学报. 2020(01)
[2]人参、甘草与附子配伍调控CYP450系统减轻肝毒性研究[J]. 李晗,张广平,马梦,苏萍,杨依霏,陈腾飞,叶祖光. 中国新药杂志. 2019(24)
[3]白及有效成分Militarine在肝微粒体中的体外代谢途径及其酶促动力学特征[J]. 夏涛,王昌权,陈浩,郑林,巩仔鹏,李月婷,李勇军,黄勇,潘洁. 中国药房. 2019(10)
[4]二氢杨梅素的肝病药理机制研究进展[J]. 李杜,王晓玲,叶(目亭)杰,闫晓风,胡旭东. 中西医结合肝病杂志. 2019(02)
[5]采用UPLC-MS/MS法研究辣薄荷基厚朴酚在不同种属肝微粒体中的代谢特征[J]. 邓星,罗莉娅,苟立平,温倩雯,汤明海,万丽. 中国药房. 2019(02)
[6]土茯苓药学研究概述[J]. 范九梅,马卓. 安徽农业科学. 2018(08)
[7]UPLC-TSQ-Endure质谱分析Rg3对2型糖尿病大鼠P450酶活性的影响[J]. 刘尚,戴雨霖,于珊珊,乔梦丹,郭云龙,郑飞,越皓. 分析试验室. 2018(01)
[8]斑蝥酸钠维生素B6和复方苦参注射液对人肝微粒体细胞色素P450酶活性的抑制作用[J]. 蔡小军,黄凯,宋惠珠,温浩,洪远. 中国临床药理学杂志. 2017(21)
[9]白藜芦醇对药物转运体和代谢酶影响的研究进展[J]. 贾永明,刘志浩,刘克辛. 药学学报. 2016(06)
本文编号：2972603
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