和厚朴酚通过ROS/ERK1/2信号通路诱导人骨肉瘤细胞的凋亡和自噬
发布时间：2021-01-12 12:14
目的:骨肉瘤是最常见的原发性恶性骨肿瘤。尽管骨肉瘤患者目前的生存率能达到70%左右,但是在过去数十年中骨肉瘤的治疗缺乏突破性的进展。而且骨肉瘤的转移和复发,极大影响了患者预后。因此寻找骨肉瘤新的治疗方法是临床上一项紧迫的任务。和厚朴酚是一个从木兰科植物中提取的联苯类化合物,已被发现具有治疗脑缺血、焦虑症、疼痛的作用,而且具有抗微生物、抗炎和抗肿瘤的特性。鉴于和厚朴酚的抗肿瘤作用,因此本研究旨在探索和厚朴酚对骨肉瘤的治疗作用。方法:在本研究中,我们通过细胞活性实验和克隆形成实验检测和厚朴酚对人骨肉瘤细胞的增殖抑制作用。通过细胞周期流式和周期相关蛋白检测研究和厚朴酚对细胞周期的影响。通过细胞凋亡流式、线粒体膜电位检测和凋亡相关蛋白的检测研究和厚朴酚对细胞凋亡的影响。使用AO染色、MDC染色、电镜观察和自噬相关蛋白检测探索和厚朴酚对细胞自噬的影响。我们使用Z-VAD-FMK和3-MA分别抑制凋亡和自噬,观察二者的交互作用。之后检测了和厚朴酚处理细胞后ROS和ERK1/2的表达水平。再使用ROS清除剂和ERK1/2通路抑制剂PD98059并检测和厚朴酚诱导的凋亡和自噬是否改变。最后对裸鼠异体种...
【文章来源】：浙江大学浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：104 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图２．１和厚朴酚抑制骨肉瘤细胞增殖??
种抑制作用是否通过诱导细胞周期阻滞实现的，我们检验了经过和厚朴酚处理的??Ｈ０Ｓ和Ｕ２０Ｓ细胞的细胞周期分布。通过流式细胞仪的检测，我们发现和厚朴酚??导致了骨肉瘤细胞的Ｇ０／Ｇ１期阻滞，并伴有Ｇ２／Ｍ期和Ｓ期的比例下降（图２．３）。??为了进一步探究和厚朴酚引起细胞周期阻滞的分子机制，我们检测了细胞周期相??关蛋白的表达，发现ＣｙｃｌｉｎＥ、ＣＤＫ４和ＣｙｃｌｉｎＤｌ的表达下调并且呈浓度依赖趋??势（图２．４）。由于这些蛋白在Ｇ１期向Ｓ期转变中发挥重要作用，验证了流式细胞??１７??
?ｊ＂??Ｊ?，ｖｖｖ??ＨＮＫ２０ｐＭ?ＨＮＫ?３０?［ｉＭ?°?Ｊｒ??图２．２和厚朴酚抑制ＨＯＳ和Ｕ２０Ｓ细胞克隆形成??２．３．２和厚朴酚诱导骨肉瘤细胞的细胞周期阻滞??在上一小部分中我们发现和厚朴酚能够抑制骨肉瘤细胞的增殖，为了探究这??种抑制作用是否通过诱导细胞周期阻滞实现的，我们检验了经过和厚朴酚处理的??Ｈ０Ｓ和Ｕ２０Ｓ细胞的细胞周期分布。通过流式细胞仪的检测，我们发现和厚朴酚??导致了骨肉瘤细胞的Ｇ０／Ｇ１期阻滞，并伴有Ｇ２／Ｍ期和Ｓ期的比例下降（图２．３）。??为了进一步探究和厚朴酚引起细胞周期阻滞的分子机制，我们检测了细胞周期相??关蛋白的表达，发现ＣｙｃｌｉｎＥ、ＣＤＫ４和ＣｙｃｌｉｎＤｌ的表达下调并且呈浓度依赖趋??势（图２．４）。由于这些蛋白在Ｇ１期向Ｓ期转变中发挥重要作用，验证了流式细胞??１７??
【参考文献】：
期刊论文
[1]Effect of MicroR NA-101 on Proliferation and Apoptosis of Human Osteosarcoma Cells by Targeting mTOR[J]. 林松,邵楠楠,范磊,马秀才,浦飞飞,邵增务. Journal of Huazhong University of Science and Technology（Medical Sciences）. 2014(06)
[2]Expression of Beclin1 in Osteosarcoma and the Effects of Down-regulation of Autophagy on the Chemotherapeutic Sensitivity[J]. 张志才,邵增务,熊蠡茗,车彪,邓超,徐蔚蔚. Journal of Huazhong University of Science and Technology（Medical Sciences）. 2009(06)
[3]Honokiol:A potent chemotherapy candidate for human colorectal carcinoma[J]. Fei Chen Tao Wang Ying Gu Xiao-Li Xu Shu Zheng Xun Hu Cancer Institute,Second Affiliated Hospital of Zhejiang University,Hangzhou 310009,Zhejiang Province,ChinaYi-Feng Wu Life Science College,Zhejiang University,Hangzhou 310027,Zhejiang Province,China. World Journal of Gastroenterology. 2004(23)
[4]Honokiol induces apoptosis through p53-independent pathway in human colorectal cell line RKO[J]. Tao Wang Fei Chen Zhe Chen Yi-Feng Wu Xiao-Li Xu Shu Zheng Xun Hu Cancer Institute,Second Hospital of Medicine College of Zhejiang University,Hangzhou 310009,Zhejiang Province,ChinaWu,Life Science College of Zhejiang University,Hangzhou 310009,Zhejiang Province,China. World Journal of Gastroenterology. 2004(15)
本文编号：2972833
【文章来源】：浙江大学浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：104 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图２．１和厚朴酚抑制骨肉瘤细胞增殖??
种抑制作用是否通过诱导细胞周期阻滞实现的，我们检验了经过和厚朴酚处理的??Ｈ０Ｓ和Ｕ２０Ｓ细胞的细胞周期分布。通过流式细胞仪的检测，我们发现和厚朴酚??导致了骨肉瘤细胞的Ｇ０／Ｇ１期阻滞，并伴有Ｇ２／Ｍ期和Ｓ期的比例下降（图２．３）。??为了进一步探究和厚朴酚引起细胞周期阻滞的分子机制，我们检测了细胞周期相??关蛋白的表达，发现ＣｙｃｌｉｎＥ、ＣＤＫ４和ＣｙｃｌｉｎＤｌ的表达下调并且呈浓度依赖趋??势（图２．４）。由于这些蛋白在Ｇ１期向Ｓ期转变中发挥重要作用，验证了流式细胞??１７??
?ｊ＂??Ｊ?，ｖｖｖ??ＨＮＫ２０ｐＭ?ＨＮＫ?３０?［ｉＭ?°?Ｊｒ??图２．２和厚朴酚抑制ＨＯＳ和Ｕ２０Ｓ细胞克隆形成??２．３．２和厚朴酚诱导骨肉瘤细胞的细胞周期阻滞??在上一小部分中我们发现和厚朴酚能够抑制骨肉瘤细胞的增殖，为了探究这??种抑制作用是否通过诱导细胞周期阻滞实现的，我们检验了经过和厚朴酚处理的??Ｈ０Ｓ和Ｕ２０Ｓ细胞的细胞周期分布。通过流式细胞仪的检测，我们发现和厚朴酚??导致了骨肉瘤细胞的Ｇ０／Ｇ１期阻滞，并伴有Ｇ２／Ｍ期和Ｓ期的比例下降（图２．３）。??为了进一步探究和厚朴酚引起细胞周期阻滞的分子机制，我们检测了细胞周期相??关蛋白的表达，发现ＣｙｃｌｉｎＥ、ＣＤＫ４和ＣｙｃｌｉｎＤｌ的表达下调并且呈浓度依赖趋??势（图２．４）。由于这些蛋白在Ｇ１期向Ｓ期转变中发挥重要作用，验证了流式细胞??１７??
【参考文献】：
期刊论文
[1]Effect of MicroR NA-101 on Proliferation and Apoptosis of Human Osteosarcoma Cells by Targeting mTOR[J]. 林松,邵楠楠,范磊,马秀才,浦飞飞,邵增务. Journal of Huazhong University of Science and Technology（Medical Sciences）. 2014(06)
[2]Expression of Beclin1 in Osteosarcoma and the Effects of Down-regulation of Autophagy on the Chemotherapeutic Sensitivity[J]. 张志才,邵增务,熊蠡茗,车彪,邓超,徐蔚蔚. Journal of Huazhong University of Science and Technology（Medical Sciences）. 2009(06)
[3]Honokiol:A potent chemotherapy candidate for human colorectal carcinoma[J]. Fei Chen Tao Wang Ying Gu Xiao-Li Xu Shu Zheng Xun Hu Cancer Institute,Second Affiliated Hospital of Zhejiang University,Hangzhou 310009,Zhejiang Province,ChinaYi-Feng Wu Life Science College,Zhejiang University,Hangzhou 310027,Zhejiang Province,China. World Journal of Gastroenterology. 2004(23)
[4]Honokiol induces apoptosis through p53-independent pathway in human colorectal cell line RKO[J]. Tao Wang Fei Chen Zhe Chen Yi-Feng Wu Xiao-Li Xu Shu Zheng Xun Hu Cancer Institute,Second Hospital of Medicine College of Zhejiang University,Hangzhou 310009,Zhejiang Province,ChinaWu,Life Science College of Zhejiang University,Hangzhou 310009,Zhejiang Province,China. World Journal of Gastroenterology. 2004(15)
本文编号：2972833
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