四逆散对慢性应激大鼠行为学以及海马区自噬的影响
发布时间：2021-01-21 04:09
目的:以慢性应激大鼠为研究对象,从行为学及海马区自噬角度探讨四逆散的作用机制。方法:Wistar大鼠随机分成正常对照组、模型组及四逆散低、中、高剂量组,每组10只。建立慢性应激动物模型,观察大鼠体质量改变;旷场实验、糖水消耗实验、Morris水迷宫实验检测大鼠行为学改变;电镜观察海马区自噬体/自噬溶酶体;Western blot检测LC3-Ⅱ、Beclin1、ULK1、P62蛋白表达。结果:造模12 d,与正常对照组比较,模型组大鼠体质量显著降低（P<0.05）;与模型组比较,四逆散中、高剂量组大鼠体质量显著升高（P<0.05）。造模21 d,与正常对照组比较,模型组大鼠体质量、旷场总路程、平均速度、糖水偏好率显著降低（P<0.05）;Morris水迷宫第4天潜伏期显著延长（P<0.05）。与模型组比较,四逆散中、高剂量组旷场总路程、平均速度及糖水偏好率显著升高,潜伏期显著缩短（P<0.05）。各组穿台次数差异无统计学意义（P>0.05）。正常对照组无自噬体/自噬溶酶体,模型组可见大量自噬体/自噬溶酶体。与模型组比较,四逆散各剂量组自噬体/自噬溶酶体...
【文章来源】：中药材. 2020,43(03)北大核心
【文章页数】：5 页
【部分图文】：
电镜检测四逆散对慢性应激大鼠海马自噬体/自噬溶酶体的影响(×11 000)
旷场实验是研究动物自发活动与探索行为的实验[12]。糖水偏好率是反映抑郁症实验动物快感缺乏的指标。Morris水迷宫是反应动物空间学习记忆能力的实验[13]。以上是抑郁症模型中最为可靠的行为学观察及评价指标。造模12 d,慢性应激大鼠仅体质量降低,而其他行为学指标变化均无统计学意义。而21 d造模,慢性应激大鼠的体质量、旷场实验总路程和平均速度、糖水偏好率及水迷宫潜伏期均有显著改变,提示造模21 d慢性应激大鼠模型的形成。这与蒋洪等[14]的研究结果一致。此外,四逆散可逆转上述结果,说明四逆散能改善慢性应激大鼠的类抑郁症状,由此推测本研究所造模型的中医证型为肝气郁滞。Morris水迷宫中各组穿台次数变化无统计学意义可能是由于除正常对照组外,其余各组在应激时都进行过冰泳。而冰泳对于正常对照组来说也是一种应激。已有研究表明慢性应激可升高海马神经元相关自噬基因的表达,且氟西汀可逆转上述情况[15]。为进一步探寻四逆散抗慢性应激的机制,本研究观察了大鼠海马区自噬水平。自噬是细胞的一项最基本的生理功能,对于维持细胞内环境稳定具有重要作用。透射电镜可观察到典型的自噬体等超微结构,是检测细胞自噬的金标准[16]。Beclin1是主要调控自噬体膜合成的基因[17]。而LC3-Ⅱ定位于前自噬体和自噬体,随自噬体膜的升高而升高[18]。P62是一种可将泛素化蛋白连接到LC3蛋白上的连接蛋白,其表达水平降低提示自噬降解完成[19]。ULK1与Atg13、FIP200形成的蛋白复合物可调控自噬体的早期形成,检测以上蛋白可反映大鼠海马区自噬水平。在本研究中,与正常对照组比较,模型组自噬体/自噬溶酶体增多且LC3-Ⅱ、Beclin1、ULK1蛋白表达升高,P62蛋白表达降低,提示慢性应激大鼠海马区自噬被激活,这与周江霞[20]的研究结果一致。而与模型组比较,四逆散可减少自噬体/自噬溶酶体并降低LC3-Ⅱ、Beclin1、ULK1蛋白表达量和升高P62蛋白表达量,表明四逆散可抑制慢性应激大鼠海马区过度自噬。笔者推测四逆散可能通过抑制海马区过度自噬从而改善大鼠抑郁样行为。但该推测还需进一步证明。
【参考文献】：
期刊论文
[1]扶肝阳化痰开窍法对抑郁模型大鼠行为及海马形态结构的影响研究[J]. 蒋洪,孙卉,陈建. 中国中医基础医学杂志. 2019(06)
[2]对CUS抑郁症大鼠模型海马齿状回突触改变的体视学研究[J]. 张杨,梁芯,唐静,高原,黄春霞,蒋林,綦英强,朱殷青,唐勇. 第三军医大学学报. 2016(13)
[3]自噬流的检测方法[J]. 吕晓希,胡卓伟. 药学学报. 2016(01)
[4]Beclin 1在凋亡和自噬中的调节作用[J]. 张雨晴,张丽慧,魏尔清,杨怡. 中国生物化学与分子生物学报. 2015(04)
[5]慢性应激对2型糖尿病大鼠HPA轴紊乱及海马损伤的影响[J]. 杨蕙,王宇红,张秀丽,尹玲桃,孟盼. 中华中医药学刊. 2014(11)
[6]逍遥散治疗慢性束缚应激焦虑模型大鼠行为学评价[J]. 赵宏波,白晓晖,李晓娟,李娜,刘玥芸,张轶芳,金钟晔,刘群,李静,王鑫杏,姜幼明,陈家旭. 中华中医药杂志. 2014(05)
[7]柴胡疏肝散及逍遥散对慢性心理应激大鼠血清皮质酮及胃肠激素的影响[J]. 敖海清,徐志伟,严灿,苏俊芳,王文竹. 中药新药与临床药理. 2007(04)
[8]水迷宫重复测量数据的方差分析及其在SPSS中的实现[J]. 邱宏,金国琴,金如锋,赵伟康. 中西医结合学报. 2007(01)
[9]抑郁症中医证候及证候要素分布特点的文献研究[J]. 赵燕,王天芳,于春光,李志更,李雪,王庆国. 中医杂志. 2006(09)
[10]应激对机体各器官、系统的损害作用研究初探[J]. 寇正涌,李非非. 吉林师范大学学报(自然科学版). 2005(01)
本文编号：2990428
【文章来源】：中药材. 2020,43(03)北大核心
【文章页数】：5 页
【部分图文】：
电镜检测四逆散对慢性应激大鼠海马自噬体/自噬溶酶体的影响(×11 000)
旷场实验是研究动物自发活动与探索行为的实验[12]。糖水偏好率是反映抑郁症实验动物快感缺乏的指标。Morris水迷宫是反应动物空间学习记忆能力的实验[13]。以上是抑郁症模型中最为可靠的行为学观察及评价指标。造模12 d,慢性应激大鼠仅体质量降低,而其他行为学指标变化均无统计学意义。而21 d造模,慢性应激大鼠的体质量、旷场实验总路程和平均速度、糖水偏好率及水迷宫潜伏期均有显著改变,提示造模21 d慢性应激大鼠模型的形成。这与蒋洪等[14]的研究结果一致。此外,四逆散可逆转上述结果,说明四逆散能改善慢性应激大鼠的类抑郁症状,由此推测本研究所造模型的中医证型为肝气郁滞。Morris水迷宫中各组穿台次数变化无统计学意义可能是由于除正常对照组外,其余各组在应激时都进行过冰泳。而冰泳对于正常对照组来说也是一种应激。已有研究表明慢性应激可升高海马神经元相关自噬基因的表达,且氟西汀可逆转上述情况[15]。为进一步探寻四逆散抗慢性应激的机制,本研究观察了大鼠海马区自噬水平。自噬是细胞的一项最基本的生理功能,对于维持细胞内环境稳定具有重要作用。透射电镜可观察到典型的自噬体等超微结构,是检测细胞自噬的金标准[16]。Beclin1是主要调控自噬体膜合成的基因[17]。而LC3-Ⅱ定位于前自噬体和自噬体,随自噬体膜的升高而升高[18]。P62是一种可将泛素化蛋白连接到LC3蛋白上的连接蛋白,其表达水平降低提示自噬降解完成[19]。ULK1与Atg13、FIP200形成的蛋白复合物可调控自噬体的早期形成,检测以上蛋白可反映大鼠海马区自噬水平。在本研究中,与正常对照组比较,模型组自噬体/自噬溶酶体增多且LC3-Ⅱ、Beclin1、ULK1蛋白表达升高,P62蛋白表达降低,提示慢性应激大鼠海马区自噬被激活,这与周江霞[20]的研究结果一致。而与模型组比较,四逆散可减少自噬体/自噬溶酶体并降低LC3-Ⅱ、Beclin1、ULK1蛋白表达量和升高P62蛋白表达量,表明四逆散可抑制慢性应激大鼠海马区过度自噬。笔者推测四逆散可能通过抑制海马区过度自噬从而改善大鼠抑郁样行为。但该推测还需进一步证明。
【参考文献】：
期刊论文
[1]扶肝阳化痰开窍法对抑郁模型大鼠行为及海马形态结构的影响研究[J]. 蒋洪,孙卉,陈建. 中国中医基础医学杂志. 2019(06)
[2]对CUS抑郁症大鼠模型海马齿状回突触改变的体视学研究[J]. 张杨,梁芯,唐静,高原,黄春霞,蒋林,綦英强,朱殷青,唐勇. 第三军医大学学报. 2016(13)
[3]自噬流的检测方法[J]. 吕晓希,胡卓伟. 药学学报. 2016(01)
[4]Beclin 1在凋亡和自噬中的调节作用[J]. 张雨晴,张丽慧,魏尔清,杨怡. 中国生物化学与分子生物学报. 2015(04)
[5]慢性应激对2型糖尿病大鼠HPA轴紊乱及海马损伤的影响[J]. 杨蕙,王宇红,张秀丽,尹玲桃,孟盼. 中华中医药学刊. 2014(11)
[6]逍遥散治疗慢性束缚应激焦虑模型大鼠行为学评价[J]. 赵宏波,白晓晖,李晓娟,李娜,刘玥芸,张轶芳,金钟晔,刘群,李静,王鑫杏,姜幼明,陈家旭. 中华中医药杂志. 2014(05)
[7]柴胡疏肝散及逍遥散对慢性心理应激大鼠血清皮质酮及胃肠激素的影响[J]. 敖海清,徐志伟,严灿,苏俊芳,王文竹. 中药新药与临床药理. 2007(04)
[8]水迷宫重复测量数据的方差分析及其在SPSS中的实现[J]. 邱宏,金国琴,金如锋,赵伟康. 中西医结合学报. 2007(01)
[9]抑郁症中医证候及证候要素分布特点的文献研究[J]. 赵燕,王天芳,于春光,李志更,李雪,王庆国. 中医杂志. 2006(09)
[10]应激对机体各器官、系统的损害作用研究初探[J]. 寇正涌,李非非. 吉林师范大学学报(自然科学版). 2005(01)
本文编号：2990428
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