参附汤有效成分及配伍对H/R损伤心肌细胞保护的抗氧化机制研究
发布时间：2021-01-22 07:54
目的:参附汤是治疗缺血性心脏病的临床常用经典名方,主要用治心肾阳虚、阳虚气弱证缺血性心脏病,其疗效已得到广泛的临床证实。但因参附汤有效成分复杂多样,其对缺血性心肌的保护作用机制研究尚不深入。前期实验中已知参附汤有效成分中的人参皂苷Rg1、Re、乌头原碱Aconine单体及配伍对心肌细胞钙离子的有效调控作用,本实验研究从抗氧化应激角度探讨三种单体及配伍对缺氧复氧损伤H9C2心肌细胞的保护作用及分子机制。主要检测指标包括抗氧化蛋白酶类Prx-3、SOD2,活性氧（ROS）,促细胞凋亡因子Bax以及抗氧化相关上游信号通路因子Nrf-2。通过观察各种氧化应激相关蛋白活性变化,探讨参附汤三种有效成分及配伍对抗氧化相关蛋白标志物的调控作用及机制,以期从微观角度丰富参附汤对缺血性心肌病的保护作用机制,为参附汤益气温阳治疗缺血性心脏病的中医药理论提供现代科学证据。研究结果显示,Rg1/Re配伍组能够上调Prx-3/SOD2表达并降低ROS生成水平;Rg1/Aconine配伍组能够激活Nrf-2信号通路并下调ROS水平;Aconine组可以上调Prx-3表达并降低ROS水平。实验结果证实参附汤三种有效成...
【文章来源】：北京中医药大学北京市 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：87 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
缺氧24H复氧3H对H9C2细胞生存率的影响(N=8)
确定细胞缺氧复氧损伤造模条件后,我们将细胞分组加药预培养,造模前镜下观察各组细胞形态均处于良好状态,然后严格按照造模条件进行缺氧复氧处理。在收集细胞进行后续实验之前,我们显微镜下选用20倍镜,对细胞形态拍照记录。见图2:3.3各有效组成分浓度组对缺氧复氧损伤H9C2细胞内Prx-3蛋白表达的影响
镜下肉眼观察各组细胞形态,判断各组药物对缺氧复氧损伤心肌细胞的保护作用。为了进一步客观证明参附汤三种有效成分对缺氧复氧损伤心肌细胞的保护作用,我们将分组培养于100mm培养皿并造模完成的细胞在低温环境下收集,并进行细胞蛋白提取,然后采用蛋白免疫印迹法测定各组细胞的Prx-3活性水平。结果发现,缺氧复氧损伤模型组细胞Prx-3水平明显下降(P<0.05,N=6),用药各组均不同程度的提高了缺氧复氧损伤细胞的Prx-3水平,如图3所示。虽然用药各组均呈现了保护趋势,但Rg1+HR组、Re+HR组、Re+Aconine+HR组、Rg1+Re+Aconine+HR组对缺氧复氧损伤心肌细胞Prx-3水平的影响并无明显差异(P>0.05,N=6);只有Aconine+HR、Rg1+Re+HR、Rg1+Aconine+HR组则明显提高了缺氧复氧损伤心肌细胞的Prx-3水平(P<0.01,N=6)。3.3.2细胞免疫荧光法检测细胞内Prx-3水平
【参考文献】：
期刊论文
[1]参附汤合右归饮治疗心肾阳虚型慢性心衰病临床观察[J]. 贾祥胜. 光明中医. 2019(06)
[2]急性心肌梗死后缺血再灌注性心律失常发病机制及预防的研究进展[J]. 吴丹. 中西医结合心血管病电子杂志. 2019(08)
[3]参附汤治疗急性心肌梗死合并心源性休克临床研究[J]. 李建杰,李丽,王亚宽,张家妍. 新中医. 2019(02)
[4]Nrf2/HO-1信号轴在氧化应激性疾病中的机制[J]. 王甜甜,陈淳媛,杨雷,曾志辉,曾茂君,蒋文,刘琳,赵明一. 中南大学学报(医学版). 2019(01)
[5]温阳化瘀解毒法治疗脓毒症心功能障碍的临床观察[J]. 董妍,董旭,于盼盼,施保柱. 中国实验方剂学杂志. 2019(14)
[6]虾青素介导Nrf2信号通路减轻大强度运动诱导大鼠心肌细胞的凋亡[J]. 胡戈,曹建民,周海涛,郭娴,汪毅,牛衍龙,任奕,李倩. 食品工业科技. 2019(08)
[7]茶色素对家兔脑缺血再灌注损伤的保护作用研究[J]. 赵敏,王孟兰,刘娟,丁学海,唐可欣. 中西医结合心脑血管病杂志. 2018(22)
[8]川芎嗪对缺氧复氧诱导H9C2细胞损伤及凋亡的影响及其机制研究[J]. 岑晴云,蔡清香,刘慧慧,吴财能. 新中医. 2018(11)
[9]四逆汤合参附汤治疗慢性心力衰竭阳虚血瘀证[J]. 刘琛怡,李济廷,卢洁,卢健棋,温志浩,黄明剑,周宇祯,王林海,黄舒培. 长春中医药大学学报. 2018(04)
[10]参附汤合右归饮治疗心肾阳虚型慢性心衰病的疗效分析[J]. 王娥. 中国医药指南. 2018(21)
硕士论文
[1]参附注射液治疗急性失代偿性心力衰竭的临床研究[D]. 邓建南.辽宁中医药大学 2016
[2]参附注射液对心肾阳虚型慢性心力衰竭患者无创血流动力学影响的研究[D]. 魏璆妮.广州中医药大学 2009
[3]乌头类生物碱心肌毒性作用的研究[D]. 刘岩.沈阳药科大学 2007
本文编号：2992870
【文章来源】：北京中医药大学北京市 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：87 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
缺氧24H复氧3H对H9C2细胞生存率的影响(N=8)
确定细胞缺氧复氧损伤造模条件后,我们将细胞分组加药预培养,造模前镜下观察各组细胞形态均处于良好状态,然后严格按照造模条件进行缺氧复氧处理。在收集细胞进行后续实验之前,我们显微镜下选用20倍镜,对细胞形态拍照记录。见图2:3.3各有效组成分浓度组对缺氧复氧损伤H9C2细胞内Prx-3蛋白表达的影响
镜下肉眼观察各组细胞形态,判断各组药物对缺氧复氧损伤心肌细胞的保护作用。为了进一步客观证明参附汤三种有效成分对缺氧复氧损伤心肌细胞的保护作用,我们将分组培养于100mm培养皿并造模完成的细胞在低温环境下收集,并进行细胞蛋白提取,然后采用蛋白免疫印迹法测定各组细胞的Prx-3活性水平。结果发现,缺氧复氧损伤模型组细胞Prx-3水平明显下降(P<0.05,N=6),用药各组均不同程度的提高了缺氧复氧损伤细胞的Prx-3水平,如图3所示。虽然用药各组均呈现了保护趋势,但Rg1+HR组、Re+HR组、Re+Aconine+HR组、Rg1+Re+Aconine+HR组对缺氧复氧损伤心肌细胞Prx-3水平的影响并无明显差异(P>0.05,N=6);只有Aconine+HR、Rg1+Re+HR、Rg1+Aconine+HR组则明显提高了缺氧复氧损伤心肌细胞的Prx-3水平(P<0.01,N=6)。3.3.2细胞免疫荧光法检测细胞内Prx-3水平
【参考文献】：
期刊论文
[1]参附汤合右归饮治疗心肾阳虚型慢性心衰病临床观察[J]. 贾祥胜. 光明中医. 2019(06)
[2]急性心肌梗死后缺血再灌注性心律失常发病机制及预防的研究进展[J]. 吴丹. 中西医结合心血管病电子杂志. 2019(08)
[3]参附汤治疗急性心肌梗死合并心源性休克临床研究[J]. 李建杰,李丽,王亚宽,张家妍. 新中医. 2019(02)
[4]Nrf2/HO-1信号轴在氧化应激性疾病中的机制[J]. 王甜甜,陈淳媛,杨雷,曾志辉,曾茂君,蒋文,刘琳,赵明一. 中南大学学报(医学版). 2019(01)
[5]温阳化瘀解毒法治疗脓毒症心功能障碍的临床观察[J]. 董妍,董旭,于盼盼,施保柱. 中国实验方剂学杂志. 2019(14)
[6]虾青素介导Nrf2信号通路减轻大强度运动诱导大鼠心肌细胞的凋亡[J]. 胡戈,曹建民,周海涛,郭娴,汪毅,牛衍龙,任奕,李倩. 食品工业科技. 2019(08)
[7]茶色素对家兔脑缺血再灌注损伤的保护作用研究[J]. 赵敏,王孟兰,刘娟,丁学海,唐可欣. 中西医结合心脑血管病杂志. 2018(22)
[8]川芎嗪对缺氧复氧诱导H9C2细胞损伤及凋亡的影响及其机制研究[J]. 岑晴云,蔡清香,刘慧慧,吴财能. 新中医. 2018(11)
[9]四逆汤合参附汤治疗慢性心力衰竭阳虚血瘀证[J]. 刘琛怡,李济廷,卢洁,卢健棋,温志浩,黄明剑,周宇祯,王林海,黄舒培. 长春中医药大学学报. 2018(04)
[10]参附汤合右归饮治疗心肾阳虚型慢性心衰病的疗效分析[J]. 王娥. 中国医药指南. 2018(21)
硕士论文
[1]参附注射液治疗急性失代偿性心力衰竭的临床研究[D]. 邓建南.辽宁中医药大学 2016
[2]参附注射液对心肾阳虚型慢性心力衰竭患者无创血流动力学影响的研究[D]. 魏璆妮.广州中医药大学 2009
[3]乌头类生物碱心肌毒性作用的研究[D]. 刘岩.沈阳药科大学 2007
本文编号：2992870
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