基于VEGF/KDR环路探讨双丹明目胶囊抗糖尿病视网膜病变的作用机制

发布时间：2021-01-27 10:37

　　目的:从整体动物实验和体外细胞实验两个层面,探讨中药双丹明目胶囊对糖尿病视网膜病变（Diabetic retinopathy,DR）大鼠新生血管的抑制作用及对内皮祖细胞（Endothelial progenitor cells,EPCs）的增殖抑制作用,并以VEGF/KDR环路为切入点,阐述双丹明目胶囊发挥作用的具体机制,为DR的发病机制研究及中医药防治提供实验依据。方法:1.取人脐带血原代分离EPCs,采用其特异性抗原CD34进行鉴定,传代消化后分为8组:对照组、空白血清组、双丹明目胶囊含药血清组（共5组:11.2mg/ml、2.24 mg/ml、1.12 mg/ml、0.56 mg/ml、0.28 mg/ml）、导升明含药血清组,药物分别干预24 h和48 h后,MTT法检测细胞增殖抑制率,摸索双丹明目胶囊的最佳给药浓度及干预时间;确定给药浓度及干预时间后,将EPCs分为5组:空白血清组、双丹明目胶囊含药血清组、导升明含药血清组、VEGF/KDRSU1498阻断剂组、双丹明目胶囊含药血清+VEGF/KDRSU1498阻断剂组,采用Elisa法检测细胞上清液中VEGF含量,Weste... 

【文章来源】：湖南中医药大学湖南省

【文章页数】：108 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

人脐血来源内皮祖细胞原代培养形态学观察结果

17空白对照组 EPCs CD133 标记占比：19.14%图2. 人脐血 EPCs 的表面抗原流式细胞仪分析结果2.2 含药血清成分的鉴定双丹明目胶囊、大鼠空白血浆、大鼠含药血浆进样量 2μL，Q-TOF-MS 正离子模式下总离子流（TIC）图如下。采用 Agilent Masshunter QualitativeAnalysis 工作站中的分子特征提取（MFE）功能，通过设定合适的阈值参数，对双丹明目胶囊入血成分正离子模式下采集到的总离子流图进行提取，获得化合物的准离子分子峰（如[M+H]+，[M+Na]+）信息，根据供试品的色谱保留时间、质谱准分子离子峰(MS)和碎片离子(MS/MS)等信息，共检测到 39 个质谱峰（外加丹参酮类3 个代谢成分），如图 3、图 4、图 5 所示

丹明目胶囊体外样品并参考文献报道的质谱数据进行推导确定。最终本实验从双丹明目胶囊中共鉴定出 36 个入血的原型成分，详见表 8。图3. 双丹明目胶囊样品 UPLC/MS/MS 总离子流图

【参考文献】：
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本文编号：3002907