雷公藤红素对P物质致敏肥大细胞中PI3K/AKT/GSK3β信号通路的影响
发布时间：2021-01-31 18:16
目的以经P物质致敏的肥大细胞瘤细胞P815为模型,检测雷公藤红素对其细胞活性的影响,并分析PI3K/AKT/GSK3β通路上关键基因和蛋白表达量变化,从而为深入揭示雷公藤红素在抗炎和抗过敏中的分子机制奠定基础。方法以肥大细胞瘤细胞P815为研究对象,通过基于CCK8方法的细胞活力检测,确定最佳的P物质处理浓度和时间,构建致敏模型;采用同样的方法,筛选出合适的雷公藤红素处理浓度和时间。在此基础上,检测不同浓度和时间的雷公藤红素干预对致敏细胞活性的影响。以无雷公藤处理的P物质模型组为对照,采用qPCR法检测雷公藤红素干预组中PI3K/AKT/GSK3β信号通路的主要基因的相对表达量;同时采用流式细胞术检测该信号通路关键蛋白AKT2和GSK3β的表达。结果1.对于单纯的P物质处理组,在50-150μM处理浓度下,细胞存活率随时间增加而下降;其中100μM处理1h后细胞的存活率即降低为51.58%,确定为最佳的致敏条件。对于单纯的雷公藤红素组,当干预浓度超过2.5μM、时间超过1h后,细胞存活率明显随浓度增加和/或时间延长而降低;而浓度在2μM、时间在1h内,细胞存活率未受明显影响（P>...
【文章来源】：福建中医药大学福建省
【文章页数】：44 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
雷公藤红素的来源与结构式
趋化因子是一类能使细胞发生趋化运动的小分子分泌蛋白，能够刺激细胞向高浓度??刺激物定向移动，参与了机体免疫应答以及炎症过程［２７］。机体发生典型炎症反应后，趋??化因子能诱导淋巴细胞游走到炎症部位，同时参与天然免疫和以及获得性免疫应答机??制，抑制病毒感染并且增强Ｔ淋巴细胞应答［２８］。??Ｃｃｌ２４?（ｃｈｅｍｏｋｉｎｅｌｉｇａｎｄ２４）隶属于趋化因子家族，也被称为ｅｏｔａｘｉｎ－２，最早在致??敏豚鼠抗原刺激后的肺泡灌洗液中发现，有实验证实其在炎症反应中具有强烈且高特异??性趋化作用［２９］。当机体受到外界刺激，致敏肥大细胞迅速释放介质，包括组胺和趋化因??子，趋化因子在释放的同时也能够募集其他炎症因子，从而加重炎症反应［３Ｇ］。有研宄观??察到雷公藤红素对支气管哮喘小鼠气道炎症的抑制作用，发现雷公藤红素可以抑制肥大??细胞产生组胺和趋化因子ｔ３１］。??Ｃｃｒ６趋化因子受体６?（ｃｈｅｍｏｋｉｎｅｒｅｃｅｐｔｏｒ６）与Ｃｃｌ２４同属于趋化因子家族，趋化因??子受体是一类含有７个跨膜结构域的Ｇ－蛋白偶联受体（ＧＰＣＲｓ），能够介导趋化因子行??
图４不同时间和浓度的Ｐ物质处理下Ｐ８１５细胞的存活率??
【参考文献】：
期刊论文
[1]I型超敏反应中肥大细胞脱颗粒活性物质及其信号通路研究进展[J]. 邹丽,李欣,高金燕,陈红兵. 食品安全质量检测学报. 2015(11)
[2]119例非小细胞肺癌中CCR9的表达及其预后分析[J]. 王志维,雷珍牛,林辉,李柏钧,钟永泷,蓝娇. 临床与实验病理学杂志. 2015(07)
[3]趋化因子在肾细胞癌中的研究进展[J]. 陈少军,郑军华. 临床与病理杂志. 2015(04)
[4]肥大细胞的酪氨酸激酶与抗过敏药物的分子靶向[J]. 钱菲,祝甜甜,凌霜,李医明,许锦文. 中国药理学通报. 2015(04)
[5]雷公藤红素通过影响Akt信号通路和整合素表达抑制肺癌细胞的转移[J]. 徐佳,伍春莲,黄杰. 中国中药杂志. 2015(06)
[6]干扰素-λ对肥大细胞Toll样受体表达和细胞因子分泌的调节作用的研究[J]. 兰亚明,何韶衡. 中国生化药物杂志. 2014(08)
[7]雷公藤抗炎免疫调节活性单体的研究进展[J]. 李春杏,李太生,朱珠,谢静,吕玮. 中国中药杂志. 2014(21)
[8]CCR9在非小细胞肺癌患者外周血CD4+T淋巴细胞中的表达及其对趋化活性的影响[J]. 钟永泷,林辉,蓝娇,李柏钧. 中国临床新医学. 2014(04)
[9]Ⅰ型超敏反应性疾病的免疫治疗进展[J]. 曹慧,章星琪. 中国麻风皮肤病杂志. 2014(03)
[10]雷公藤内酯醇联合紫杉醇对COC1/DDP细胞凋亡的影响及其对PI3K/AKT/GSK3β信号通路的调控[J]. 刘斐,谭布珍. 现代妇产科进展. 2013(12)
博士论文
[1]CCK受体不同亚型对吗啡急慢性作用的影响及机制研究[D]. 郝立净.河北医科大学 2015
[2]雷公藤红素诱导人类风湿关节炎纤维样滑膜细胞凋亡、周期阻滞和DNA损伤作用机制的研究[D]. 徐曾涛.福建中医药大学 2013
[3]β-arrestins在细胞凋亡和TLR4介导的先天性免疫反应中分子调控机制的研究[D]. 杨小华.苏州大学 2013
[4]白介素-17A抑制GSK3β介导的细胞自噬调节机制及其在肺纤维化中的应用[D]. 刘虹.北京协和医学院 2013
[5]雷公藤红素对LP-1多发性骨髓瘤细胞株增殖凋亡及NF-κB信号通路的作用研究[D]. 倪海雯.南京中医药大学 2013
[6]消敏颗粒抗Ⅰ型超敏反应的实验研究[D]. 李忻红.辽宁中医药大学 2008
硕士论文
[1]SCF信号对肥大细胞IL-13的产生及迁移性的影响[D]. 汪忆梦.蚌埠医学院 2015
[2]神经肽P物质对大鼠骨髓基质干细胞的生物学调控效应及相关经典Wnt/β-catenin通路机制的实验研究[D]. 付苏.南方医科大学 2015
[3]GRKs和β-arrestins在GPCRs信号转导中作用的实验研究[D]. 田艳君.曲阜师范大学 2014
[4]PI3K/AKT/GSK3β信号通路在雷公藤内酯醇联合紫杉醇促进耐顺铂人上皮性卵巢癌细胞凋亡中的作用机制研究[D]. 刘斐.南昌大学医学院 2013
[5]骨髓间充质干细胞分泌因子对Ⅰ型变态反应的影响[D]. 高明敏.青岛大学 2012
[6]氧化应激中calpain对GSK-3β的片段化在其活性调节中的作用及机制[D]. 冯烨.华中科技大学 2012
[7]β-arrestin-1调控原发性胆汁性肝硬化患者自身反应性T细胞功能[D]. 黄元兰.第二军医大学 2011
[8]罗格列酮诱导人胃癌多药耐药细胞裸鼠移植瘤中胃癌细胞凋亡的作用及其机制[D]. 王维.南华大学 2011
[9]鼻咽癌组织中PI3K、mTOR、Pokemon和Ku70的表达及其临床病理学意义[D]. 韩艳艳.新疆医科大学 2010
[10]rHuEPO预处理对HK-2细胞缺血再灌注损伤中PI3K/Akt/GSK-3β通路的调控作用[D]. 杨永丽.华中科技大学 2010
本文编号：3011358
【文章来源】：福建中医药大学福建省
【文章页数】：44 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
雷公藤红素的来源与结构式
趋化因子是一类能使细胞发生趋化运动的小分子分泌蛋白，能够刺激细胞向高浓度??刺激物定向移动，参与了机体免疫应答以及炎症过程［２７］。机体发生典型炎症反应后，趋??化因子能诱导淋巴细胞游走到炎症部位，同时参与天然免疫和以及获得性免疫应答机??制，抑制病毒感染并且增强Ｔ淋巴细胞应答［２８］。??Ｃｃｌ２４?（ｃｈｅｍｏｋｉｎｅｌｉｇａｎｄ２４）隶属于趋化因子家族，也被称为ｅｏｔａｘｉｎ－２，最早在致??敏豚鼠抗原刺激后的肺泡灌洗液中发现，有实验证实其在炎症反应中具有强烈且高特异??性趋化作用［２９］。当机体受到外界刺激，致敏肥大细胞迅速释放介质，包括组胺和趋化因??子，趋化因子在释放的同时也能够募集其他炎症因子，从而加重炎症反应［３Ｇ］。有研宄观??察到雷公藤红素对支气管哮喘小鼠气道炎症的抑制作用，发现雷公藤红素可以抑制肥大??细胞产生组胺和趋化因子ｔ３１］。??Ｃｃｒ６趋化因子受体６?（ｃｈｅｍｏｋｉｎｅｒｅｃｅｐｔｏｒ６）与Ｃｃｌ２４同属于趋化因子家族，趋化因??子受体是一类含有７个跨膜结构域的Ｇ－蛋白偶联受体（ＧＰＣＲｓ），能够介导趋化因子行??
图４不同时间和浓度的Ｐ物质处理下Ｐ８１５细胞的存活率??
【参考文献】：
期刊论文
[1]I型超敏反应中肥大细胞脱颗粒活性物质及其信号通路研究进展[J]. 邹丽,李欣,高金燕,陈红兵. 食品安全质量检测学报. 2015(11)
[2]119例非小细胞肺癌中CCR9的表达及其预后分析[J]. 王志维,雷珍牛,林辉,李柏钧,钟永泷,蓝娇. 临床与实验病理学杂志. 2015(07)
[3]趋化因子在肾细胞癌中的研究进展[J]. 陈少军,郑军华. 临床与病理杂志. 2015(04)
[4]肥大细胞的酪氨酸激酶与抗过敏药物的分子靶向[J]. 钱菲,祝甜甜,凌霜,李医明,许锦文. 中国药理学通报. 2015(04)
[5]雷公藤红素通过影响Akt信号通路和整合素表达抑制肺癌细胞的转移[J]. 徐佳,伍春莲,黄杰. 中国中药杂志. 2015(06)
[6]干扰素-λ对肥大细胞Toll样受体表达和细胞因子分泌的调节作用的研究[J]. 兰亚明,何韶衡. 中国生化药物杂志. 2014(08)
[7]雷公藤抗炎免疫调节活性单体的研究进展[J]. 李春杏,李太生,朱珠,谢静,吕玮. 中国中药杂志. 2014(21)
[8]CCR9在非小细胞肺癌患者外周血CD4+T淋巴细胞中的表达及其对趋化活性的影响[J]. 钟永泷,林辉,蓝娇,李柏钧. 中国临床新医学. 2014(04)
[9]Ⅰ型超敏反应性疾病的免疫治疗进展[J]. 曹慧,章星琪. 中国麻风皮肤病杂志. 2014(03)
[10]雷公藤内酯醇联合紫杉醇对COC1/DDP细胞凋亡的影响及其对PI3K/AKT/GSK3β信号通路的调控[J]. 刘斐,谭布珍. 现代妇产科进展. 2013(12)
博士论文
[1]CCK受体不同亚型对吗啡急慢性作用的影响及机制研究[D]. 郝立净.河北医科大学 2015
[2]雷公藤红素诱导人类风湿关节炎纤维样滑膜细胞凋亡、周期阻滞和DNA损伤作用机制的研究[D]. 徐曾涛.福建中医药大学 2013
[3]β-arrestins在细胞凋亡和TLR4介导的先天性免疫反应中分子调控机制的研究[D]. 杨小华.苏州大学 2013
[4]白介素-17A抑制GSK3β介导的细胞自噬调节机制及其在肺纤维化中的应用[D]. 刘虹.北京协和医学院 2013
[5]雷公藤红素对LP-1多发性骨髓瘤细胞株增殖凋亡及NF-κB信号通路的作用研究[D]. 倪海雯.南京中医药大学 2013
[6]消敏颗粒抗Ⅰ型超敏反应的实验研究[D]. 李忻红.辽宁中医药大学 2008
硕士论文
[1]SCF信号对肥大细胞IL-13的产生及迁移性的影响[D]. 汪忆梦.蚌埠医学院 2015
[2]神经肽P物质对大鼠骨髓基质干细胞的生物学调控效应及相关经典Wnt/β-catenin通路机制的实验研究[D]. 付苏.南方医科大学 2015
[3]GRKs和β-arrestins在GPCRs信号转导中作用的实验研究[D]. 田艳君.曲阜师范大学 2014
[4]PI3K/AKT/GSK3β信号通路在雷公藤内酯醇联合紫杉醇促进耐顺铂人上皮性卵巢癌细胞凋亡中的作用机制研究[D]. 刘斐.南昌大学医学院 2013
[5]骨髓间充质干细胞分泌因子对Ⅰ型变态反应的影响[D]. 高明敏.青岛大学 2012
[6]氧化应激中calpain对GSK-3β的片段化在其活性调节中的作用及机制[D]. 冯烨.华中科技大学 2012
[7]β-arrestin-1调控原发性胆汁性肝硬化患者自身反应性T细胞功能[D]. 黄元兰.第二军医大学 2011
[8]罗格列酮诱导人胃癌多药耐药细胞裸鼠移植瘤中胃癌细胞凋亡的作用及其机制[D]. 王维.南华大学 2011
[9]鼻咽癌组织中PI3K、mTOR、Pokemon和Ku70的表达及其临床病理学意义[D]. 韩艳艳.新疆医科大学 2010
[10]rHuEPO预处理对HK-2细胞缺血再灌注损伤中PI3K/Akt/GSK-3β通路的调控作用[D]. 杨永丽.华中科技大学 2010
本文编号：3011358
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