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补肾强督治偻方对强直性脊柱炎动物模型IL-23/Th17轴的影响

发布时间:2021-02-06 13:41
  目的:本文观察补肾强督治偻方对强直性脊柱炎动物模型免疫炎症的作用,以及对IL-23/Th17轴的影响。方法:选择使用BALB/c小鼠于第0天、第20天、第40天尾部皮下注射牛软骨来源蛋白聚糖构建蛋白聚糖诱导小鼠关节炎模型(PGIA),作为研究的强直性脊柱炎动物模型。在此基础上设置对照组、模型组、补肾强督治偻方组和塞来昔布组,每组10只。空白组为正常BALB/c小鼠,其余各组经过PGIA造模操作。在第61-90天,空白组、模型组小鼠给予生理盐水灌胃,补肾强督治偻方组小鼠给予临床等效剂量的补肾强督治偻方水提液灌胃,塞来昔布组小鼠给予临床等效剂量的塞来昔布溶液灌胃,每天一次。实验结束后处理小鼠,行各项实验指标观察。主要实验指标包括:用国际动物关节炎评分量表进行小鼠后爪关节肿胀评分;小动物活体成像仪对小鼠脊椎关节、爪关节肿胀情况进行观察;进行脾脏指数、胸腺指数(TI)测量;提取脾脏总淋巴细胞,CCK-8法测量细胞增殖影响,用流式细胞术分析Th17细胞比例;采集血清,酶联免疫吸附试验(ELISA)法测量TNF-α、白介素IL-17、IL-23表达水平;提取肠壁组织总蛋白,并且ELISA法测量回肠... 

【文章来源】:广州中医药大学广东省

【文章页数】:66 页

【学位级别】:硕士

【文章目录】:
摘要
Abstract
引言
第一章 文献研究
    1.1 强直性脊柱炎概述
    1.2 IL-23/Th17轴与AS关系的研究进展
        1.2.1 IL-23/Th17轴简介
        1.2.2 IL-23/Th17轴在AS患者中的表达情况
        1.2.3 靶向IL-23/Th17轴的生物制剂
    1.3 AS动物模型研究进展
        1.3.1 AS常见动物模型分类
        1.3.2 IL-23/Th17轴在蛋白聚糖诱导小鼠关节炎模型中的表达情况
    1.4 中医研究进展
        1.4.1 中医古籍对AS的相关描述
        1.4.2 补肾强督治偻方临床疗效肯定,可以改善其影像学进展
    1.5 科学假说的提出
第二章 实验研究
    2.1 动物与试剂耗材
        2.1.1 实验动物
        2.1.2 实验药品与试剂耗材
    2.2 实验方法
        2.2.1 构建PGIA小鼠模型
        2.2.2 制备补肾强督治偻方的冻干粉及水提液
        2.2.3 药物干预与给药方法
        2.2.4 检测指标
    2.3 统计学方法
    2.4 实验结果
        2.4.1 补肾强督治偻方干预对PGIA小鼠关节肿胀评分的影响
        2.4.2 补肾强督治偻方对PGIA小鼠脾脏指数(Spleen Index,SI)、胸腺指数(ThymusIndex,TI)改变的影响
        2.4.3 观察补肾强督治偻方水提液对PGIA小鼠脾脏总淋巴细胞体外增殖的影响
        2.4.4 流式细胞术补肾强督治偻方对PGIA小鼠脾脏Th17细胞的影响
        2.4.5 ELISA法检测补肾强督治偻方对PGIA小鼠血清TNF-α蛋白水平表达的影响
        2.4.6 ELISA法观察补肾强督治偻方对PGIA模型小鼠血清中IL-17、IL-23蛋白水平的表达影响
        2.4.7 ELISA法观察补肾强督治偻方对PGIA模型小鼠回肠组织中IL-17、IL-23蛋白水平的表达影响
        2.4.8 苏木素-伊红染色(HE)观察补肾强督治偻方对PGIA模型小鼠的组织病理学影响
        2.4.9 番红-固绿0染色观察补肾强督治偻方对PGIA模型小鼠关节软骨的影响
        2.4.10 免疫组化观察补肾强督治偻方对PGIA小鼠IL-23、IL-17表达的影响
第三章 讨论
总结与展望
参考文献
附录
在校期间发表论文情况
致谢
统计学审核证明


【参考文献】:
期刊论文
[1]蛋白聚糖诱导小鼠关节炎模型的研究进展[J]. 童文文,李甲,徐卫东.  第二军医大学学报. 2015(05)
[2]补肾强督治偻汤联合督灸治疗强直性脊柱炎的临床观察[J]. 章玲艳,林洁华,周颖燕,赵国青,何羿婷.  中国实验方剂学杂志. 2015(10)
[3]补肾强督治偻方对脂多糖刺激的小鼠RAW264.7细胞炎性细胞因子表达的影响[J]. 林洁华,黄闰月,江泽波,周颖燕,何羿婷.  广州中医药大学学报. 2015(02)
[4]补肾强督法对肾虚督寒型强直性脊柱炎患者Th17表达的影响[J]. 赵浩,王丹,符德玉.  中国医药导报. 2014(35)
[5]强直性脊柱炎流行病学研究进展[J]. 吴珊珊,段振华,潘发明.  安徽医科大学学报. 2013(08)
[6]何羿婷教授治疗强直性脊柱炎经验简介[J]. 刘益臻,何羿婷.  新中医. 2012(03)
[7]补肾强督方对强直性脊柱炎患者外周血单个核细胞产生MMP-9和TIMP-1的影响[J]. 张英泽,阎小萍,叶丽亚,张文健,娄晋宁.  中国骨伤. 2011(05)
[8]补肾强督方对强直性脊柱炎患者骨质疏松及骨量减少的影响[J]. 王昊,阎小萍,孔维萍,路平,罗薇,刘惠敏.  中国中西医结合杂志. 2011(04)
[9]补肾强督治(九娄)汤治疗肾虚督寒型强直性脊柱炎30例临床观察[J]. 何羿婷,余锋,卿立金,韩凌,孙静,刘益臻.  新中医. 2011(03)
[10]IL-23与IL-17在强直性脊柱炎患者中表达的初步研究[J]. 王新卫,林智明,廖泽涛,魏秋静,江颖娟,古洁若.  中国免疫学杂志. 2009(03)

博士论文
[1]TNF拮抗剂治疗对RA患者外周血Th亚群的影响其机制的究[D]. 陈丽娜.第四军医大学 2011
[2]IL-23R遗传变异、Th17细胞与强直性脊柱炎相关性研究[D]. 吴歆.第二军医大学 2008

硕士论文
[1]从JAK/STAT信号通路调控Th17分化探索补肾、清热、活血法干预强直性脊柱炎炎症分子机制[D]. 宋俊垚.北京中医药大学 2016
[2]强直性脊柱炎患者外周血Th1/Th17/Treg比率及其相关转录因子和细胞因子表达水平的研究[D]. 许秀秀.福建医科大学 2013
[3]补肾强督治偻汤对强直性脊柱炎患者骨质变化机理的研究[D]. 余锋.广州中医药大学 2007



本文编号:3020709

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