美洲大蠊抗肿瘤部位与抗溃疡性结肠炎部位分离纯化方法研究

发布时间：2021-02-09 18:16

　　目的肿瘤疾病是一种严重危害人类健康的疾病。美洲大蠊活性部位C-Ⅱ 3在细胞实验和动物实验方面都表现出良好的细胞毒和肿瘤抑制活性;溃疡性结肠炎具有病程迁移、易反复发作、癌变倾向等特点,被世界卫生组织列为现代难治疾病之一。同样源于美洲大蠊的活性部位TF在整体动物实验中显示了对溃疡性结肠炎的治疗有良好的效果。本课题以美洲大蠊粗浸膏为实验原料,分别对抗肿瘤肽类活性部位C- Ⅱ3和抗溃疡性结肠炎活性部位TF进行化学成分研究,并探讨其主要成分肽类物质的分离纯化方法,为其后续纯化工艺优化和药效学评价提供参考和物质基础。方法采用了系统分离纯化方法,探索抗肿瘤活性部位CⅡ-3中多肽物质的最佳分离纯化方案,包括:采用电泳方法对C-Ⅱ3进行实验,初步确定样品分子量区间;采用凝胶色谱法对样品C-Ⅱ1 3进行实验,探索分离样品C-Ⅱ 3使用的凝胶色谱填料及其分离条件;将葡聚糖凝胶初步分离的样品进行脱盐处理,采用离子交换柱进行试验,探索其最佳分离纯化条件;采用反相高压液相色谱对样品C - Ⅱ 3用葡聚糖凝胶分离后的组分再次分离,研究样品反相高压液相的分离工艺。先采用茚三酮显色法和福林酚法分别测定美洲大蠊抗溃疡性结... 

【文章来源】：大理大学云南省

【文章页数】：90 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１－２?Ｃ－ＩＩ?３在分离胶浓度为１２％，浓缩胶浓度为３．５％的ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳图??

Ｃ－Ｉｔ３（ｔＤＴＴ）?Ｃ－ＩＩ３（不含?ＤＴＴ）??图１－３?Ｃ－ＩＩ３在分离胶浓度为１５％，浓缩胶浓度为３．５％的ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳图??由图１－３可得，在考马斯亮蓝Ｒ－２５０的染色条件下，即使上样浓度增加一倍??也没有较大分子量的蛋白多肽条带显出，含有ＤＴＴ的样品和不含ＤＴＴ的样品也??保持一致。??图１－２和图１－３均表明，样品Ｃ－ＩＩ?３的分子量大部分都在ｌＯＫＤａ以下，仅??有很少量的蛋白多肽分子量在２５ＫＤａ左右，这个结果显示样品可以用反相高??压液相色谱进行分离而不会引起蛋白多肽得结构变化，从而导致样品失活。但??此结果并不足确定用来进行分离纯化实验的葡聚糖凝胶，如需进一步确定样品??多肽分子量区间，就要运用Ｔｒｉｃｉｎｅ－ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳体系。??２０．１ＫＤ３?ｎｍｍ??１４．４ＫＤａ?—??７．８ＫＤａ??５．８ＫＤａ??３．３ＫＤａ??Ｍａｒｋｅｒ?粗浸音?Ｃ－ＩＩ３??图１－４?Ｃ－ＩＩ３在分离胶浓度２０％，间隙胶浓度为１０％，浓缩胶浓度为３．５％的??Ｔｒｉｃｉｎｅ－ＳＤＳ－ＰＡＧＥ?电泳图??样品上样量为２０ＵＬ

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本文编号：3026034