红芪多糖对db/db小鼠糖尿病心肌病心肌保护作用及PPARγ/NF-κB信号通路的影响

发布时间：2021-02-11 16:57

　　目的本研究以自发性肥胖型2型糖尿病db/db小鼠为研究对象,观察红芪多糖（HPS）对糖尿病心肌病（DCM）心肌的保护作用,借助PCR Array筛选模型动物心肌纤维化的相关基因,寻找控制氧化应激和炎症反应的重要基因和途径,验证模型动物DCM发病过程中心肌组织PPARγ/NF-κB信号通路及其下游相关基因的表达及HPS干预的影响,探讨HPS干预DCM心肌纤维化的作用机理,揭示具有补气化瘀功效的红芪之有效成分HPS治疗糖尿病及其慢性并发症“虚、瘀、毒”病机理论的科学内涵,为HPS防治DCM提供科学依据。方法:本研究分为以下三部分内容（1）第一部分:6周龄雄性2型糖尿病db/db小鼠60只,随机分为HPS高、中、低剂量组、罗格列酮组和模型组5组;同周龄同品系非糖尿病db/m小鼠12只作为正常组。灌胃给药8周后,心脏取血,颈椎脱臼处死后取出心脏。全自动生化分析仪检测血清LDH、CK-MB、TC、TG的含量;ELISA法测定心肌中羟脯氨酸（Hyp）含量;HE、Masson染色观察小鼠心肌组织病理学改变及纤维化程度,透射电镜观察小鼠心肌组织超微结构;q PCR和Western blot法检测心肌C... 

【文章来源】：甘肃中医药大学甘肃省

【文章页数】：158 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
缩略语表
前言
    参考文献
第一章 红芪多糖对2型糖尿病db/db小鼠心肌纤维化的防治作用
    引言
    材料与方法
        1. 实验材料
            1.1 实验动物
            1.2 实验药物
            1.3 实验主要试剂
            1.4 主要实验仪器与耗材
        2. 实验方法
            2.1 分组与给药方法
            2.2 处死与取材
            2.3 实验观察项目及操作步骤
            2.4 统计方法
    结果
        1. HPS对DCM一般状态的影响
        2. HPS对DCM小鼠体重的影响
        3. HPS对DCM小鼠血糖的影响
        4. HPS对DCM小鼠血清甘油三脂（TG）和总胆固醇（TC）的影响
        5. HPS对DCM小鼠血清乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸激酶-MB（CK-MB）的影响
        6. HPS对DCM小鼠心肌羟脯氨酸（Hyp）含量的影响
        7. HPS对DCM小鼠心肌病理结果的影响
            7.1 HE染色观察各组心肌形态学的改变
            7.2 Masson染色观察心肌胶原纤维沉积情况
            7.3 电子透射显微镜观察各组小鼠心肌超微结构的改变
        8. HPS对DCM小鼠心肌组织中Collagen I、Collagen III mRNA的表达的影响
        9. HPS对DCM小鼠心肌组织中Collagen I、Collagen III蛋白的表达的影响
        10. 相关分析
    讨论
    小结
    参考文献
第二章 应用PCR芯片筛选糖尿病心肌病db/db小鼠心肌纤维化相关基因
    引言
    材料与方法
        1.实验材料
            1.1 实验动物
            1.2 实验材料与主要试剂
            1.3 主要实验仪器与耗材
        2.实验方法
            2.1 处死与取材
            2.2 PCR Array芯片筛选糖尿病db/db小鼠与非糖尿病db/m小鼠心肌组织之间差异表达的基因
    结果
        1.PCR-Array芯片检测糖尿病db/db小鼠心肌组织中差异表达的基因
        2.差异表达基因的分类
    讨论
        1. PCR芯片介绍
        2. PCR芯片分类
        3. PCR芯片的应用
        4. 对DCM心肌纤维化发生机制的探讨
    小结
    参考文献
第三章 PPARγ/NF-κB信号通路在2型糖尿病db/db小鼠心肌病变中的表达及红芪多糖的干预研究
    引言
    材料与方法
        1.实验材料
            1.1 实验动物
            1.2 实验药物
            1.3 实验主要试剂
            1.4 主要实验仪器与耗材
        2.实验方法
            2.1 分组与给药方法
            2.2 处死与取材
            2.3 实验观察项目及操作步骤
            2.4 统计方法
    结果
        1.HPS对DCM小鼠心肌组织SOD、GSH-PX、MDA的影响
        2.HPS对DCM小鼠心肌组织IL-6、TNF-α含量的影响
        3.HPS对DCM小鼠心肌组织中PPARγ、GLUT-4 m RNA表达的影响
        4.HPS对DCM小鼠心肌组织NF-κB、IKKβ mRNA的变化
        5.HPS对DCM小鼠心肌组织MMP-2、MMP-9 mRNA的表达的影响
        6.HPS对DCM小鼠心肌组织PPARγ、GLUT-4 蛋白表达的影响
        7.HPS对DCM小鼠心肌组织中NF-κB、IKKβ 蛋白表达水平的影响
        8.HPS对DCM小鼠心肌组织MMP-2、MMP-9 蛋白的表达
        9.相关分析
            9.1 心肌组织中Hyp含量与TNF-α、IL-6、SOD、GSHx、MDA相关分析结果
            9.2 心肌组织Masson染色胶原纤维阳性染色面积与PPARγ蛋白表达和NF-κB蛋白表达相关分析结果
            9.3 心肌组织PPARγ蛋白表达水平与心肌组织SOD、MDA、GSHx水平相关分析结果
            9.4 心肌组织中NF-κB蛋白表达与心肌组织IL-6、TNF-α的含量相关分析结果
    讨论
    小结
    参考文献
结语与展望
    1.结语
    2.展望
附录
    附录1 实验动物质量合格证
    附录2 实验动物设施使用证明
    附录3 各组小鼠心肌组织HE染色结果
    附录4 各组小鼠心肌组织Masson染色结果
    附录5 各组小鼠心肌组织电镜结果
综述 糖尿病心肌病的中西医研究进展
    1 现代医学对糖尿病心肌病的认识
        1.1 糖尿病心肌病的发病机制
        1.2 糖尿病心肌病的治疗进展和现状
    2 中医学对糖尿病心肌病的认识
        2.1 病因病机
        2.2 辨证分型及基本治法
        2.3 中医药防治糖尿病心肌病的研究现状
    参考文献
致谢
在学期间取得的主要研究成果


【参考文献】：
期刊论文
[1]运动对PPARs及糖尿病心肌病糖代谢和脂肪代谢紊乱的影响[J]. 蔡欢,何玉秀.  中国运动医学杂志. 2016(11)
[2]糖尿病肾病中医辨证分型及与客观指标关系研究进展[J]. 张烨,何立群,彭文.  山东中医杂志. 2016(11)
[3]硫化氢抑制p38MAPK和NF-κBp65信号通路活性改善糖尿病心肌纤维化的作用和机制[J]. 宋冰,丁利.  解放军医学杂志. 2016(11)
[4]肥胖型2型糖尿病的内科治疗进展[J]. 李星,袁振芳.  中华肥胖与代谢病电子杂志. 2016(03)
[5]黄芪多糖对糖尿病心肌病大鼠的治疗作用及机制探讨[J]. 陈红霞,曹霞,卢红,汪蕾.  山东医药. 2016(30)
[6]红芪多糖对D-半乳糖致衰老小鼠抗免疫衰老作用的研究[J]. 柳春玲,寇宁,张高林,李磊强,庞大勇,程卫东.  中医研究. 2016(06)
[7]高脂血症大鼠肝脏脂蛋白和胆固醇代谢信号通路相关基因表达的变化[J]. 王英,王志丹,宋囡,曹媛,曹慧敏,刘晶晶,杨关林,贾连群.  辽宁医学院学报. 2016(02)
[8]红芪多糖对脑微血管内皮细胞氧化损伤保护作用的差异蛋白质研究[J]. 杨杰,卫东锋,李晓东,张占军,吕晓云.  中药药理与临床. 2016(02)
[9]红芪多糖对早期糖尿病肾病db/db小鼠肾脏保护作用及PKC/TIMP-1表达的影响[J]. 祁雪艳,金智生,陈长浩,关雁,王倩,余海艳,张梅菊.  中国老年学杂志. 2015(18)
[10]白藜芦醇对链脲佐菌素诱导2型糖尿病大鼠早期氧化应激和炎症反应的影响[J]. 王玉琴,张伟.  南通大学学报(医学版). 2015(05)

博士论文
[1]灯盏花素对糖尿病心肌病大鼠心脏结构和功能的影响及其机制的探讨[D]. 王敏.浙江大学 2010
[2]2型糖尿病大鼠心肌纤维化的炎症机制及阿托伐他汀、罗格列酮及二者联合对心肌的保护作用[D]. 杨晓红.河北医科大学 2008

硕士论文
[1]红芪多糖对糖尿病肾病db/db小鼠肾组织GluT-1、FN和Col-IV表达的影响[D]. 朱真灵.甘肃中医学院 2014



本文编号：3029425