鱼藤素及7位羟基取代的鱼藤素衍生物抗肿瘤活性的体内外研究

发布时间：2021-02-19 09:21

　　研究目的:鱼藤素为鱼藤酮的类衍生物,来自豆科非洲软木。鱼藤素通过作用于不同的途径而具有广谱抗肿瘤活性,例如肺癌、乳腺癌、结肠癌、淋巴癌等。但有研究表明,鱼藤素对心脏、肺及神经系统产生损害,此为鱼藤素不能作为抗肿瘤药物的主要原因。为改善鱼藤素的毒副作用,在鱼藤素的结构基础上合成出了含游离羟基的鱼藤素衍生物,从而来探究鱼藤素及鱼藤素衍生物的体内、外抗肿瘤活性。研究内容:1.合成出鱼藤素及7位羟基取代的鱼藤素衍生物,并探究两种药物对H1299肺癌细胞及MCF-7乳腺癌细胞的抗增殖活性及诱导凋亡作用的体外研究。2.分子水平上,利用荧光定量PCR和Western Blotting检测鱼藤素和7位羟基取代的鱼藤素衍生物处理H1299、MCF-7细胞前后,相关诱导肿瘤细胞凋亡因子的表达量影响。3.体内实验:建立H1299肺癌移植模型,鱼藤素及含游离羟基的鱼藤素衍生物进行药物干预实验,探究药物的体内抗肿瘤活性。研究结果:1.合成出鱼藤素及7位羟基取代的鱼藤素衍生物,并对其结构进行表征。2.CCK-8实验结果得知,鱼藤素及7位羟基取代的鱼藤素衍生物可抑制H1299细胞及MCF-7细胞的增殖作用,并呈时间... 

【文章来源】：南方医科大学广东省

【文章页数】：97 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
第一章 绪论
    1.1 肺癌及乳腺癌现状
        1.1.1 肺癌现状
        1.1.2 乳腺癌现状
    1.2 鱼藤素研究现状
        1.2.1 鱼藤素简介
        1.2.2 鱼藤素体外抗肿瘤活性研究
        1.2.3 鱼藤素体内抗肿瘤活性研究
        1.2.4 鱼藤素毒性研究
    1.3 鱼藤素结构改造
    1.4 本课题研究意义与主要研究内容
第二章 鱼藤素对H1299、MCF-7细胞的抑制增殖和诱导凋亡的活性研究
    2.1 前言
    2.2 材料和仪器
        2.2.1 细胞株
        2.2.2 主要试剂
        2.2.3 主要仪器
    2.3 实验方法
        2.3.1 鱼藤素的合成
        2.3.2 细胞的复苏与培养
        2.3.3 CCK-8实验
        2.3.4 显微镜观测细胞形态
        2.3.5 AO-EB实验
        2.3.6 AnnexinV-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡率
        2.3.7 统计学分析
    2.4 结果
        2.4.1 鱼藤素合成实验
        2.4.2 CCK-8实验
        2.4.3 显微镜下观察鱼藤素对H1299、MCF-7生长状态的影响
        2.4.4 AO-EB实验
        2.4.5 Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡率
    2.5 讨论
第三章 7位羟基取代的鱼藤素衍生物对H1299、MCF-7细胞的抑制增殖和诱导凋亡的活性研究
    3.1 前言
    3.2 材料和仪器
        3.2.1 主要试剂
        3.2.2 主要仪器
    3.3 实验方法
        3.3.1 7位羟基取代的鱼藤素衍生物的合成
        3.3.2 CCK8实验
        3.3.3 显微镜观测细胞形态
        3.3.4 AO-EB实验
        3.3.5 Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡率
        3.3.6 统计学分析
    3.4 结果
        3.4.1 鱼藤素合成实验
        3.4.2 CCK-8实验
        3.4.3 显微镜下观察衍生物对H1299、MCF-7生长状态的影响
        3.4.4 AO-EB实验
        3.4.5 Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡率
    3.5 讨论
第四章 鱼藤素及7位羟基取代的鱼藤素衍生物对H1299、MCF-7细胞凋亡的机制研究
    4.1 前言
    4.2 材料和仪器
        4.2.1 主要试剂
        4.2.2 主要仪器
    4.3 实验方法
        4.3.1 qPCR实验
        4.3.2 Western blotting实验
        4.3.3 统计学分析
    4.4 结果
        4.4.1 qPCR实验
        4.4.2 Western Blot实验
    4.5 讨论
第五章 鱼藤素及7位羟基取代的鱼藤素衍生物对肺癌小鼠模型的抑瘤作用
    5.1 前言
    5.2 材料和仪器
        5.2.1 实验动物
        5.2.2 主要试剂
        5.2.3 主要仪器
    5.3 实验方法
        5.3.1 BALB/c裸鼠H1299肺癌移植模型的建立
        5.3.2 H1299肺癌裸鼠的分组及处理方法
        5.3.3 肿瘤病理学探究
        5.3.4 统计学分析
    5.4 结果
        5.4.1 各组药物对裸鼠的影响
        5.4.2 各组移植瘤体积生长及重量的比较
        5.4.3 各组肿瘤体积抑制率的比较
        5.4.4 各组药物对肿瘤病理学的影响
    5.5 讨论
全文小结与展望
参考文献
攻读学位期间成果
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]鱼藤素对SH-SY5Y神经母细胞瘤细胞凋亡的诱导作用[J]. 吴碧娟,姜志辉,孙婧雯,谭翠雯,范俣琳,丁晓艳,上官信一,吴新荣.  中国药理学通报. 2017(08)
[2]乳腺癌相关基因p16、PTEN、ATM的研究进展[J]. 殷发祥,许培权.  蚌埠医学院学报. 2016(02)
[3]促凋亡基因PUMA与肿瘤[J]. 彭松林,戴朝六.  世界华人消化杂志. 2013(21)
[4]ATM基因与恶性肿瘤发生关系的研究进展[J]. 乔劲鹏,彭开桂,李多杰.  中华全科医学. 2012(01)
[5]Bcl-2和Bax调节细胞凋亡的研究[J]. 车晓芳,罗颖.  国外医学.输血及血液学分册. 2001(02)

硕士论文
[1]鱼藤素联用L-肌肽的增效减毒作用研究[D]. 吴碧娟.南方医科大学 2017
[2]鱼藤素对斑马鱼胚胎CyclinD1的表达调控及相关抗肿瘤机制研究[D]. 海洋.华南理工大学 2015
[3]PUMA在胃癌中的表达和作用机制研究[D]. 金伟.浙江大学 2014



本文编号：3040918