阿胶肽-铁螯合物的制备及其初步药效学研究

发布时间：2021-02-28 16:04

　　目的:以阿胶为原料,经蛋白酶酶解和氯化亚铁（FeCl₂·4H₂O）处理,制备具有补血活性的阿胶肽-铁螯合物,并对阿胶肽-铁螯合物进行初步药效学研究及初步稳定性考察。方法:以水解度、分子量分布为指标,优选阿胶肽的酶解工艺;采用放血法致小鼠血虚模型及环磷酰胺致小鼠白细胞减少模型,考察阿胶及阿胶肽的补血升白作用;以螯合率、分子量为指标,考察阿胶肽-铁螯合物的螯合工艺;采用缺铁性贫血小鼠模型,考察阿胶肽-铁螯合物的补血效果;采用影响因素、加速法进行阿胶肽-铁螯合物的初步稳定性试验研究。结果:阿胶肽-铁螯合液的制备工艺:取阿胶烊化液,调节pH=7,加入5%菠萝蛋白酶,在50℃、转速45⁵0 r/min、酶解2 h,调节pH=7.5,加入2%胰蛋白酶,在40℃、转速45⁵0 r/min、酶解3 h,煮沸15 min,冷却至室温,低温冷藏（0⁴℃）6 h,4500 r/min离心10 min,取上清液,加入0.1%的抗坏血酸,调节pH=5,按每1 g阿胶加入10 mgFe²⁺

【文章来源】：山东中医药大学山东省

【文章页数】：82 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
提要
Abstract
引言
课题思路图
第一章 绪论
    1 阿胶的研究进展
        1.1 阿胶的化学成分
        1.2 阿胶的药理作用
    2 生物活性肽-铁螯合物的研究进展
        2.1 生物活性肽
        2.2 微量元素-铁
        2.3 肽-铁螯合物
    3 缺铁性贫血的研究进展
        3.1 中医学对缺铁性贫血的认识
        3.2 缺铁性贫血的病因病机
        3.3 补铁剂的应用现状
第二章 阿胶酶解工艺研究
    1 仪器与材料
        1.1 实验仪器
        1.2 材料与试剂
    2 阿胶酶解液质量考察
        2.1 含水量测定
        2.2 得膏率的测定
        2.3 原子吸收光度法测定阿胶中的微量元素
        2.4 水解度的测定
        2.5 总肽含量测定
    3 酶种类的筛选
        3.1 酶种类筛选方法
        3.2 酶种类筛选结果
    4 阿胶酶解液制备工艺思路
    5 阿胶酶解工艺单因素考察
        5.1 加酶量对酶解工艺的影响实验
        5.2 温度对酶解工艺的影响实验
        5.3 时间对酶解工艺的影响实验
        5.4 pH对酶解工艺的影响实验
    6 阿胶酶解质量考察结果
        6.1 水分测定结果
        6.2 得膏率测定结果
        6.3 微量元素测定结果
        6.4 总肽含量测定结果
    7 本章小结
第三章 阿胶酶解液相对分子质量分布及补血升白的作用对比研究
    1 仪器与材料
        1.1 仪器与试剂
        1.2 动物
    2 实验方法及标准曲线的建立
        2.1 色谱条件
        2.2 标记物溶液的制备
        2.3 标准曲线的测定
    3 供试品的制备及分子量测定
        3.1 供试品的制备
        3.2 阿胶各酶解液分子量的测定
    4 阿胶酶解液补血升白药理活性研究
        4.1 受试样品的制备
        4.2 对尾部放血所致小鼠血虚模型的影响
        4.3 对环磷酰胺所致小鼠所致白细胞减少模型的影响
    5 本章小结
第四章 阿胶肽-铁螯合物的工艺研究及中试生产
    1 仪器与材料
        1.1 实验仪器
        1.2 材料与试剂
    2 阿胶肽-铁螯合物的质量检查
        2.1 螯合率的测定
        2.2 阿胶肽-铁螯合物的定性检测—硫化钠法
        2.3 阿胶肽-铁总肽量测定
        2.4 阿胶肽-铁螯合液的总氮量测定
        2.5 分子量分布测定
    3 阿胶肽-铁螯合物的制备工艺思路
    4 阿胶肽-铁螯合物螯合工艺优化
        4.1 铁源的选择
        4.2 醇沉浓度对阿胶肽-铁螯合率的影响实验
2+的加入量对阿胶肽-铁螯合率的影响实验">        4.3 Fe²⁺的加入量对阿胶肽-铁螯合率的影响实验
        4.4 pH 对阿胶肽-铁螯合率的影响实验
        4.5 温度对阿胶肽-铁螯合率的影响实验
        4.6 时间对阿胶肽-铁螯合率的影响实验
        4.7 阿胶肽-铁螯合液的正交试验工艺
    5 阿胶肽-铁螯合物中试验证试验
        5.1 主要仪器与设备
        5.2 阿胶肽-铁螯合物的制备工艺
        5.3 验证实验结果
    6 阿胶肽-铁螯合物质量考察结果
        6.1 螯合率测定结果
        6.2 螯合液定性测定结果
        6.3 螯合液的含肽量测定结果
        6.4 螯合液含氮量测定结果
        6.5 阿胶肽-铁螯合液相对分子量分布测定结果
    7 本章小结
第五章 阿胶肽-铁螯合物对缺铁性贫血小鼠的初步药效学研究
    1 仪器与材料
        1.1 实验仪器
        1.2 实验材料
        1.3 实验动物
    2 供试品的制备
        2.1 阿胶原液的制备
        2.2 阿胶酶解液的制备
        2.3 阿胶肽-铁螯合液的制备
    3 受试样品的制备
        3.1 阳性对照药剂量设计
        3.2 受试药物计量设计
    4 对缺铁性贫血小鼠模型的影响
        4.1 实验方法
        4.2 实验结果
    5 本章小结
第六章 阿胶肽-铁螯合物的初步稳定性考察
    1 稳定性考察
        1.1 试验内容
        1.2 试验方法
    2 稳定性考察结果
结语
参考文献
致谢
论文著作


【参考文献】：
期刊论文
[1]中国孕妇贫血状况及影响因素[J]. 姜珊,杨振宇,荫士安.  卫生研究. 2017(05)
[2]缺铁性贫血的概况及治疗[J]. 潘焕玉.  中国卫生产业. 2017(05)
[3]14例儿童巨幼细胞性贫血的病因分析[J]. 梁筱灵,张景荣,王彩丽.  微量元素与健康研究. 2017(03)
[4]阿胶仿生酶解前后提高免疫力作用对比研究[J]. 刘元涛,张惠惠,王升光,王垒,尹雷,柏道鸣,代龙,高鹏.  时珍国医国药. 2016(09)
[5]缺铁性贫血与补铁剂研究概况[J]. 赵聪,黄浩,陈贵堂.  食品安全质量检测学报. 2016(08)
[6]探讨中药阿胶的临床应用和药理[J]. 樊庆利.  中医临床研究. 2016(11)
[7]阿胶的研究进展[J]. 吴海燕,孙佳明,张辉.  吉林中医药. 2016(01)
[8]阿胶的成分、鉴别方法及药理作用研究进展[J]. 郭中坤,王可洲,籍国霞,嵇传良.  辽宁中医药大学学报. 2015(04)
[9]阿胶化学成分与真伪鉴别研究进展[J]. 张斌,胡晶红,张永清.  山东中医药大学学报. 2014(03)
[10]阿胶补血机理的现代研究概况[J]. 汝文文,和娴娴,张建岭,范国华,王东亮.  中国药物评价. 2013(06)

博士论文
[1]阿胶低肽及其制剂的研究[D]. 付英杰.山东中医药大学 2010
[2]海参胶原蛋白生化性质及胶原肽活性研究[D]. 崔凤霞.中国海洋大学 2007

硕士论文
[1]补血资生颗粒联合铁剂治疗小儿缺铁性贫血的临床观察[D]. 黄玉坤.黑龙江中医药大学 2017
[2]益气补血法治疗缺铁性贫血气血两虚型的临床观察[D]. 阳辉.黑龙江中医药大学 2016
[3]猪血红蛋白铁螯合肽的制备及性质研究[D]. 赵静.吉林大学 2016
[4]棉籽蛋白及其功能性多肽的制备与特性研究[D]. 宁程茜.武汉轻工大学 2016
[5]可口革囊星虫多肽对小鼠学习记忆能力的影响[D]. 项欢.宁波大学 2014
[6]酶促水解大豆分离蛋白制备铁螯合肽的研究[D]. 张墨楠.中国计量学院 2013
[7]猪皮促创面愈合活性肽的制备分离及鉴定研究[D]. 刘长龙.山东中医药大学 2013
[8]非铁剂健脾益气补血法治疗缺铁性贫血的临床研究[D]. 栾大丽.广州中医药大学 2011
[9]胶芪养血颗粒对动物血虚证模型的主要药效学研究[D]. 廖世初.北京中医药大学 2010
[10]带鱼下脚料蛋白水解螯合物制备及生物特性研究[D]. 钟明杰.中国海洋大学 2009



本文编号：3056096