苦杏仁苷通过JAK2/STAT3通路促进T细胞活性抑制HBV相关性肝癌进展的机制研究

发布时间：2021-04-07 07:28

　　目的:通过研究T淋巴细胞的肿瘤抑制作用,阐明中药方剂鳖龙软肝汤的主要成分苦杏仁苷在HBV相关性HCC以及HCC进展期间细胞免疫应答中的作用机制。方法:分别提取HBV相关HCC患者及健康对照者外周血中的T淋巴细胞,确定苦杏仁苷的最佳使用浓度;MTT检测健康人群外周血T细胞（NC-T）、HBV相关HCC患者外周血的T细胞（HBV-T）、苦杏仁苷处理的HBV-T细胞活性;ELISA检测各组细胞培养基中IFN-γ、TNF-α、IL-2、IL-10的含量;流式细胞术检测各组细胞中CD4⁺和CD8⁺T细胞亚群占CD3⁺T细胞的比值,以及CD4⁺和CD8⁺T细胞亚群内STAT3的磷酸化水平;QPCR和western blot检测各组细胞中STAT3、p-STAT3、JAK2、p-JAK2的表达;构建NC-T、HBV-T、苦杏仁苷干预的HBV-T细胞与HBV相关性肝癌HepG2.2.15直接共培养模型,ELISA检测培养基中IFN-γ、TNF-α、IL-2、IL-10的含量;构建NC-T、HB... 

【文章来源】：湖南中医药大学湖南省

【文章页数】：84 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

技术路线图

于 37℃、5% CO2 培养箱培养。隔天换液，培养 3 天。在 400×的倍镜下观察，细胞呈圆形。图2-1 培养第3天正常人T淋巴细胞（×400倍）2.4.2 苦杏仁苷处理 T 细胞的最佳浓度选取

图2-2.苦杏仁苷处理培养的T细胞的最佳浓度筛选。对不同来源 T 细胞的细胞活力影响杏仁苷是否对T细胞有活力和免疫功能的增强。我并使用10 mg/ml的苦杏仁苷处理HBV-T细胞0-72点检测细胞OD值。结果如图2-3和表2-5所示，处C患者外周血的T淋巴细胞OD值为1.11±0.09，低于在苦杏仁苷处理下，HBV-T细胞的OD值部分恢著差异；48 h时，HBV-T细胞活力（OD = 1.29 ± = 1.69 ± 0.05），而HBV-T细胞在苦杏仁苷处理下.04)，与NC-T组无显著差异；72 h时，HBV-T细胞低于NC-T细胞（OD = 1.86 ± 0.03），而HBV-T细

【参考文献】：
期刊论文
[1]HBV相关肝细胞癌防治进展[J]. 董菁,江家骥.  临床肝胆病杂志. 2018(07)
[2]原发性肝癌中医临床用药荟萃分析[J]. 孙沅.  世界最新医学信息文摘. 2018(54)
[3]鳖龙软肝汤联合经肝动脉化疗栓塞术治疗HBV相关原发性肝癌临床观察[J]. 伍玉南,张冬,孙克伟.  临床肝胆病杂志. 2017(11)
[4]原发性肝癌中医证候研究概述[J]. 占义平,凌昌全.  中医杂志. 2017(02)
[5]HepG2.2.15用于中药复方治疗乙型肝炎研究的相关问题探讨[J]. 陈少芳,万石川,王章林.  中国中西医结合杂志. 2016(10)
[6]从肝生理功能探讨中医治疗肝癌基本原则[J]. 淳莉,姚德蛟.  亚太传统医药. 2016(18)
[7]HBV相关肝癌TACE术后HBV DNA及肝功能变化的研究进展[J]. 王骏成,劳向明.  新医学. 2016(05)
[8]Hepatocellular carcinoma and hepatitis B surface protein[J]. Yong-Wei Li,Feng-Cai Yang,Hui-Qiong Lu,Jiong-Shan Zhang.  World Journal of Gastroenterology. 2016(06)
[9]中医药治疗原发性肝癌的研究进展[J]. 宋慧娴,乔飞,邵铭.  临床肝胆病杂志. 2016(01)
[10]中医研究肝癌概况[J]. 王磊,周荣耀,高月求.  中西医结合肝病杂志. 2014(03)



本文编号：3123061