淫羊藿苷、槲皮素对高糖培养SD大鼠海马神经元凋亡的影响及其机制研究
发布时间：2021-04-19 07:14
[目的]探讨淫羊藿苷、槲皮素对高糖培养海马神经元凋亡的影响及其作用机制。[方法]取新生24hSD大鼠海马,消化法分离海马神经元,密度梯度离心法和差速贴壁法进行纯化,神经元特异性烯醇化酶蛋白免疫荧光法进行鉴定。选择25mmol/L浓度葡萄糖为正常对照组,根据课题组既往实验结果,选取72h和50mmol/L浓度葡萄糖为高糖模型组。在50mmol/L Glu的高糖培养基中,分别加入不同浓度梯度的淫羊藿苷、槲皮素、Akt抑制剂MK-2206 2HCI和激动剂SC79。培养72h,CCK-8探索各药物最佳作用浓度及其对高糖条件下海马神经元相对活性的影响。流式细胞仪检测正常对照组、高糖模型组、淫羊藿苷组、槲皮素组、淫羊藿苷+Akt抑制剂组、槲皮素+Akt抑制剂组、Akt激动剂组神经元的凋亡。Western Blotting检测各组神经元p-Akt、Akt、Bcl-2和Bax蛋白表达。[结果]1.成功培养海马神经元,经鉴定纯度96.5±1.2%。2.CCK-8探索各药物最佳作用浓度及其对高糖条件下海马神经元相对活性的影响:与正常对照组相比,高糖组细胞相对活性降低（P<0.05）;与高糖组比较,...
【文章来源】：北京协和医学院北京市 211工程院校 985工程院校
【文章页数】：68 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１．?ＤＡＰＩ染色??注：２４ｈ新生ＳＤ大鼠海马神经元在２５ｍｍｏｌ／ＬＧｌｕ浓度的Ｎｅｕｒｏｂａｓａｌ＋Ｂ２７完全培养基中体外培??养７２ｈ后，所有细胞的胞核均被ＤＡＰＩ染成蓝色（Ｘ?２００）
图２．?ＮＳＥ染色??注：２４ｈ新生ＳＤ大鼠海马神经元在２５ｍｍｏｌ／ＬＧｌｕ浓度的Ｎｅｕｒｏｂａｓａｌ＋Ｂ２７完全培养基中体外培??养７２ｈ后，神经元胞浆和突起被染成绿色（Ｘ２００）。??二、Ｃｅｌｌ?Ｃｏｕｎｔｉｎｇ?Ｋｉｔ－８（ＣＣＫ－８＞探索不同浓度淫羊藿苷对海马神经元相对活性的影??响??１．ＣＣＫ－８探索不同浓度淫羊藿苷对海马神经元相对活性的影响，各组神经元相对活??性见表１及图３。??２．与正常对照组相比，高糖组细胞相对活性降低（ＰＣ０．０１）；与高糖组比较，淫羊??蕾苷０．００１叫ｉｏｌ／Ｌ组细胞相对活性提高（ＰＣ０．０５）。??
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【参考文献】：
期刊论文
[1]Puerarin reduces apoptosis in rat hippocampal neurons cultured in high glucose medium by modulating the p38 mitogen activated protein kinase and c-Jun N-terminal kinase signaling pathways[J]. Xu Xiaohan,Wang Jingbo,Zhang Hong,Tian Guoqing,Liu Yuqin. Journal of Traditional Chinese Medicine. 2016(01)
[2]蛇床子素通过抑制PI3K/Akt信号通路减轻糖尿病脑病的炎症反应[J]. 毛小元,周宏灏,刘昭前. 中国老年学杂志. 2015(17)
[3]The PI3K/AKT Pathway and Renal Cell Carcinoma[J]. Huifang Guo,Peter German,Shanshan Bai,Sean Barnes,Wei Guo,Xiangjie Qi,Hongxiang Lou,Jiyong Liang,Eric Jonasch,Gordon B.Mills,Zhiyong Ding. Journal of Genetics and Genomics. 2015(07)
[4]槲皮素抑制乳腺癌细胞迁移侵袭及分子机制研究[J]. 孙怡,顾君. 中国中药杂志. 2015(06)
[5]神经生长因子治疗周围神经损伤的疗效观察[J]. 李明明,李林林,季晓燕. 中国实用神经疾病杂志. 2015(04)
[6]Type 2 diabetes mellitus and Alzheimer’s disease[J]. Mario Barbagallo,Ligia J Dominguez. World Journal of Diabetes. 2014(06)
[7]神经生长因子对H9c2心肌细胞缺氧/复氧后凋亡的保护作用及其机制[J]. 谢飞,魏珂,闵苏,郝学超,朱贤林. 中国药理学通报. 2014(04)
[8]葛根素对大鼠脑缺血再灌注侧皮质区细胞凋亡及p-Akt（Ser473）表达的影响[J]. 韩江全,于奎营,何敏,李向荣,胡泳涛,林冬融,卢俊江. 中国老年学杂志. 2013(22)
[9]槲皮素及其代谢物抑制氧化应激与炎症[J]. 王敏,刘保林,国旭丹. 食品科学. 2013(15)
[10]银杏叶提取物对阿尔茨海默病大鼠认知功能的影响及其作用机制[J]. 王暖,耿德勤,黄红莉,周昊,杨秀华,邵丽. 神经损伤与功能重建. 2012(04)
博士论文
[1]ERK信号通路在高糖诱导的髓鞘化损伤中的作用及槲皮素、桂皮醛、水蛭素和单体组合对其影响的研究[D]. 刘頔.北京协和医学院 2016
[2]槲皮素通过TLR4/NF-κB信号调节哮喘气道炎症机制研究[D]. 李鸿佳.山东大学 2015
[3]槲皮素及其糖苷衍生物芦丁对心肌纤维化的抑制作用及机制研究[D]. 李敏.吉林大学 2014
硕士论文
[1]红景天苷、葛根素对高糖培养SD大鼠海马神经元凋亡的影响及其机制研究[D]. 徐小涵.北京协和医学院 2014
[2]淫羊藿苷对前列腺癌LNCaP细胞的作用及其AR相关分子机制[D]. 张津.北京中医药大学 2013
[3]筋脉通对高糖培养SD大鼠海马神经元凋亡的影响[D]. 郭蕾蕾.北京协和医学院 2012
本文编号：3147092
【文章来源】：北京协和医学院北京市 211工程院校 985工程院校
【文章页数】：68 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１．?ＤＡＰＩ染色??注：２４ｈ新生ＳＤ大鼠海马神经元在２５ｍｍｏｌ／ＬＧｌｕ浓度的Ｎｅｕｒｏｂａｓａｌ＋Ｂ２７完全培养基中体外培??养７２ｈ后，所有细胞的胞核均被ＤＡＰＩ染成蓝色（Ｘ?２００）
图２．?ＮＳＥ染色??注：２４ｈ新生ＳＤ大鼠海马神经元在２５ｍｍｏｌ／ＬＧｌｕ浓度的Ｎｅｕｒｏｂａｓａｌ＋Ｂ２７完全培养基中体外培??养７２ｈ后，神经元胞浆和突起被染成绿色（Ｘ２００）。??二、Ｃｅｌｌ?Ｃｏｕｎｔｉｎｇ?Ｋｉｔ－８（ＣＣＫ－８＞探索不同浓度淫羊藿苷对海马神经元相对活性的影??响??１．ＣＣＫ－８探索不同浓度淫羊藿苷对海马神经元相对活性的影响，各组神经元相对活??性见表１及图３。??２．与正常对照组相比，高糖组细胞相对活性降低（ＰＣ０．０１）；与高糖组比较，淫羊??蕾苷０．００１叫ｉｏｌ／Ｌ组细胞相对活性提高（ＰＣ０．０５）。??
?北京协和医学院中国医学科学院?硕士研究生学位论文???表１各组神经元细胞相对活性（＾±ｓ，ｎ＝３）??组别?细胞相对活性??正常对照组?１００?＋?０．００％??高糖组?８１．１９±１０．５６％＊＊??淫羊藿苷?〇．〇ｌＭｍ〇ｌ／Ｌ?组?８６．６８±．５５％??淫羊藿苷?０．００１?坪ｎ〇ｌ／Ｌ?组?９２．０１±８．８１％＊??淫羊藿苷?０．０００１?叫ｉ〇ｌ／Ｌ?组?８６．６１±８．１８％???注：与正常对照组比较，＊＊：?Ｐ＜０．０１；与高糖组比较，★：?Ｐ＜０．０５。??
【参考文献】：
期刊论文
[1]Puerarin reduces apoptosis in rat hippocampal neurons cultured in high glucose medium by modulating the p38 mitogen activated protein kinase and c-Jun N-terminal kinase signaling pathways[J]. Xu Xiaohan,Wang Jingbo,Zhang Hong,Tian Guoqing,Liu Yuqin. Journal of Traditional Chinese Medicine. 2016(01)
[2]蛇床子素通过抑制PI3K/Akt信号通路减轻糖尿病脑病的炎症反应[J]. 毛小元,周宏灏,刘昭前. 中国老年学杂志. 2015(17)
[3]The PI3K/AKT Pathway and Renal Cell Carcinoma[J]. Huifang Guo,Peter German,Shanshan Bai,Sean Barnes,Wei Guo,Xiangjie Qi,Hongxiang Lou,Jiyong Liang,Eric Jonasch,Gordon B.Mills,Zhiyong Ding. Journal of Genetics and Genomics. 2015(07)
[4]槲皮素抑制乳腺癌细胞迁移侵袭及分子机制研究[J]. 孙怡,顾君. 中国中药杂志. 2015(06)
[5]神经生长因子治疗周围神经损伤的疗效观察[J]. 李明明,李林林,季晓燕. 中国实用神经疾病杂志. 2015(04)
[6]Type 2 diabetes mellitus and Alzheimer’s disease[J]. Mario Barbagallo,Ligia J Dominguez. World Journal of Diabetes. 2014(06)
[7]神经生长因子对H9c2心肌细胞缺氧/复氧后凋亡的保护作用及其机制[J]. 谢飞,魏珂,闵苏,郝学超,朱贤林. 中国药理学通报. 2014(04)
[8]葛根素对大鼠脑缺血再灌注侧皮质区细胞凋亡及p-Akt（Ser473）表达的影响[J]. 韩江全,于奎营,何敏,李向荣,胡泳涛,林冬融,卢俊江. 中国老年学杂志. 2013(22)
[9]槲皮素及其代谢物抑制氧化应激与炎症[J]. 王敏,刘保林,国旭丹. 食品科学. 2013(15)
[10]银杏叶提取物对阿尔茨海默病大鼠认知功能的影响及其作用机制[J]. 王暖,耿德勤,黄红莉,周昊,杨秀华,邵丽. 神经损伤与功能重建. 2012(04)
博士论文
[1]ERK信号通路在高糖诱导的髓鞘化损伤中的作用及槲皮素、桂皮醛、水蛭素和单体组合对其影响的研究[D]. 刘頔.北京协和医学院 2016
[2]槲皮素通过TLR4/NF-κB信号调节哮喘气道炎症机制研究[D]. 李鸿佳.山东大学 2015
[3]槲皮素及其糖苷衍生物芦丁对心肌纤维化的抑制作用及机制研究[D]. 李敏.吉林大学 2014
硕士论文
[1]红景天苷、葛根素对高糖培养SD大鼠海马神经元凋亡的影响及其机制研究[D]. 徐小涵.北京协和医学院 2014
[2]淫羊藿苷对前列腺癌LNCaP细胞的作用及其AR相关分子机制[D]. 张津.北京中医药大学 2013
[3]筋脉通对高糖培养SD大鼠海马神经元凋亡的影响[D]. 郭蕾蕾.北京协和医学院 2012
本文编号：3147092
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