基于AMPK/mTOR信号通路研究异常山碱对EC9706细胞能量代谢的调控机制

发布时间：2021-04-27 08:40

　　目的通过观察异常山碱对食管癌EC9706细胞的增殖、凋亡、周期、能量代谢及能量代谢通路相关蛋白表达的影响,探讨其治疗食管癌的分子机制。方法常规培养ECC9706细胞,用MTT法检测细胞活性,筛选药物浓度,选择1、2μg/mL 2个质量浓度;流式细胞术检测异常山碱对EC9706细胞凋亡、周期的影响,能量代谢检测系统检测异常山碱对EC9706细胞能量代谢的影响,Westernblotting检测细胞中哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）、磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（p-mTOR）、磷酸化乙酰辅酶A羧化酶（p-ACC）、腺苷磷酸激活蛋白激酶（AMPK）蛋白表达。结果不同质量浓度异常山碱作用48h后能有效抑制EC9706细胞增殖,呈剂量依赖性（P<0.01）,可以将EC9706细胞阻滞于S期和G₂/M期（P<0.05）,有效促进细胞凋亡（P<0.05）,且明显抑制细胞糖酵解及线粒体代谢能力（P<0.01）,与对照组比较,异常山碱组细胞AMPK蛋白表达水平上升,mTOR、p-mTOR、p-ACC蛋白表达水平降低（P<0.05）。结论异常山碱可能... 

【文章来源】：中草药. 2020,51(17)北大核心CSCD

【文章页数】：7 页

【文章目录】：
1 材料
    1.1 细胞
    1.2 药物
    1.3 试剂
    1.4 仪器
2 方法
    2.1 药物制备
    2.2 细胞培养
    2.3 异常山碱对EC9706细胞活性的影响
    2.4 流式细胞术检测细胞凋亡
    2.5 流式细胞术检测细胞周期
    2.6 能量代谢分析系统检测EC9706细胞能量代谢
    2.7 统计学分析
3 结果
    3.1 异常山碱对EC9706细胞活性的影响
    3.2 细胞形态学改变
    3.3 异常山碱对EC9706细胞凋亡的影响
    3.4 异常山碱对EC9706细胞周期的影响
    3.5 异常山碱对EC9706能量代谢的影响
        3.5.1 异常山碱对EC9706细胞糖酵解速率的影响
        3.5.2 异常山碱对EC9706细胞线粒体压力的影响
    3.6 异常山碱对EC9706细胞mTOR、p-mTOR、p-ACC、AMPK蛋白表达的影响
4 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]常山中常山碱和异常山碱的同步测定研究[J]. 张继远,刘梓晗,刘晓谦,冯伟红,杨立新,王智民,李春.  中国中药杂志. 2017(09)
[2]六君子汤提取物抑制食管癌Ec9706细胞增殖及其对信号转导和转录活化因子3信号通路的影响[J]. 崔姗姗,高小玲,王慧慧,吴耀松,尹素改,陈玉龙.  中国全科医学. 2016(24)
[3]Halofuginone for fibrosis, regeneration and cancer in the gastrointestinal tract[J]. Mark Pines.  World Journal of Gastroenterology. 2014(40)
[4]基于周仲瑛辨治经验的食管癌病机要素数据分析[J]. 何若瑜,周瑛,吴勉华,郭仁清,赵智强.  中医杂志. 2014(02)
[5]常山碱和异常山碱的合成研究进展[J]. 张越,杜会茹,王永国,牛玉环.  河北师范大学学报(自然科学版). 2008(04)

硕士论文
[1]常山碱类似物的合成研究[D]. 张金进.广东工业大学 2018



本文编号：3163151