锁阳多糖提取纯化、结构解析及生物活性研究

发布时间：2021-05-13 18:58

　　锁阳（Cynomorium songaricum Rupr.）俗称不老药,也称沙漠人参,是一种根寄生肉质草本植物,生长于沙漠地带。鲜锁阳既可食用,又可饲喂家畜,其干燥肉质茎用作传统中蒙药材。现代药理研究表明锁阳提取物具有多种生物活性,醇提物中主要含有黄酮、萜类等成分,而水提物中主要成分多糖的研究相对较少。多糖是植物次生代谢产物的重要组成部分,与生物体的生理功能密切相关,也是中医药发挥独特疗效的重要物质基础之一。本文采用物理、化学和光谱方法分析比较了五种提取方法,进而采用扫描电镜（SEM）、原子力显微镜（AFM）和单糖组成分析技术手段对新方法酶辅助提取锁阳多糖和传统水提醇沉锁阳多糖的形貌和单糖组成进行比较研究,同时采用体外清除自由基和总还原能力试验对两种锁阳多糖的体外抗氧化能力进行评价。其次,针对酶辅助提取锁阳多糖的提取工艺采用响应面法优化了提取工艺参数,采用DEAE-52、Sephedex G-200柱层析分离纯化得到两种锁阳多糖纯化组分,采用高效凝胶渗透色谱（HPGPC）、单糖组成分析、甲基化分析、紫外光谱、红外光谱、气质联用（GC-MS）和核磁共振（NMR）等手段对其化学结构进行了... 

【文章来源】：内蒙古大学内蒙古自治区 211工程院校

【文章页数】：142 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
摘要
abstract
第一章 绪论
    1.1 多糖研究进展
        1.1.1 多糖概述
        1.1.2 多糖的提取
        1.1.3 多糖的分离纯化
        1.1.4 多糖的结构解析
        1.1.5 多糖的生物活性
        1.1.6 多糖药物的研究与开发
    1.2 锁阳多糖研究进展
        1.2.1 锁阳简介
        1.2.2 锁阳的化学组成及生物活性研究进展
        1.2.3 锁阳多糖研究进展
    1.3 研究目的和意义
第二章 不同方法提取的锁阳多糖理化性质
    2.1 材料与方法
        2.1.1 材料与试剂
        2.1.2 主要仪器
        2.1.3 实验方法
            2.1.3.1 五种方法提取制备锁阳多糖
            2.1.3.2 化学组成测定
            2.1.3.3 紫外光谱分析
            2.1.3.4 红外光谱分析
            2.1.3.5 扫描电镜制样及观测
            2.1.3.6 原子力显微镜制样及观测
            2.1.3.7 单糖组成分析
            2.1.3.8 数据处理
    2.2 结果与讨论
        2.2.1 锁阳多糖的化学组成分析
        2.2.2 锁阳多糖的紫外光谱分析
        2.2.3 锁阳多糖的红外光谱分析
        2.2.4 锁阳多糖的扫描电镜分析
        2.2.5 锁阳多糖的原子力显微镜分析
        2.2.6 锁阳多糖的单糖组成分析
    2.3 本章小结
第三章 酶辅助提取锁阳多糖的工艺研究
    3.1 材料与方法
        3.1.1 材料与试剂
        3.1.2 主要仪器
        3.1.3 实验方法
            3.1.3.1 酶辅助提取锁阳多糖的制备工艺
            3.1.3.2 单因素实验
            3.1.3.3 筛选主要影响因素实验
            3.1.3.4 响应面法(RSM)优化提取条件
            3.1.3.5 统计分析
    3.2 结果与讨论
        3.2.1 单因素实验各因素对锁阳多糖得率的影响
        3.2.2 影响锁阳多糖得率主要因素的筛选
        3.2.3 响应面法优化提取工艺
    3.3 本章小结
第四章 锁阳多糖的分离纯化及结构解析
    4.1 材料与方法
        4.1.1 材料与试剂
        4.1.2 主要仪器
        4.1.3 实验方法
            4.1.3.1 酶辅助提取锁阳多糖CSP-PAE的分离与纯化
            4.1.3.2 锁阳多糖各组分的化学成分分析
            4.1.3.3 纯度鉴定与分子量测定
            4.1.3.4 紫外光谱分析
            4.1.3.5 红外光谱分析
            4.1.3.6 单糖组成分析
            4.1.3.7 甲基化分析
            4.1.3.8 核磁共振波谱分析
    4.2 结果与分析
        4.2.1 分离与纯化
        4.2.2 锁阳多糖各组分的化学成分分析
        4.2.3 CSP1和CSP2的纯度鉴定及分子量测定
        4.2.4 CSP1和CSP2的紫外光谱分析
        4.2.5 CSP1和CSP2的红外光谱分析
        4.2.6 CSP1和CSP2的单糖组成分析
        4.2.7 CSP1和CSP2的甲基化分析
        4.2.8 CSP1和CSP2的核磁共振波谱分析
    4.3 讨论
    4.4 本章小结
第五章 锁阳多糖的体外抗氧化活性研究
    5.1 材料与方法
        5.1.1 材料与试剂
        5.1.2 主要仪器
        5.1.3 实验方法
            5.1.3.1 清除DPPH自由基能力的测定
            5.1.3.2 清除ABTS自由基能力的测定
            5.1.3.3 清除羟基自由基能力的测定
            5.1.3.4 清除超氧阴离子自由基能力的测定
            5.1.3.5 铁还原/抗氧化能力的测定
    5.2 结果与讨论
        5.2.1 锁阳多糖对DPPH自由基的清除能力
        5.2.2 锁阳多糖对ABTS自由基的清除能力
        5.2.3 锁阳多糖对羟基自由基的清除能力
        5.2.4 锁阳多糖对超氧阴离子自由基的清除能力
        5.2.5 锁阳多糖的铁还原/抗氧化能力
    5.3 本章小结
第六章 锁阳多糖的体外免疫活性研究
    6.1 材料与方法
        6.1.1 材料与试剂
        6.1.2 主要仪器
        6.1.3 实验方法
            6.1.3.1 小鼠脾淋巴细胞悬液的制备
            6.1.3.2 CCK8法检测锁阳多糖对淋巴细胞的毒性
            6.1.3.3 CCK8法检测锁阳多糖对淋巴细胞增殖的影响
            6.1.3.4 ELISA法检测锁阳多糖对淋巴细胞分泌细胞因子的影响
            6.1.3.5 数据处理及统计
    6.2 结果与分析
        6.2.1 锁阳多糖对淋巴细胞毒性的评价
        6.2.2 锁阳多糖对淋巴细胞增殖的影响
        6.2.3 锁阳多糖对淋巴细胞分泌细胞因子的影响
    6.3 讨论
        6.3.1 免疫活性
        6.3.2 构效关系
    6.4 本章小结
第七章 结论与展望
    7.1 主要结论
    7.2 创新点
    7.3 展望
参考文献
致谢
攻读学位期间的研究成果


【参考文献】：
期刊论文
[1]不同分子量锁阳多糖体外抗氧化活性的研究[J]. 崔婷婷,袁长胜,邓小丽,刘冲,陈文.  时珍国医国药. 2017(06)
[2]铁皮石斛多糖对脾虚便秘小鼠免疫、肠道微生物及酶活性的影响[J]. 龙承星,贺璐,郭艳芳,刘又嘉,于子真,任婷,谭周进.  天然产物研究与开发. 2017(06)
[3]锁阳的研究进展[J]. 罗燕燕,马毅,张勋,晋玲,崔治家,王振恒.  中医研究. 2017(05)
[4]多糖-药物轭合物的研究与展望[J]. 张庆,徐溢,曹坤,牟秀霓,张晓凤,吕君江.  生物化学与生物物理进展. 2017(04)
[5]黄芩多糖的免疫调节活性[J]. 梁英,金迪,李丹丹,张燕,王璐,张树淼,王飞.  中国食品学报. 2017(02)
[6]雪莲果多糖降血脂及降血糖活性的研究[J]. 朱振元,李楠,张静怡,连红玉.  现代食品科技. 2017(05)
[7]中药多糖类活性成份的纳米化应用[J]. 朱宁,张乐帅,王富军.  中国新药杂志. 2017(01)
[8]不同方法提取的锁阳多糖光谱分析[J]. 樊海燕,那布其,陈贵林.  光谱学与光谱分析. 2016(S1)
[9]锁阳的研究现状及应用前景[J]. 慕桂娟,曹俊彦,郑玲艳,韩瑞兰.  中国医药导报. 2016(22)
[10]多糖的免疫调节作用及多糖药物的研究进展[J]. 李婧文,周长林.  中国生化药物杂志. 2016(04)

博士论文
[1]海蕴和锁阳多糖化学结构及生物活性机制研究[D]. 王武成.中国科学院上海药物研究所 2016
[2]新疆芜菁多糖的分离纯化、结构表征及生物活性研究[D]. 王伟.南京农业大学 2016
[3]竹茹多糖的化学结构和免疫活性研究[D]. 黄菊青.浙江大学 2015
[4]黑根霉菌丝体多糖结构表征及其抗肿瘤和免疫调节活性研究[D]. 陈国创.山东大学 2015
[5]玉郎伞多糖抗衰老作用及机制研究[D]. 段文明（DOAN VAN MINH）.广西医科大学 2014
[6]河蚬多糖结构特征、生物活性及其对人体肠道菌群的影响[D]. 廖宁波.浙江大学 2014
[7]当归多糖调控造血干细胞衰老的机制研究[D]. 张先平.重庆医科大学 2013
[8]五味子多糖的分离、结构鉴定及免疫活性研究[D]. 汪艳群.沈阳农业大学 2012
[9]桦褐孔菌多糖纯化、结构及其抗肿瘤机制研究[D]. 陈义勇.江南大学 2010
[10]锁阳多糖延缓衰老的作用及端粒酶调控机制研究[D]. 马丽杰.内蒙古大学 2009

硕士论文
[1]脱落酸和茉莉酸甲酯对锁阳茎切口愈合及褐变的调控[D]. 段园园.内蒙古大学 2013
[2]锁阳中原花青素的提取、鉴别及抗氧化性研究[D]. 高乃群.江南大学 2011
[3]碱提浒苔多糖降血糖、降血脂生物活性研究[D]. 孙士红.东北师范大学 2007



本文编号：3184540