血清药理学方法研究复方黄黛片对K562细胞凋亡的影响

发布时间：2021-05-17 17:33

　　目的:通过更接近真实体内给药环境的血清药理学方法证明复方黄黛片能够通过诱导细胞凋亡途径治疗慢性粒细胞白血病,为复方黄黛片拓展应用新的适应症提供理论依据。方法:清洁级SD大鼠为研究对象,复方黄黛片混悬剂连续灌胃7天,每天1次。腹主动脉取血,电感耦合等离子质谱仪（ICP-MS）检测血清中砷浓度。血清药物浓度以砷含量计。5μg/ml含药血清作用于白血病K562细胞,24 h后观察细胞给药前后形态学变化。运用CCK-8方法检测不同浓度含药血清（0μg/ml,2.5μg/ml,5μg/ml,10μg/ml,20μg/ml,40μg/ml,60μg/ml）给药后12 h,24 h,48 h对白血病K562细胞的增殖抑制作用。Calcein-AM/PI荧光染色、AnnexinV-FITC/PI双染法检测不同浓度含药血清（0μg/ml,5μg/ml,10μg/ml,20μg/ml）对K562细胞凋亡的影响;Western-Blot检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、Caspase-3、Cleaved Caspase-3、Caspase-9、Cleaved Caspase-9在不同浓度含药血清（0μg/... 

【文章来源】：大连医科大学辽宁省

【文章页数】：50 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
中文摘要
英文摘要
（一）前言
（二）材料和方法
    1. 材料
        1.1 实验动物和细胞株
        1.2 实验仪器
        1.3 主要试剂
        1.4 实验试剂配制
        1.5 其他耗材
    2. 方法
        2.1 含药血清制备
        2.2 含药血清对细胞增殖的影响
        2.3 Calcein-AM/PI荧光染色分析
        2.4 Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡
        2.5 Western Blot检测凋亡相关蛋白表达
        2.6 统计学分析
（三）结果
    3.1 含药血清中砷浓度测定
    3.2 含药血清对细胞形态学及细胞增殖影响
    3.3 Calcein-AM/PI染色结果分析
    3.4 Annexin V-FITC/PI染色结果分析
    3.5 凋亡蛋白分析
（四）讨论
（五）结论
（六）参考文献
综述
    参考文献
附录
攻读学位期间发表论文情况
致谢


【参考文献】：
期刊论文
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[2]锰暴露诱导SK-N-SH细胞发生程序性坏死和凋亡两种死亡方式的比较研究[J]. 邓祥发,刘丹丹,磨洁琳,陆彩玲,何莲瑜,任丹,潘剑,黎丹艳,幸雯雯,李媛清.  现代预防医学. 2017(23)
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[4]开心散含药血清对β-淀粉样蛋白致SH-SY5Y细胞损伤的影响[J]. 张景泉,桑旭星,姜艳艳,杨依,方芳.  中医药信息. 2017(06)
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[6]基于多元定序Logit模型的中药保健品消费影响因素研究——以南宁市为例[J]. 刘斯敏,曾学文.  中国市场. 2017(27)
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本文编号：3192160