红天麻、乌天麻及其杂交天麻的PCR鉴别

发布时间：2021-06-09 06:55

　　天麻作为我国名贵中药材,具有良好的药用价值。《中国植物志》中将天麻分为红天麻（原变型）Gastrodia elata f.elata、乌天麻G.elata f.glauca、绿天麻G.elata f.viridis、黄天麻G.elata f.flavid和松天麻G.elataf.alba等5个变型,其中红天麻与乌天麻的天麻素和多糖含量均较高,为栽培的优良品系。目前市场上流通的天麻商品多为红天麻、乌天麻或杂交天麻,但其传统性状鉴别特征并不明显,无法快速、准确区分。该研究旨在建立一种能够高效、准确鉴别红天麻、乌天麻及其杂交天麻的聚合酶链式反应（polymerase chain reaction,PCR）方法。根据天麻重测序结果,筛选获得特异性单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphism, SNP）变异位点,并利用变异位点设计2对特异性引物W291-F/W291-R和H255-F/H255-R。分别采集红天麻、乌天麻及其杂交天麻样品,建立并优化PCR鉴别方法,并对其耐受性和适用性进行考察与验证。使用特异性引物H255-F/H255-R、退火温度为48℃、循环数... 

【文章来源】：中国中药杂志. 2020,45(15)北大核心CSCD

【文章页数】：6 页

【部分图文】：

不同条件对红天麻、红乌杂交天麻特异性PCR鉴别结果的影响

不同仪器对红天麻、乌天麻、红乌杂交天麻特异性PCR鉴别结果的影响

根据3.1和3.2项下确定的最优PCR 鉴别体系和条件(红天麻:95 ℃预变性5 min;95 ℃变性30 s,48 ℃退火30 s,72 ℃延伸30 s,33个循环;72 ℃再延伸5 min。乌天麻:95 ℃预变性5 min;95 ℃变性30 s,51 ℃退火30 s,72 ℃延伸30 s,31个循环;72 ℃再延伸5 min),对采集的天麻样品进行PCR扩增,产物经2%琼脂糖凝胶电泳检测。结果显示,样品1～18号红天麻与41～43号红乌杂交天麻在255 bp处均出现单一明亮条带;样品19～40乌天麻与41～43号红乌杂交天麻在291 bp处均出现单一明亮条带,表明该体系能稳定准确鉴别红天麻、乌天麻及其杂交天麻,见图4。4 小结

【参考文献】：
期刊论文
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博士论文
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本文编号：3220168