人参皂苷Rb1抑制利多卡因诱导小鼠原代脊髓神经干细胞损伤研究

发布时间：2021-06-23 22:51

　　目的探讨人参皂苷Rb1对利多卡因引起的神经干细胞损伤的影响及作用机制。方法使用抗Nestin抗体、抗CD133抗体对原代神经细胞进行标记,采用流式细胞仪根据分步分选出神经干细胞,并利用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）及免疫荧光染色法检验其干细胞特性。分别利用含有利多卡因或人参皂苷Rb1的培养液培养分离出的神经干细胞,使用RT-qPCR和Western blot检测利多卡因或Rb1对神经干细胞c-Jun氨基末端激酶（JNK）信号通路分子及细胞凋亡相关分子表达的影响。利用利多卡因和Rb1共培养神经干细胞,并检验Rb1对利多卡因诱导的神经干细胞凋亡的影响。结果通过两步筛选,获得了较高纯度的脊髓神经干细胞。该干细胞表达神经干细胞的标记基因SOX2,并能够向相关神经细胞分化。利多卡因能够激活JNK信号通路并诱导神经干细胞的凋亡,而人参皂苷Rb1能够抑制JNK信号通路的激活并能够部分回复利多卡因处理诱导的神经干细胞凋亡。结论人参皂苷Rb1能够抑制利多卡因处理激活的JNK信号通路并回复由利多卡因处理引起的脊髓神经干细胞凋亡。 

【文章来源】：安徽医科大学学报. 2020,55(09)北大核心

【文章页数】：7 页

【部分图文】：

小鼠原代脊髓神经干细胞分离鉴定

配制含100 μmol/L人参皂苷干细胞培养液,用该培养液培养神经干细胞48 h,相对定量检测凋亡相关基因的变化。图4A的结果显示JNK信号通路激活相关的基因c-Jun、ATF2以及促进凋亡相关的FasL的mRNA丰度降低,而抑制凋亡的基因Bcl2表达量提高。(t=3.371,P<0.05;t=14.22,P<0.001)。此外,相对定量结果显示人参皂苷能够提高神经干细胞标记基因SOX2的表达,并抑制神经元基因NeuN的表达(t=5.183,P<0.01;t=3.267,P<0.05),见图4B。图4C中,Western blot 结果显示,人参皂苷加入后能够减少P-JNK 蛋白含量(t=2.935,P<0.05),提示凋亡的Cleaved-caspase3表达量也减少(t=3.651,P<0.05)。2.5 人参皂苷抑制利多卡因诱导的神经干细胞损伤

局部麻醉药品对神经系统及神经干细胞有一定损伤,但是目前仍不清楚其具体的机制。许多中药也被证明能够修复神经损伤,例如参附注射液能够部分保护布比卡因对神经组织的损伤[8]。白藜芦醇也能够修复局麻药罗哌卡因的部分神经毒性[9]。但是目前临床上仍然不能完全避免局麻药对神经组织的损伤作用,需要探索新的方案及药物去减轻局麻药的相关副作用。人参是我国的传统药用植物,其主要药理活性成分为人参皂苷。人参皂苷化合物有40种,具有抗氧化、缓解心血管病变、减缓肿瘤发展、改善脑部缺血、调节炎症反应等功能[10]。原人参二醇代表成分人参皂苷Rb1已被证明在神经系统中发挥重要作用,例如促进神经干细胞增殖[4]。但是,目前尚不清楚人参皂苷Rb1是否可抑制局部麻醉药物造成的神经干细胞损伤。图4 人参皂苷Rb1对神经干细胞的影响


本文编号：3245810