基于胞内蛋白/膜蛋白结合特性的金复康优化方防治肺癌物质基础研究：黄芪相关的组分结构特征及其生物药剂学性质
发布时间：2021-06-24 14:35
肺癌是目前发病率最高的癌症之一,严重危害着人类的健康。本实验室前期通过处方优化对复方药金复康处方组成进行了优化,得到了金复康优化方。且前期研究基础表明,黄芪在金复康优化方防治肺癌活性的发挥中起到至关重要的作用。为了明确黄芪防治肺癌的物质基础,阐明其组成成分及其量与量比关系,本文使用了多种技术方法,以期从不同层面对这一根本问题进行探讨。本论文主要围绕五个部分进行展开,具体内容如下:多靶点、多种作用途径下黄芪防治肺癌物质基础组成成分的预测:通过文献检索及文本分析构建黄芪成分-作用途径-靶点网络,并通过对网络拓扑结构信息的分析对作用途径、靶点及物质基础组成成分进行预测。并在此基础上,利用苯并芘化学诱导法构建AJ小鼠体内肺癌模型,取肺组织进行基因表达谱芯片检测。结果发现,苯并芘可使正常AJ小鼠肺组织基因网络出现紊乱,上调及下调大量靶点基因,而黄芪给药可促使偏离的基因表达向正常范围回归,从而纠正苯并芘诱导所引发的病理紊乱。基于网络药理学与基因芯片结果,预测出包括黄芪皂苷类化合物黄芪皂苷IV、黄芪皂苷II、环黄芪醇、黄芪皂苷VII、黄芪皂苷I以及黄芪黄酮类化合物毛蕊异黄酮、芒柄花黄素、鹰嘴豆素A、...
【文章来源】：南京中医药大学江苏省
【文章页数】：117 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
中文摘要
英文摘要
第一章 绪论
1.1 组分结构理论指导下创新中药制剂的拓展与外延
1.1.1 组分结构理论提出的必要性及合理性
1.1.2 组分结构理论指导下中药药效组分的筛选
1.2 黄芪成分及其生物活性研究进展
1.2.1 黄芪主要成分研究进展
1.2.2 生物活性研究进展
1.3 肠菌代谢与药物活性的发挥
1.4 基于胞内蛋白/膜蛋白结合特性筛选药效成分的探索
1.5 网络药理学与中药物质基础研究
1.5.1 在网络药理学指导下研究多组分对多靶点的活性
1.5.2 网络药理学与基因芯片技术
1.5.3 网络药理学与代谢研究的结合
参考文献
第二章 多靶点、多种作用途径下黄芪防治肺癌物质基础组成成分的预测
2.1 实验方法
2.1.1 仪器与材料
2.1.2 黄芪成分、作用途径相关靶点的搜集
2.1.3 基因表达谱芯片分析黄芪给药对肺癌AJ小鼠基因表达影响
2.2 实验结果
2.2.1 成分-基因-作用途径网络的构建
2.2.2 黄芪给药对AJ肺癌小鼠体内基因的调控
2.3 本章小结
参考文献
第三章 自噬作用途径下黄芪防治肺癌物质基础组成成分的初步发现
3.1 实验方法
3.1.1 仪器与材料
3.1.2 溶液配制
3.1.3 NHBE细胞培养
3.1.4 MTT实验
3.1.5 透射电镜观察自噬小体的形成
3.1.6 WB实验
3.1.7 IF买验
3.1.8 RCR实验
3.1.9 黄芪醇提物UPLC-MS定性分析
3.1.10 统计学分析
3.2 实验结果
3.2.1 黄芪提取物给药对自噬体形成的影响
3.2.2 黄芪对香烟诱导细胞模型中p53的调节作用
3.2.3 黄芪对香烟诱导细胞模型中Beclin1的调节作用
3.2.4 黄芪对香烟诱导细胞模型中AMPK的调节作用
3.2.5 黄芪对香烟诱导细胞模型中p-Bcl-2的调节作用
3.2.6 黄芪对香烟诱导细胞模型中mTOR的调节作用
3.2.7 黄芪醇提物成分定性分析
3.3 本章小结
参考文献
第四章 代谢作用对黄芪防治肺癌物质基础组成成分量的改变与质的转化
4.1 实验方法
4.1.1 仪器与材料
4.1.2 溶液的配制
4.1.3 黄芪提取
4.1.4 标本采集与稀释
4.1.5 肠道菌群与药物共孵育
4.1.6 检测方法的构建
4.2 实验结果
4.2.1 黄芪效应成分在肠道菌群作用下的代谢转化
4.2.2 黄芪效应成分代谢途径
4.3 本章小结
参考文献
第五章 细胞固相化色谱模型明确黄芪防治肺癌物质基础组成成分及组分
5.1 实验方法
5.1.1 仪器与材料
5.1.2 A549细胞培养
5.1.3 溶液的配制
5.1.4 孵育液与A549细胞共孵育
5.1.5 洗脱未结合成分
5.1.6 细胞膜固相化黄芪成分的解离
5.1.7 黄芪提取物与胞内蛋白的结合
5.1.8 样品处理
5.1.9 检测条件
5.2 实验结果
5.2.1 孵育条件考察
5.2.2 结合成分分析
5.2.3 成分结合过程动力学特征
5.3 本章小结
参考文献
第六章 黄芪皂苷与黄芪黄酮组分的生物药剂学性质研究
6.1 实验方法
6.1.1 仪器与材料
6.1.2 HPLC法标准曲线的绘制
6.1.3 含量测定
6.1.4 方法学试验
6.1.5 平衡溶解度及油水分配系数的测定
6.2 实验结果
6.2.1 平衡溶解度
6.2.2 油水分配系数
6.2.3 生物药剂学性质的相似度分析
6.2.4 质量权重系数法整合表征组分整体性质
6.2.5 生物药剂学性质分类
6.3 本章小结
参考文献
第七章 结论与展望
7.1 研究创新点
7.2 主要结论
7.3 工作展望
攻读硕士学位期间取得的学术成果
致谢
【参考文献】：
期刊论文
[1]黄芪皂苷对化疗贫血小鼠PI3K/Akt/mTOR信号通路相关基因mRNA表达的影响[J]. 乔铁,梁可,马进,林蔗茹,郑冰元,张立德. 中国中药杂志. 2016(20)
[2]12种黄酮化合物油水分配系数的测定[J]. 张慧杰,王萌,陈丽娜,刘亚男,任晓亮,戚爱棣. 中成药. 2016(08)
[3]消岩汤对A549/DDP细胞自噬及耐药蛋白的影响研究[J]. 杨佩颖,许文婷,刘宏根,张欣,张莹,于晓宇,贾英杰. 天津中医药. 2016(06)
[4]中药有效成分与肠道菌群相互作用的研究进展[J]. 祖先鹏,林璋,谢海胜,杨鸟,刘心如,张卫东. 中国中药杂志. 2016(10)
[5]麦冬醇提物抑制肺癌生长及自噬作用研究[J]. 袁嘉瑞,汪春飞,宋捷,赵冰洁,李超,田刚,董自波,封亮,贾晓斌. 中草药. 2016(09)
[6]PC12细胞氧糖剥夺模型细胞自噬与损伤的关系及黄芪甲苷的保护作用研究[J]. 黄小平,李静娴,杨筱倩,丁煌,唐标,刘晓丹,邓常清. 世界中医药. 2016(04)
[7]4种黄酮类中药有效成分BCS分类及吸收机制的初步研究[J]. 李慧芳,张冬,曲文君,王海霖,刘洋,阿里穆斯,崔箭,董政起. 中国中药杂志. 2016(07)
[8]黄芪甲苷通过调节细胞自噬增强贝伐单抗在肺癌细胞系A549中抗肿瘤作用机制的研究[J]. 庞歆桥,王婧,姚婷,龚明涛,马妮娜. 临床与病理杂志. 2016(03)
[9]不同产地黄芪中黄芪多糖的含量及其抗疲劳、耐常压缺氧作用[J]. 朱尚文,魏佳,许勇镇,王素妹,颜艺芳,房盛懿,江澍. 陕西中医药大学学报. 2016(01)
[10]毛蕊异黄酮生物活性的研究进展[J]. 张冬青,王海宝,王淑芳,汪德清. 中国中药杂志. 2015(22)
博士论文
[1]黄芪活性物质筛选及基于PKC-ERK信号通路抑制肺癌的作用机理研究[D]. 成旭东.南京中医药大学 2015
[2]中药活性组分的细胞膜色谱筛选和靶标鉴定方法学研究[D]. 陈啸飞.第二军医大学 2014
[3]芒柄花黄素对宫颈癌细胞增殖的影响及其机制研究[D]. 金月梅.吉林大学 2014
[4]盐酸小檗碱抑制内毒素血症小肠粘膜环氧化酶-2过表达及机制探讨研究[D]. 冯爱文.南京大学 2011
硕士论文
[1]白花蛇舌草总黄酮苷和苷元的制备及肠道菌群代谢研究[D]. 高志敏.山东中医药大学 2013
[2]丹参二萜醌组分整体药剂学性质表征及其固体分散体微丸的研究[D]. 郁丹红.南京中医药大学 2013
[3]刺芒柄花素应用于非小细胞肺癌治疗的初步探讨[D]. 于声利.华中科技大学 2012
[4]脾细胞固相化萃取结合高效液相色谱法（SE-HPLC）研究玉屏风散抑制迟发型超敏反应的效应物质基础[D]. 王亮.南京中医药大学 2009
[5]离体培养的肠道菌群对黄山药总皂苷的代谢研究[D]. 张怡红.广东药学院 2008
[6]黄芪有效部位脂质体的研究[D]. 井水泉.沈阳药科大学 2003
本文编号：3247281
【文章来源】：南京中医药大学江苏省
【文章页数】：117 页
【学位级别】：硕士
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中文摘要
英文摘要
第一章 绪论
1.1 组分结构理论指导下创新中药制剂的拓展与外延
1.1.1 组分结构理论提出的必要性及合理性
1.1.2 组分结构理论指导下中药药效组分的筛选
1.2 黄芪成分及其生物活性研究进展
1.2.1 黄芪主要成分研究进展
1.2.2 生物活性研究进展
1.3 肠菌代谢与药物活性的发挥
1.4 基于胞内蛋白/膜蛋白结合特性筛选药效成分的探索
1.5 网络药理学与中药物质基础研究
1.5.1 在网络药理学指导下研究多组分对多靶点的活性
1.5.2 网络药理学与基因芯片技术
1.5.3 网络药理学与代谢研究的结合
参考文献
第二章 多靶点、多种作用途径下黄芪防治肺癌物质基础组成成分的预测
2.1 实验方法
2.1.1 仪器与材料
2.1.2 黄芪成分、作用途径相关靶点的搜集
2.1.3 基因表达谱芯片分析黄芪给药对肺癌AJ小鼠基因表达影响
2.2 实验结果
2.2.1 成分-基因-作用途径网络的构建
2.2.2 黄芪给药对AJ肺癌小鼠体内基因的调控
2.3 本章小结
参考文献
第三章 自噬作用途径下黄芪防治肺癌物质基础组成成分的初步发现
3.1 实验方法
3.1.1 仪器与材料
3.1.2 溶液配制
3.1.3 NHBE细胞培养
3.1.4 MTT实验
3.1.5 透射电镜观察自噬小体的形成
3.1.6 WB实验
3.1.7 IF买验
3.1.8 RCR实验
3.1.9 黄芪醇提物UPLC-MS定性分析
3.1.10 统计学分析
3.2 实验结果
3.2.1 黄芪提取物给药对自噬体形成的影响
3.2.2 黄芪对香烟诱导细胞模型中p53的调节作用
3.2.3 黄芪对香烟诱导细胞模型中Beclin1的调节作用
3.2.4 黄芪对香烟诱导细胞模型中AMPK的调节作用
3.2.5 黄芪对香烟诱导细胞模型中p-Bcl-2的调节作用
3.2.6 黄芪对香烟诱导细胞模型中mTOR的调节作用
3.2.7 黄芪醇提物成分定性分析
3.3 本章小结
参考文献
第四章 代谢作用对黄芪防治肺癌物质基础组成成分量的改变与质的转化
4.1 实验方法
4.1.1 仪器与材料
4.1.2 溶液的配制
4.1.3 黄芪提取
4.1.4 标本采集与稀释
4.1.5 肠道菌群与药物共孵育
4.1.6 检测方法的构建
4.2 实验结果
4.2.1 黄芪效应成分在肠道菌群作用下的代谢转化
4.2.2 黄芪效应成分代谢途径
4.3 本章小结
参考文献
第五章 细胞固相化色谱模型明确黄芪防治肺癌物质基础组成成分及组分
5.1 实验方法
5.1.1 仪器与材料
5.1.2 A549细胞培养
5.1.3 溶液的配制
5.1.4 孵育液与A549细胞共孵育
5.1.5 洗脱未结合成分
5.1.6 细胞膜固相化黄芪成分的解离
5.1.7 黄芪提取物与胞内蛋白的结合
5.1.8 样品处理
5.1.9 检测条件
5.2 实验结果
5.2.1 孵育条件考察
5.2.2 结合成分分析
5.2.3 成分结合过程动力学特征
5.3 本章小结
参考文献
第六章 黄芪皂苷与黄芪黄酮组分的生物药剂学性质研究
6.1 实验方法
6.1.1 仪器与材料
6.1.2 HPLC法标准曲线的绘制
6.1.3 含量测定
6.1.4 方法学试验
6.1.5 平衡溶解度及油水分配系数的测定
6.2 实验结果
6.2.1 平衡溶解度
6.2.2 油水分配系数
6.2.3 生物药剂学性质的相似度分析
6.2.4 质量权重系数法整合表征组分整体性质
6.2.5 生物药剂学性质分类
6.3 本章小结
参考文献
第七章 结论与展望
7.1 研究创新点
7.2 主要结论
7.3 工作展望
攻读硕士学位期间取得的学术成果
致谢
【参考文献】：
期刊论文
[1]黄芪皂苷对化疗贫血小鼠PI3K/Akt/mTOR信号通路相关基因mRNA表达的影响[J]. 乔铁,梁可,马进,林蔗茹,郑冰元,张立德. 中国中药杂志. 2016(20)
[2]12种黄酮化合物油水分配系数的测定[J]. 张慧杰,王萌,陈丽娜,刘亚男,任晓亮,戚爱棣. 中成药. 2016(08)
[3]消岩汤对A549/DDP细胞自噬及耐药蛋白的影响研究[J]. 杨佩颖,许文婷,刘宏根,张欣,张莹,于晓宇,贾英杰. 天津中医药. 2016(06)
[4]中药有效成分与肠道菌群相互作用的研究进展[J]. 祖先鹏,林璋,谢海胜,杨鸟,刘心如,张卫东. 中国中药杂志. 2016(10)
[5]麦冬醇提物抑制肺癌生长及自噬作用研究[J]. 袁嘉瑞,汪春飞,宋捷,赵冰洁,李超,田刚,董自波,封亮,贾晓斌. 中草药. 2016(09)
[6]PC12细胞氧糖剥夺模型细胞自噬与损伤的关系及黄芪甲苷的保护作用研究[J]. 黄小平,李静娴,杨筱倩,丁煌,唐标,刘晓丹,邓常清. 世界中医药. 2016(04)
[7]4种黄酮类中药有效成分BCS分类及吸收机制的初步研究[J]. 李慧芳,张冬,曲文君,王海霖,刘洋,阿里穆斯,崔箭,董政起. 中国中药杂志. 2016(07)
[8]黄芪甲苷通过调节细胞自噬增强贝伐单抗在肺癌细胞系A549中抗肿瘤作用机制的研究[J]. 庞歆桥,王婧,姚婷,龚明涛,马妮娜. 临床与病理杂志. 2016(03)
[9]不同产地黄芪中黄芪多糖的含量及其抗疲劳、耐常压缺氧作用[J]. 朱尚文,魏佳,许勇镇,王素妹,颜艺芳,房盛懿,江澍. 陕西中医药大学学报. 2016(01)
[10]毛蕊异黄酮生物活性的研究进展[J]. 张冬青,王海宝,王淑芳,汪德清. 中国中药杂志. 2015(22)
博士论文
[1]黄芪活性物质筛选及基于PKC-ERK信号通路抑制肺癌的作用机理研究[D]. 成旭东.南京中医药大学 2015
[2]中药活性组分的细胞膜色谱筛选和靶标鉴定方法学研究[D]. 陈啸飞.第二军医大学 2014
[3]芒柄花黄素对宫颈癌细胞增殖的影响及其机制研究[D]. 金月梅.吉林大学 2014
[4]盐酸小檗碱抑制内毒素血症小肠粘膜环氧化酶-2过表达及机制探讨研究[D]. 冯爱文.南京大学 2011
硕士论文
[1]白花蛇舌草总黄酮苷和苷元的制备及肠道菌群代谢研究[D]. 高志敏.山东中医药大学 2013
[2]丹参二萜醌组分整体药剂学性质表征及其固体分散体微丸的研究[D]. 郁丹红.南京中医药大学 2013
[3]刺芒柄花素应用于非小细胞肺癌治疗的初步探讨[D]. 于声利.华中科技大学 2012
[4]脾细胞固相化萃取结合高效液相色谱法（SE-HPLC）研究玉屏风散抑制迟发型超敏反应的效应物质基础[D]. 王亮.南京中医药大学 2009
[5]离体培养的肠道菌群对黄山药总皂苷的代谢研究[D]. 张怡红.广东药学院 2008
[6]黄芪有效部位脂质体的研究[D]. 井水泉.沈阳药科大学 2003
本文编号：3247281
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