TET1酶催化核酸碱基羟基化选择性的化学研究

发布时间：2021-07-23 11:22

　　目的:作为催化氧化脱甲基的酶,TET1（ten-eleven translocation）酶能够诱导5-甲基胞嘧啶（5mC）发生羟化生成5-羟甲基胞嘧啶（5hmC）,而后,又被证明能够催化胸腺嘧啶（T）,转化生成5-羟甲基尿嘧啶（5hmU）。研究表明许多中药成分能抑制其作用,但机制尚未明确。为了探索药物对TET1酶的作用,首先需要对TET1酶作用机制有更深入的了解。本实验旨在从化学角度上研究TET1酶的作用机制以及其诱导的羟基化反应的选择性,从而总结出此类反应的一般规律,为研究核酸氧化脱甲基作用提供依据,为阐明核酸羟基化与蛋白羟基化的机制提供化学依据,为开发基于表观遗传学的新型的药物提供理论参考。方法:本实验以TET1酶为研究对象,选取具有代表性的有机化合物作为底物,包括环己烷、甲基环己烷、乙基苯、异丙苯、水杨酸甲酯、水杨酸乙酯、2-氨基-4,6-二甲基嘧啶、6-甲基嘌呤、L-甲硫氨酸、茶碱以及5-乙基尿嘧啶等,在Fe（Ⅱ）和α-KG存在的条件下发生体外反应。反应液采用气质联用和液质联用的检测方法分析,通过分析产物质谱图中的碎片离子峰,判断产物的结构以及被取代H原子的位置和发生反应C-... 

【文章来源】：广州中医药大学广东省

【文章页数】：63 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

与ShmC结合的TETl酶结构fuel

广州中医巧大学２０１７届硕女学位论文??澄黨猿道沒公：々Ａ燃裝議纖绞费．电芯游屋酶巧田；巧總然＾終??ａ—麵??Ｋ：．：ｙ?左巧ｎ幌一‘，＂画??■鲁?ｉｆ?！??，，‘五…．．??图４反应装置图??２．２丄２?ＧＣ－ＭＳ联用分析条件：??柱型号：Ａｇｉｌｅｎｔ?１９０９１Ｓ－４３３?３２５°Ｃ（最高温度），ＨＰ－５ＭＳ?５〇／〇Ｐｈｅｎｙｌ?Ｍｅｔｈｙｌ?Ｓｉｌｏｘ毛细柱３０．０ｘ２５０叫ｎｘ０．２５＾ｍｌ标称。??升温程序：起始温度８０°Ｃ，维持３ｍｉｎ，?ｌＵ２０°Ｃ／ｍｉｎ的升温速率升至１８０°Ｃ，Ｗ?１５°Ｃ／ｍｉｎ的升温速率升至终止温度２８０°Ｃ。??２．２．２?ＴＥＴ１醇介导的Ｔ怒基化反应的结果与讨论??

图４反应装置图??ＭＳ联用分析条件：??ｉｌｅｎｔ?１９０９１Ｓ－４３３?３２５°Ｃ（最高温度），ＨＰ－５ＭＳ?５〇／〇Ｐｈｅｎｙｌ?Ｍｅｔｈｙｌ?０ｘ２５０叫ｎｘ０．２５＾ｍｌ标称。??起始温度８０°Ｃ，维持３ｍｉｎ，?ｌＵ２０°Ｃ／ｍｉｎ的升温速率升至１８ｎ的升温速率升至终止温度２８０°Ｃ。??醇介导的Ｔ怒基化反应的结果与讨论??丰度?离子３百Ｓ?（３Ｓ７．７到３Ｓ８．７）?＊?ＳｈｍＵ??８０００００ＣＨ?２１??７００００００?Ａ?ｉ??６００００００??５００００００．??４００００００－??３００００００??２０００如０？??１００００００－??

【参考文献】：
期刊论文
[1]TET蛋白去甲基化作用的相关研究进展[J]. 李惠晨,叶明翔,侯赟,赖晓凤,马勇政,韦伊芳,张健.  现代生物医学进展. 2014(27)
[2]DNA甲基化和去甲基化的研究现状及思考[J]. 邓大君.  遗传. 2014(05)
[3]DNA甲基化/去甲基化与癌症[J]. 周建生,杨生生,缪明永,焦炳华.  生命的化学. 2013(04)
[4]5-羟甲基胞嘧啶的研究进展[J]. 张燕霞,高可润,禹顺英.  遗传. 2012(05)
[5]DNA去甲基化机制的研究进展[J]. 曹领改,张旸,蓝兴国,李玉花.  现代生物医学进展. 2012(01)
[6]α—H的活性及其反应[J]. 徐国清.  萍乡高等专科学校学报. 2003(04)
[7]双键α-H亲电反应性探讨[J]. 孙喜龙.  张家口师专学报. 2000(04)
[8]有机化学反应选择性的经验规律[J]. 胡文祥.  化学通报. 1995(08)



本文编号：3299200