基于何首乌炮制“时-效-毒”变化规律的肝损伤机制及物质基础研究
发布时间：2021-08-05 15:36
目的本研究通过体内与体外实验。探讨了何首乌生品及不同炮制品“时（炮制时间）-效-毒”的相关性,采用HPLC技术、细胞流式仪并且结合血液生化指标、免疫组化及PCR技术,对何首乌生品及不同时间炮制品的主要成分以及一些相关性指标的变化进行研究,并为临床正确用药提供理论支持。方法1.采用HPLC的方法,用色谱柱:HYPERSIL GOLD AQ 5UM（250*4.6MM）COLUMN。甲醇为A相,0.1%的甲酸水为B相进行梯度洗脱,019min,10%36%A,90%63%B;1930min,36%71%A,63%29%B;3050min,71%100%A,29%0%B;5060min,100%A。色谱柱温度:35℃;检测波长:254 nm;流速:1.0 ml/min;进样量为10μL的方法对何首乌不同炮制品中蒽醌类、没食子酸及二苯乙烯苷成分的含量进行检测。2.取42只SD大...
【文章来源】：陕西中医药大学陕西省
【文章页数】：51 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
何首乌几种不同炮制品4中成分色谱图（1.没食子酸2.二苯乙烯苷3.大黄素4.大黄素甲醚）
陕西中医药大学 2019 届硕士学位论文表 1 含药血清对 HepG2 细胞存活率的影响别 OD 值 存活率（%血清组 0.504±0.122 98.67白组 0.482±0.069 95.46乌组 0.246±0.107**48.90 8h 组 0.285±0.063**56.60 16h 组 0.318±0.028**#63.13 32h 组 0.329±0.071**#65.39 48h 组 0.373±0.067**#74.18 72h 组 0.395±0.075**#78.41比较，**P<0.01，*P<0.05；与生首乌组比较，##P<0.01，#P<0.05。
A.空白对照组；B.生首乌组；C-G.清蒸 8h、16h、32h、48h、72h 组图 1 含药血清对 HepG2 细胞形态学的影响3.3 何首乌不同炮制品含药血清对 HepG2 细胞凋亡的影响在给药培养 24h 后的六孔板中，用不含 EDTA 的胰酶将照 AnnexinV-PI 试剂盒说明书进行操作后进行检测。细胞流式现不同程度的早期和晚期凋亡还有细胞坏死，空白大鼠血清组统计学差异（P>0.05），说明 10%的胎牛血清和 15%的空白大鼠而生首乌组、清蒸清蒸 8h、16h、32h、48h 及 72h 组与空白组学的差异（P<0.01），主要出现在 AV+、PI-区域，说明清蒸血清都会使 HepG2 细胞产生相应的凋亡。清蒸组与生首乌组统计学差异（P<0.01）。流式仪检测的标准：AV-、PI-区域表示PI-区域表示的早期凋亡的细胞；AV-、PI+区域表示的是坏死的表示的晚期凋亡的细胞。如图 2 所示：
【参考文献】：
期刊论文
[1]何首乌中相关蒽醌类化合物抗癌作用的研究进展[J]. 朱艺,李琛,李洪亮,汪选斌. 中国实验方剂学杂志. 2019(18)
[2]何首乌的临床应用及其相关肝损伤的研究进展[J]. 陶丽宇,高月求,王建茹,周昕. 湖南中医杂志. 2018(11)
[3]Cocktail法评价敌敌畏对大鼠CYP450亚型酶活性的影响[J]. 李君桦,吴海亚,陈东鑫,耿培武,庄开赞,周华. 中国卫生检验杂志. 2018(16)
[4]何首乌不同提取物致大鼠肝损伤的血清生物标志物研究[J]. 段小芳,段思明,李贺芝,王茜. 河北中医药学报. 2018(04)
[5]川芎嗪诱导小鼠肝药酶Cyp3a11的作用及其机制研究[J]. 张轶雯,钟里科,楼倩雯,潘宗富,方罗,黄萍. 中国现代应用药学. 2018(07)
[6]大黄蒽醌类化学成分和药理作用研究进展[J]. 王亦君,冯舒涵,程锦堂,陈莎. 中国实验方剂学杂志. 2018(13)
[7]何首乌化学成分和药理作用[J]. 赵明宇. 北方药学. 2018(03)
[8]何首乌不同炮制品水提物对小鼠急性毒性实验研究[J]. 王燕青,石亮,吕莉莉,黄娜娜,郭欣,蔡涛涛,李晓宇,孙蓉. 中国药物警戒. 2017(10)
[9]肝脏药物代谢酶CYP450与中药肝毒性的关系[J]. 侯健,孙娥,宋捷,杨蕾,张振海,宁青,贾晓斌. 中国中药杂志. 2016(15)
[10]何首乌下调1型糖尿病大鼠MLCK表达及其对认知功能的影响[J]. 任智晶,罗武,朱丽英,何玉,常啸,潘卫,李兴. 时珍国医国药. 2015(06)
博士论文
[1]何首乌致肝损伤成分及作用机制研究[D]. 林龙飞.北京中医药大学 2016
硕士论文
[1]基于肝细胞毒价检测的何首乌质量控制方法研究[D]. 吕旸.北京化工大学 2013
[2]广西何首乌中蒽醌类化合物GXHSWAQ-1单体对鼻咽癌的放射增敏作用及其机制[D]. 刘瑛.广西医科大学 2009
本文编号：3324012
【文章来源】：陕西中医药大学陕西省
【文章页数】：51 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
何首乌几种不同炮制品4中成分色谱图（1.没食子酸2.二苯乙烯苷3.大黄素4.大黄素甲醚）
陕西中医药大学 2019 届硕士学位论文表 1 含药血清对 HepG2 细胞存活率的影响别 OD 值 存活率（%血清组 0.504±0.122 98.67白组 0.482±0.069 95.46乌组 0.246±0.107**48.90 8h 组 0.285±0.063**56.60 16h 组 0.318±0.028**#63.13 32h 组 0.329±0.071**#65.39 48h 组 0.373±0.067**#74.18 72h 组 0.395±0.075**#78.41比较，**P<0.01，*P<0.05；与生首乌组比较，##P<0.01，#P<0.05。
A.空白对照组；B.生首乌组；C-G.清蒸 8h、16h、32h、48h、72h 组图 1 含药血清对 HepG2 细胞形态学的影响3.3 何首乌不同炮制品含药血清对 HepG2 细胞凋亡的影响在给药培养 24h 后的六孔板中，用不含 EDTA 的胰酶将照 AnnexinV-PI 试剂盒说明书进行操作后进行检测。细胞流式现不同程度的早期和晚期凋亡还有细胞坏死，空白大鼠血清组统计学差异（P>0.05），说明 10%的胎牛血清和 15%的空白大鼠而生首乌组、清蒸清蒸 8h、16h、32h、48h 及 72h 组与空白组学的差异（P<0.01），主要出现在 AV+、PI-区域，说明清蒸血清都会使 HepG2 细胞产生相应的凋亡。清蒸组与生首乌组统计学差异（P<0.01）。流式仪检测的标准：AV-、PI-区域表示PI-区域表示的早期凋亡的细胞；AV-、PI+区域表示的是坏死的表示的晚期凋亡的细胞。如图 2 所示：
【参考文献】：
期刊论文
[1]何首乌中相关蒽醌类化合物抗癌作用的研究进展[J]. 朱艺,李琛,李洪亮,汪选斌. 中国实验方剂学杂志. 2019(18)
[2]何首乌的临床应用及其相关肝损伤的研究进展[J]. 陶丽宇,高月求,王建茹,周昕. 湖南中医杂志. 2018(11)
[3]Cocktail法评价敌敌畏对大鼠CYP450亚型酶活性的影响[J]. 李君桦,吴海亚,陈东鑫,耿培武,庄开赞,周华. 中国卫生检验杂志. 2018(16)
[4]何首乌不同提取物致大鼠肝损伤的血清生物标志物研究[J]. 段小芳,段思明,李贺芝,王茜. 河北中医药学报. 2018(04)
[5]川芎嗪诱导小鼠肝药酶Cyp3a11的作用及其机制研究[J]. 张轶雯,钟里科,楼倩雯,潘宗富,方罗,黄萍. 中国现代应用药学. 2018(07)
[6]大黄蒽醌类化学成分和药理作用研究进展[J]. 王亦君,冯舒涵,程锦堂,陈莎. 中国实验方剂学杂志. 2018(13)
[7]何首乌化学成分和药理作用[J]. 赵明宇. 北方药学. 2018(03)
[8]何首乌不同炮制品水提物对小鼠急性毒性实验研究[J]. 王燕青,石亮,吕莉莉,黄娜娜,郭欣,蔡涛涛,李晓宇,孙蓉. 中国药物警戒. 2017(10)
[9]肝脏药物代谢酶CYP450与中药肝毒性的关系[J]. 侯健,孙娥,宋捷,杨蕾,张振海,宁青,贾晓斌. 中国中药杂志. 2016(15)
[10]何首乌下调1型糖尿病大鼠MLCK表达及其对认知功能的影响[J]. 任智晶,罗武,朱丽英,何玉,常啸,潘卫,李兴. 时珍国医国药. 2015(06)
博士论文
[1]何首乌致肝损伤成分及作用机制研究[D]. 林龙飞.北京中医药大学 2016
硕士论文
[1]基于肝细胞毒价检测的何首乌质量控制方法研究[D]. 吕旸.北京化工大学 2013
[2]广西何首乌中蒽醌类化合物GXHSWAQ-1单体对鼻咽癌的放射增敏作用及其机制[D]. 刘瑛.广西医科大学 2009
本文编号：3324012
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