积雪草酸对小鼠心肌细胞凋亡和心力衰竭的保护作用及其机制研究

发布时间：2021-08-08 16:21

　　第一章积雪草酸对乳酸诱导的心肌细胞损伤的保护作用及机制研究目的:研究积雪草酸（Asiatic acid,AA）对乳酸（Lactate）诱导的心肌细胞损伤的保护作用,并探讨其可能的机制。方法:1.体外培养新生乳大鼠的原代心肌细胞,采用CCK-8法测定不同浓度AA（0、5、10、20、30μmol/L）和 Lactate（0、2.5、5、10、20、40mmol/L）对心肌细胞活力的影响。本实验中采用Lactate（20 mmol/L）刺激心肌细胞24 h来建立心肌细胞Lactate损伤模型,研究AA（20 μmol/L）预处理24 h对心肌细胞Lactate损伤的保护作用和机制。2.实验分为4组:①正常对照组（Control组）:不加Lactate和AA处理;②AA组:细胞中只加AA（20μmol/L）预处理24h;③Lactate组:细胞只加Lactate（20 mmol/L）处理 24h;④Lactate+AA 组:AA（20μmol/L）预处理 24h,再加 Lactate（20 mmol/L）处理 24 h。3.经DCFH-DA染色,用流式细胞仪检测细胞内活性氧（Reactive... 

【文章来源】：苏州大学江苏省 211工程院校

【文章页数】：77 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

图１．心肌细胞活力检测

与单纯Ｌａｃｔａｔｅ刺激组相比，％＜?０．０１，＜０．００１。??二、各组心肌细胞内ＲＯＳ浓度比较??如图２所示，流式细胞仪检测结果表明，Ｌａｃｔａｔｅ?（２０?ｍＭ）刺激２４?ｈ后，心肌细??胞内ＲＯＳ浓度与Ｃｏｎｔｒｏ丨组比较显著升高（Ｐ＜０．００１）。ＡＡ?（２０ｐＭ）预处理２４ｈ，再??加Ｌａｃｔａｔｅ?（２０?ｍＭ）刺激２４?ｈ，心肌细胞内ＲＯＳ浓度显著低于Ｌａｃｔａｔｅ组（ＰＣ０．００１?）。??另外，单纯ＡＡ?（２０?＾Ｍ）预处理２４?ｈ对正常心肌细胞内Ｒ０Ｓ浓度并无显著影响。??Ｃｏｎｔｒｏｌ?ＡＡ??；１?：?ｉ?｜?，丨?＿??１０１?１０＇?１（Ｈ?１０？?，０＿?１ｔ＞？?１０＇?§?３〇．??＊＊＊??〇?Ｌａｃｔａｔｅ?Ｌａｃｔａｔｅ＋ＡＡ?Ｊ??Ａ＂?Ｉ?厂「?＿?？??■?Ｌａｃｔａｔｅ?ｍＭ｝?－?－?＋?＋??」?Ｊ＾Ｂ?Ａｓｉａｔｉｃ?ａｃｉｄ?（２０?＞ｉＭ）?－?＋?？?＋??ｌｙ?？＇?ｉｃ＾?ｉｃ＂?ｉｏ＇???＞??ＤＣＦ－ＤＡ??图２．各组心肌细胞内ＲＯＳ浓度。与对照组相比，＊＊＊Ｐ?＜０．００１；与Ｌａｃｔａｔｅ组相??比，＿Ｐ?＜０．００１。??１７??

积雪草酸对小鼠心肌细胞凋亡和心力衰竭的保护作用及其机制研究??三、各组心肌细胞线粒体膜电位的比较??如图３Ａ所示，焚光显微镜观察各组心肌细胞线粒体膜电位（ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌ??ｍｅｍｂｒａｎｅ?ｐｏｔｅｎｔｉａｌ），Ｌａｃｔａｔｅ?（２０?ｍＭ）刺激心肌细胞２４?ｈ后，线粒体绿色焚光显著??增多，表明线粒体膜电位显著下降。ＡＡ?（２０?ｊｉＭ）预处理２４?ｈ，再加Ｌａｃｔａｔｅ?（２０?ｍＭ）??刺激心肌细胞２４?ｈ，线粒体绿色荧光显著减少，表明线粒体膜电位上升。与此同时，??流式细胞仪检测结果显示，Ｌａｃｔａｔｅ组低线粒体膜电位的心肌细胞比例显著高于??Ｃｏｎｔｒｏｌ组（Ｐ＜０．００１）。与Ｌａｃｔａｔｅ组相比，Ｌａｃｔａｔｅ＋ＡＡ组低线粒体膜电位的细胞比例??显著降低（Ｐ＜〇．〇〇ｌ?），说明ＡＡ预处理可以阻止Ｌａｃｔａｔｅ损伤引起的心肌细胞线粒体??膜电位降低（图３Ｂ）。另外，单纯ＡＡ?（２０?ｐＭ）预处理２４?ｈ对正常心肌细胞线粒体??膜电位并无显著影响。??Ａ?Ｃｏｎｔｒｏｌ?ＡＡ?Ｌａｃｔａｔｅ?Ｌａｃｔａｔｅ＋ＡＡ??－Ｍｌ?Ｈｉ??■＾■１?ＨＨ?Ｈｈｈ??Ｂ???Ｃｏｎｔｒｏｌ???ＡＡ???」?Ｉ??．ＤｌＪｔ／Ｕ?ｉｉａ?ａ??芒?Ｉｆｆ２?１０：?ｔ〇ｚ?１〇５?１０ｓ?１０’?１〇２?１０３?ｓ?．ＣＤ?＿??３?Ｊ?？§?２０－?丁??Ｑ?Ｌａｃｔａｔｅ?Ｌａｃｔａｔｅ＋ＡＡ?ｇ?ｇ?丨穩瞻：赞??

【参考文献】：
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