莪术醇抗人肺癌H460细胞的药效学及其作用机制研究
发布时间：2021-08-14 23:35
目前癌症的治疗仍是公认的难题,我国肺癌的发病率及死亡率仍居高不下,传统的化疗药物的选择性较低,在杀死癌细胞的往往会对机体某些正常细胞也造成一定的损害,严重影响患者治疗疗效和生活质量甚至威胁生命,因此,对肺癌的靶向性治疗进行研究并寻找具有高效低毒的抗肺癌新药显得相当重要。有着悠久历史的中药蕴藏着我们未知治疗领域的巨大成药潜力,采用现代分子药理学的技术方法对中药单体的药效评价及作用机制的阐明,可为中药现代化发展提供新思路,故对莪术醇的抗癌作用的深入探讨及其作用靶标的充分阐明意义重大,本文通过以下方面对莪术醇的药效进行探究:第一节:研究莪术醇在体外对H460肺癌细胞生长的影响:（1）采用MTT法筛选莪术醇抑制H460肺癌细胞株生长的有效作用浓度和时间,并利用正常肺成纤维细胞株MRC-5作为衡量药物作用毒性的大小,结果发现,随着莪术醇浓度的增大与时间的延长,其抑制人肺癌H460细胞生长的作用越明显,IC50值分别为:248.2μmol/L（24 h）,165.3μmol/L（48 h）,105.3μmol/L（72 h）,并表现出对人正常肺纤维MRC-5细胞无明显毒性作用...
【文章来源】：广东药科大学广东省
【文章页数】：72 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
细胞凋亡相关部分信号通路Fig.1.Thepartofapoptosisrelatedsignalpathway.
A：H460 细胞的抑制率；B：MRC-5 细胞的抑制率图 1-1. 不同浓度的莪术醇作用不同时间对 H460 和 MRC-5 细胞生长抑制率的影响Fig.1-1. The cell inhibition effect of H460 and MRC-5 cells incubated with different concentrationof curcumol for different times.3.2 台盼蓝排染法检测莪术醇对细胞的增殖抑制作用结果通过显微镜下观察计数，实验结果如表 1-2 所示，空白对照组与 1.6%乙醇溶媒对照组在 24、48、72 h 时的细胞存活率均达 90%以上，说明 1.6%的乙醇对细胞的生长无明显的影响。经 GraphPad prism 5.0 软件模拟得到各时间点的 IC50值分别为：307.8 μmol/L（24 h），175.9 μmol/L（48 h），112.4 μmol/L（72 h），说明莪术醇对 H460 细胞的生长抑制作用呈明显的时间与浓度依赖性（p＜0.01）。表 1-2. 不同浓度的莪术醇作用不同时间对 H460 细胞存活率的影响(%, Mean±SD, n=3)Tab.1-2. The cell viability effect of H460 cells incubated with different concentration of curcumolfor different times(%, Mean±SD, n=3).
测缓冲液：裂解液=900 μL：100 μL）配制如表 3-1 中的浓度作为标准品，各取 100μL 到 96 孔细胞培养板中，用酶标仪于 405 nm 波长处测定 OD 值，并计算净 OD值：净 OD 值=OD各组样品-OD空白对照组，以各组净 OD 值为 Y 轴，ρNA 的浓度为 X 轴绘图并拟合标准曲线 y= 321.32x-0.2326，R2=0.9973，如图 3-1。表 3-1. Caspase3 分光光度计法标准曲线的绘制Tab.3-1. Drawing of the standard curve of Caspase3 spectrophotometer.组别 ρNA 浓度（μmol/L） 净 OD 值空白组 0 0C110 0.019C220 0.074C350 0.146C4100 0.325C5200 0.615
【参考文献】：
期刊论文
[1]EGFR基因变异对吉非替尼治疗非小细胞肺癌临床疗效的影响研究进展[J]. 王阳,朱江. 海南医学院学报. 2018(02)
[2]紫杉醇治疗子宫颈癌与子宫内膜癌的效果研究[J]. 刘永刚. 中国继续医学教育. 2017(14)
[3]溶剂及其体积分数对6种肺癌细胞的细胞毒作用[J]. 董芳蕊,臧诗蕾,黎莉莉,郭纪全,臧林泉. 中国药理学通报. 2017(04)
[4]PI3K/AKT/mTOR信号通路在诱导胶质瘤细胞凋亡中的作用[J]. 张春,李清漪,董海影,牛建国,牛英才,王峰. 中国新药杂志. 2016(16)
[5]虾青素通过阻断JAK1/STAT3通路抑制肺癌A549细胞增殖并促进其凋亡[J]. 吴春涛,张晋冀,刘铁楠,焦桂梅,李长仔,胡宝山. 细胞与分子免疫学杂志. 2016(06)
[6]淫羊藿素通过PI3K/AKT信号通路抑制非小细胞肺癌H460细胞增殖[J]. 马丁丁,陈艳,黄尤光,刘馨,金从国,王熙才. 现代肿瘤医学. 2016(14)
[7]分子靶向药特罗凯对晚期肺癌的抗肿瘤活性分析[J]. 邬红霞,矫艳艳,冒小燕. 实用癌症杂志. 2015(08)
[8]格列卫激活caspase-3诱导K562细胞凋亡[J]. 蒲俏虹,吴清清,金小宝,王伟章. 药学学报. 2014(08)
[9]肺癌的流行病学及治疗现状[J]. 姚晓军,刘伦旭. 现代肿瘤医学. 2014(08)
[10]抗肿瘤中药单体研究进展[J]. 秦峥,郑尚季. 中国药物评价. 2014(02)
硕士论文
[1]莪术醇通过ROS/JNK信号通路诱导肺癌细胞凋亡[D]. 董芳蕊.广东药科大学 2017
[2]新型抗肿瘤药物不良反应调查分析[D]. 王亚楠.山东大学 2014
本文编号：3343390
【文章来源】：广东药科大学广东省
【文章页数】：72 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
细胞凋亡相关部分信号通路Fig.1.Thepartofapoptosisrelatedsignalpathway.
A：H460 细胞的抑制率；B：MRC-5 细胞的抑制率图 1-1. 不同浓度的莪术醇作用不同时间对 H460 和 MRC-5 细胞生长抑制率的影响Fig.1-1. The cell inhibition effect of H460 and MRC-5 cells incubated with different concentrationof curcumol for different times.3.2 台盼蓝排染法检测莪术醇对细胞的增殖抑制作用结果通过显微镜下观察计数，实验结果如表 1-2 所示，空白对照组与 1.6%乙醇溶媒对照组在 24、48、72 h 时的细胞存活率均达 90%以上，说明 1.6%的乙醇对细胞的生长无明显的影响。经 GraphPad prism 5.0 软件模拟得到各时间点的 IC50值分别为：307.8 μmol/L（24 h），175.9 μmol/L（48 h），112.4 μmol/L（72 h），说明莪术醇对 H460 细胞的生长抑制作用呈明显的时间与浓度依赖性（p＜0.01）。表 1-2. 不同浓度的莪术醇作用不同时间对 H460 细胞存活率的影响(%, Mean±SD, n=3)Tab.1-2. The cell viability effect of H460 cells incubated with different concentration of curcumolfor different times(%, Mean±SD, n=3).
测缓冲液：裂解液=900 μL：100 μL）配制如表 3-1 中的浓度作为标准品，各取 100μL 到 96 孔细胞培养板中，用酶标仪于 405 nm 波长处测定 OD 值，并计算净 OD值：净 OD 值=OD各组样品-OD空白对照组，以各组净 OD 值为 Y 轴，ρNA 的浓度为 X 轴绘图并拟合标准曲线 y= 321.32x-0.2326，R2=0.9973，如图 3-1。表 3-1. Caspase3 分光光度计法标准曲线的绘制Tab.3-1. Drawing of the standard curve of Caspase3 spectrophotometer.组别 ρNA 浓度（μmol/L） 净 OD 值空白组 0 0C110 0.019C220 0.074C350 0.146C4100 0.325C5200 0.615
【参考文献】：
期刊论文
[1]EGFR基因变异对吉非替尼治疗非小细胞肺癌临床疗效的影响研究进展[J]. 王阳,朱江. 海南医学院学报. 2018(02)
[2]紫杉醇治疗子宫颈癌与子宫内膜癌的效果研究[J]. 刘永刚. 中国继续医学教育. 2017(14)
[3]溶剂及其体积分数对6种肺癌细胞的细胞毒作用[J]. 董芳蕊,臧诗蕾,黎莉莉,郭纪全,臧林泉. 中国药理学通报. 2017(04)
[4]PI3K/AKT/mTOR信号通路在诱导胶质瘤细胞凋亡中的作用[J]. 张春,李清漪,董海影,牛建国,牛英才,王峰. 中国新药杂志. 2016(16)
[5]虾青素通过阻断JAK1/STAT3通路抑制肺癌A549细胞增殖并促进其凋亡[J]. 吴春涛,张晋冀,刘铁楠,焦桂梅,李长仔,胡宝山. 细胞与分子免疫学杂志. 2016(06)
[6]淫羊藿素通过PI3K/AKT信号通路抑制非小细胞肺癌H460细胞增殖[J]. 马丁丁,陈艳,黄尤光,刘馨,金从国,王熙才. 现代肿瘤医学. 2016(14)
[7]分子靶向药特罗凯对晚期肺癌的抗肿瘤活性分析[J]. 邬红霞,矫艳艳,冒小燕. 实用癌症杂志. 2015(08)
[8]格列卫激活caspase-3诱导K562细胞凋亡[J]. 蒲俏虹,吴清清,金小宝,王伟章. 药学学报. 2014(08)
[9]肺癌的流行病学及治疗现状[J]. 姚晓军,刘伦旭. 现代肿瘤医学. 2014(08)
[10]抗肿瘤中药单体研究进展[J]. 秦峥,郑尚季. 中国药物评价. 2014(02)
硕士论文
[1]莪术醇通过ROS/JNK信号通路诱导肺癌细胞凋亡[D]. 董芳蕊.广东药科大学 2017
[2]新型抗肿瘤药物不良反应调查分析[D]. 王亚楠.山东大学 2014
本文编号：3343390
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