刺槐素磺酸化代谢处置的机制研究
发布时间：2021-08-29 21:25
一、背景与目的刺槐素是一种分布广泛的黄酮类物质,具有抗氧化,抗炎及抗房颤等药理作用,对乳腺癌,胃癌及前列腺癌等具有一定的治疗作用。然而,大多数黄酮可发生广泛的 UGT（UDP-glucuronosyltransferases）和 SULT（sulfotransferase）代谢,极大影响其体内生物利用度和药效作用。刺槐素在体外具有良好药效,但是尚未完全阐明的代谢处置机制严重制约其成药性,因此,深入的代谢机制研究,对黄酮类药物的药效机制和开发具有重要意义。本实验室已对刺槐素UGT代谢进行广泛地研究,而刺槐素SULT代谢的相关研究却鲜有报道。研究证实许多黄酮的结合物是外排蛋白的底物。大量证据表明药物代谢酶与外排蛋白对黄酮的体内处置具有协同作用。然而,刺槐素SULT代谢处置是否由SULT酶或者外排蛋白,还是两者共同参与仍不清楚。因此,阐明刺槐素SULT代谢处置过程将有助于认知其体内显效机制。因此,我们采用体内与体外模型联合的策略首次系统地研究刺槐素SULT代谢处置机制。首先建立一个灵敏可靠的UHPLC-MS/MS方法对刺槐素及其SULT代谢物同时定量。运用此方法,通过刺槐素SULT代谢体外孵...
【文章来源】：南方医科大学广东省
【文章页数】：104 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图３－２．刺槐素及其７位磺酸化代谢产物的髙分辨色谱图
??图３－３．紫外光谱法鉴定刺槐素７位磺酸化代谢产物。??Ｆｉｇｕｒｅ?３－３．?Ｔｈｅ?ＵＶ?ｓｐｅｃｔｒｕｍ?ｆｏｒ?Ａｃａ－７－Ｓ?ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ．??３．４．５人与小鼠肝脏Ｓ９对刺槐素磺酸化代谢的差异性考察??①
??图３￣６刺槐素在五种人源化ＳＵＬＩＳ?（１Ａ１，１Ｂ１，１Ｅ１，?２Ａ１和２Ｂ１消腾介导的嫌酸化代谢活??性考察？在磺酸化体系中，刺槐素的底物浓度分别为３，?６与２４?ｎＭ，在３７?°Ｃ条件下，孵??育２０到３０?ｍｉｎ。五种ＳＵＬＴ纯酶的浓度均为０．００２５?ｍｇ／ｍＬ，刺槐素磺酸化代谢产物通过??ＵＨＰＬＣ－ＭＳ／ＭＳ系统测量。以每毫克酶每分钟催化生成的代谢产物的量来表示磺酸化代谢??产物的生成速率。图中数据均来自平行三份实验测定值的均数。所有数据以均数±标准差表??示（ｎ＝３）。号代表数据组之间具有统计学差异（ｐ＜０．０５）。??Ｆｉｇｕｒｅ?３－６．?Ａｃｔｉｖｉｔｙ?ｏｆ?ａｃａｃｅｔｉｎ?ｓｕｌｆｏｎａｔｉｏｎ?ａｔ?３?ｎＭ，?６?ｎＭ?ａｎｄ?２４?ｎＭ?ｍｅｄｉａｔｅｄ?ｂｙ?ＳＵＬＴｓ??（１Ａ１，１Ｂ１，１Ｅ１，２Ａ１?ａｎｄ?２Ｂ１）．?Ｔｈｅ?ｓｕｌｆｏｎａｔｉｏｎ?ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ?ａｒｅ?ｃｏｎｄｕｃｔｅｄ?ａｔ?３７?°Ｃ?ｆｏｒ?２０?ｔｏ?３０??ｍｉｎ．?Ｔｈｅ?ｒｅａｃｔｉｏｎ?ｓｙｓｔｅｍ?ｃｏｎｓｉｓｔｅｓ?ｏｆ?ｅｎｚｙｍｅ，?ａｃａｃｅｔｉｎ，?ＫＰＩ，?ＰＡＰＳ?ａｎｄ?ＭｇＣ１２．?Ｔｈｅ??ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ?ｏｆ?ＳＵＬＴｓ?ｉｓ?０．０５?ｍ＾ｍＬ．?Ｔｈｅ?ａｍｏｕｎｔｓ?ｏｆ?Ａｃａ－７－Ｓ?ａｒｅ?ｍｅａｓｕｒｅｄ?ｕｓｉｎｇ??ＵＨＰＬＣ＇ＭＳ／ＭＳ?ｓｙｓｔｅｍ．?Ｔｈｅ?ｒｅａｃｔｉｏｎ?ｒａｔｅｓ?ａｒｅ?ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ?ａｓ?ｐｍｏｌｅ?ｐｅｒ?ｍｉｎｕｔｅ?ｐｅｒ?ｍｉｌｌｉｇｒａｍ．?Ｆｏｒ??ｔｈｉｓ?ｐａｎｅｌ
【参考文献】：
期刊论文
[1]刺槐素对乳腺癌T47D细胞增殖的影响[J]. 司玲玲,马俊,任欢欢,任博雪,李德芳,郑秋生. 中国药理学通报. 2017(02)
[2]刺槐素通过下调NF-κB/COX-2表达抑制卵巢癌细胞SKOV3增殖[J]. 周玉芝,洛若愚,邢辉. 辽宁中医药大学学报. 2016(07)
[3]刺槐素的生物活性研究进展[J]. 周媛媛,仲伯华,史卫国. 中国新药杂志. 2014(09)
[4]间接水解法测定含甲氧基黄酮UGT代谢物的摩尔消光系数转化因子[J]. 周琼,唐斓,叶玲,刘中秋,夏笔军. 中国药房. 2012(37)
[5]体外肝代谢模型的优缺点及其应用[J]. 李丹,韩永龙,余涛,孟祥乐,余奇,王军,郭澄. 中国临床药理学与治疗学. 2011(06)
[6]黄酮类化合物生理活性及合成研究进展[J]. 延玺,刘会青,邹永青,任占华. 有机化学. 2008(09)
[7]用清除超氧阴离子自由基法评价竹叶提取物抗氧化能力[J]. 郭雪峰,岳永德,汤锋,王进,姚曦. 光谱学与光谱分析. 2008(08)
[8]人尿苷二磷酸葡醛酸转移酶1A6重组酶对酚类和羧酸类化合物与葡醛酸结合的催化活性[J]. 郑水莲,陈枢青,李新,曾苏. 中国药理学与毒理学杂志. 2006(01)
[9]刺槐素的利尿作用[J]. 张寅恭. 国外医学参考资料.药学分册. 1974(05)
博士论文
[1]香青兰黄酮成分的药代动力学特征及代谢机理研究[D]. 李强.南方医科大学 2015
硕士论文
[1]刺槐素对金黄色葡萄球菌Sortase A的抑制作用与机制研究[D]. 毕重伟.吉林大学 2016
[2]UGT酶与外排转运蛋白在田蓟苷与刺槐素的肠道循环处置中的作用及机制[D]. 戴佩旻.南方医科大学 2015
本文编号：3371412
【文章来源】：南方医科大学广东省
【文章页数】：104 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图３－２．刺槐素及其７位磺酸化代谢产物的髙分辨色谱图
??图３－３．紫外光谱法鉴定刺槐素７位磺酸化代谢产物。??Ｆｉｇｕｒｅ?３－３．?Ｔｈｅ?ＵＶ?ｓｐｅｃｔｒｕｍ?ｆｏｒ?Ａｃａ－７－Ｓ?ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ．??３．４．５人与小鼠肝脏Ｓ９对刺槐素磺酸化代谢的差异性考察??①
??图３￣６刺槐素在五种人源化ＳＵＬＩＳ?（１Ａ１，１Ｂ１，１Ｅ１，?２Ａ１和２Ｂ１消腾介导的嫌酸化代谢活??性考察？在磺酸化体系中，刺槐素的底物浓度分别为３，?６与２４?ｎＭ，在３７?°Ｃ条件下，孵??育２０到３０?ｍｉｎ。五种ＳＵＬＴ纯酶的浓度均为０．００２５?ｍｇ／ｍＬ，刺槐素磺酸化代谢产物通过??ＵＨＰＬＣ－ＭＳ／ＭＳ系统测量。以每毫克酶每分钟催化生成的代谢产物的量来表示磺酸化代谢??产物的生成速率。图中数据均来自平行三份实验测定值的均数。所有数据以均数±标准差表??示（ｎ＝３）。号代表数据组之间具有统计学差异（ｐ＜０．０５）。??Ｆｉｇｕｒｅ?３－６．?Ａｃｔｉｖｉｔｙ?ｏｆ?ａｃａｃｅｔｉｎ?ｓｕｌｆｏｎａｔｉｏｎ?ａｔ?３?ｎＭ，?６?ｎＭ?ａｎｄ?２４?ｎＭ?ｍｅｄｉａｔｅｄ?ｂｙ?ＳＵＬＴｓ??（１Ａ１，１Ｂ１，１Ｅ１，２Ａ１?ａｎｄ?２Ｂ１）．?Ｔｈｅ?ｓｕｌｆｏｎａｔｉｏｎ?ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ?ａｒｅ?ｃｏｎｄｕｃｔｅｄ?ａｔ?３７?°Ｃ?ｆｏｒ?２０?ｔｏ?３０??ｍｉｎ．?Ｔｈｅ?ｒｅａｃｔｉｏｎ?ｓｙｓｔｅｍ?ｃｏｎｓｉｓｔｅｓ?ｏｆ?ｅｎｚｙｍｅ，?ａｃａｃｅｔｉｎ，?ＫＰＩ，?ＰＡＰＳ?ａｎｄ?ＭｇＣ１２．?Ｔｈｅ??ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ?ｏｆ?ＳＵＬＴｓ?ｉｓ?０．０５?ｍ＾ｍＬ．?Ｔｈｅ?ａｍｏｕｎｔｓ?ｏｆ?Ａｃａ－７－Ｓ?ａｒｅ?ｍｅａｓｕｒｅｄ?ｕｓｉｎｇ??ＵＨＰＬＣ＇ＭＳ／ＭＳ?ｓｙｓｔｅｍ．?Ｔｈｅ?ｒｅａｃｔｉｏｎ?ｒａｔｅｓ?ａｒｅ?ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ?ａｓ?ｐｍｏｌｅ?ｐｅｒ?ｍｉｎｕｔｅ?ｐｅｒ?ｍｉｌｌｉｇｒａｍ．?Ｆｏｒ??ｔｈｉｓ?ｐａｎｅｌ
【参考文献】：
期刊论文
[1]刺槐素对乳腺癌T47D细胞增殖的影响[J]. 司玲玲,马俊,任欢欢,任博雪,李德芳,郑秋生. 中国药理学通报. 2017(02)
[2]刺槐素通过下调NF-κB/COX-2表达抑制卵巢癌细胞SKOV3增殖[J]. 周玉芝,洛若愚,邢辉. 辽宁中医药大学学报. 2016(07)
[3]刺槐素的生物活性研究进展[J]. 周媛媛,仲伯华,史卫国. 中国新药杂志. 2014(09)
[4]间接水解法测定含甲氧基黄酮UGT代谢物的摩尔消光系数转化因子[J]. 周琼,唐斓,叶玲,刘中秋,夏笔军. 中国药房. 2012(37)
[5]体外肝代谢模型的优缺点及其应用[J]. 李丹,韩永龙,余涛,孟祥乐,余奇,王军,郭澄. 中国临床药理学与治疗学. 2011(06)
[6]黄酮类化合物生理活性及合成研究进展[J]. 延玺,刘会青,邹永青,任占华. 有机化学. 2008(09)
[7]用清除超氧阴离子自由基法评价竹叶提取物抗氧化能力[J]. 郭雪峰,岳永德,汤锋,王进,姚曦. 光谱学与光谱分析. 2008(08)
[8]人尿苷二磷酸葡醛酸转移酶1A6重组酶对酚类和羧酸类化合物与葡醛酸结合的催化活性[J]. 郑水莲,陈枢青,李新,曾苏. 中国药理学与毒理学杂志. 2006(01)
[9]刺槐素的利尿作用[J]. 张寅恭. 国外医学参考资料.药学分册. 1974(05)
博士论文
[1]香青兰黄酮成分的药代动力学特征及代谢机理研究[D]. 李强.南方医科大学 2015
硕士论文
[1]刺槐素对金黄色葡萄球菌Sortase A的抑制作用与机制研究[D]. 毕重伟.吉林大学 2016
[2]UGT酶与外排转运蛋白在田蓟苷与刺槐素的肠道循环处置中的作用及机制[D]. 戴佩旻.南方医科大学 2015
本文编号：3371412
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/zhongyaolw/3371412.html
