白藜芦醇对G-MDSCs数量和功能的影响及其在抗肿瘤免疫中的作用
发布时间：2021-09-04 19:04
目的:肿瘤发生发展过程中,粒细胞样髓源抑制性细胞（granulocytic myeloid-derived suppressor cells,G-MDSCs）大量扩增并抑制机体的抗肿瘤免疫应答。白藜芦醇（resveratrol,RES）是一种具有多种生物学活性的天然植物抗毒素,其可通过多种机制防治肿瘤,但对G-MDSCs的作用尚不明确。本论文体内利用小鼠Lewis肺癌细胞构建皮下移植瘤模型,探讨白藜芦醇能否通过抑制G-MDSCs的扩增来延缓肿瘤的生长;体外将白藜芦醇作用于荷瘤小鼠脾脏G-MDSCs,检测G-MDSCs凋亡及向肿瘤组织募集的情况,同时观察其免疫抑制功能的变化,并探讨STAT3信号通路在其中发挥的作用。方法:（1）用Lewis细胞皮下注射C57BL/6小鼠建立肺癌移植瘤模型,荷瘤小鼠随机分成两组,分别用PBS和白藜芦醇连续灌胃处理3周。测量小鼠皮下肿瘤体积和重量,实时监测肿瘤生长情况和小鼠生存率;采用流式细胞术（FCM）检测各组小鼠脾脏和肿瘤中总MDSCs、G-MDSCs、M-MDSCs、CD8+T细胞比率,以及小鼠引流淋巴结中CD8+T细胞比率。（2）体外通过免疫磁珠分选...
【文章来源】：江苏大学江苏省
【文章页数】：76 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
骨髓细胞在正常条件和肿瘤诱导条件下的分化过程
的稳定性和生物利用度。白藜芦醇的化学结构导致其在水中的溶解度较低，因而其吸收率也较低[58]。通过静脉注射进入体内的白藜芦醇在血浆中将会以与脂蛋白和清蛋白结合的方式进入细胞而发挥作用。通过口服进入动物和人体内的白藜芦醇，70%-80%在肠道通过被动扩散被吸收，后与硫酸盐和葡萄糖醛酸结合，30-60 分钟后反式白藜芦醇在循环系统中的水平将会达到峰值，但其很快在肝脏被代谢。研究证明，白藜芦醇在体内的生物利用度不高，其在肝脏和小肠的代谢产物仅有1%被利用[59]。白藜芦醇在体内主要代谢为白藜芦醇-3-O-硫酸酯/葡糖苷酸和白藜芦醇-4′-O-硫酸酯/葡糖苷酸等，这些代谢产物在血浆和尿液中的浓度约是天然白藜芦醇的 20倍[60]。另外，有学者发现来自红酒和葡萄果汁中的白藜芦醇，其生物利用度要明显高于来自药片或其他食品中的白藜芦醇[61]。由于白藜芦醇在体内的吸收和利用度都相对较低，因此未来要更多地着手于研究提高其吸收率和利用率的方法，以便更好地分析白藜芦醇在机体内的生物学作用。
细胞培养技术，细胞凋亡检测技术（Annexin-V/7-AAD），免疫磁珠分选（MACS），蛋白质免疫印迹技术（Western-blot），流式细胞技术（FCM），录 PCR，实时荧光定量 PCR，Transwell 细胞迁移实验，CFSE 细胞增殖检术，酶联免疫吸附测定技术（ELISA）。.3 实验设计方案1）体内实验：利用 Lewis 肺癌细胞系构建小鼠皮下移植瘤模型，在体内验证白藜芦醇是够通过调控 MDSCs 的扩增来影响肿瘤的发生发展。当肿瘤细胞皮下注射完，第二天即用相同体积的白藜芦醇和 PBS 分别灌胃处理两组模型鼠，连续 3 周。期间观察白藜芦醇对小鼠肿瘤生长进程的影响，检测肿瘤生长相关的变化、并记录各组小鼠的存活情况，同时进一步分析两组荷瘤小鼠体内各DSCs 和 CD8+T 细胞比率的差异（图 1.3）。
【参考文献】：
期刊论文
[1]洛伐他汀对谷氨酸诱导的兴奋性毒性损害的神经保护作用[J]. 马涛,陈耀民,赵永波. 实用临床医药杂志. 2008(09)
本文编号：3383836
【文章来源】：江苏大学江苏省
【文章页数】：76 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
骨髓细胞在正常条件和肿瘤诱导条件下的分化过程
的稳定性和生物利用度。白藜芦醇的化学结构导致其在水中的溶解度较低，因而其吸收率也较低[58]。通过静脉注射进入体内的白藜芦醇在血浆中将会以与脂蛋白和清蛋白结合的方式进入细胞而发挥作用。通过口服进入动物和人体内的白藜芦醇，70%-80%在肠道通过被动扩散被吸收，后与硫酸盐和葡萄糖醛酸结合，30-60 分钟后反式白藜芦醇在循环系统中的水平将会达到峰值，但其很快在肝脏被代谢。研究证明，白藜芦醇在体内的生物利用度不高，其在肝脏和小肠的代谢产物仅有1%被利用[59]。白藜芦醇在体内主要代谢为白藜芦醇-3-O-硫酸酯/葡糖苷酸和白藜芦醇-4′-O-硫酸酯/葡糖苷酸等，这些代谢产物在血浆和尿液中的浓度约是天然白藜芦醇的 20倍[60]。另外，有学者发现来自红酒和葡萄果汁中的白藜芦醇，其生物利用度要明显高于来自药片或其他食品中的白藜芦醇[61]。由于白藜芦醇在体内的吸收和利用度都相对较低，因此未来要更多地着手于研究提高其吸收率和利用率的方法，以便更好地分析白藜芦醇在机体内的生物学作用。
细胞培养技术，细胞凋亡检测技术（Annexin-V/7-AAD），免疫磁珠分选（MACS），蛋白质免疫印迹技术（Western-blot），流式细胞技术（FCM），录 PCR，实时荧光定量 PCR，Transwell 细胞迁移实验，CFSE 细胞增殖检术，酶联免疫吸附测定技术（ELISA）。.3 实验设计方案1）体内实验：利用 Lewis 肺癌细胞系构建小鼠皮下移植瘤模型，在体内验证白藜芦醇是够通过调控 MDSCs 的扩增来影响肿瘤的发生发展。当肿瘤细胞皮下注射完，第二天即用相同体积的白藜芦醇和 PBS 分别灌胃处理两组模型鼠，连续 3 周。期间观察白藜芦醇对小鼠肿瘤生长进程的影响，检测肿瘤生长相关的变化、并记录各组小鼠的存活情况，同时进一步分析两组荷瘤小鼠体内各DSCs 和 CD8+T 细胞比率的差异（图 1.3）。
【参考文献】：
期刊论文
[1]洛伐他汀对谷氨酸诱导的兴奋性毒性损害的神经保护作用[J]. 马涛,陈耀民,赵永波. 实用临床医药杂志. 2008(09)
本文编号：3383836
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