双白术内酯对Aβ 25-35 损伤神经细胞的保护及其与mPTP开放的研究

发布时间：2021-09-17 19:37

　　目的研究白术中双白术内酯对Aβ淀粉样蛋白(Aβ_25-35)神经损伤的大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞（PC12）及人骨髓神经母细胞瘤细胞系（SH-SY5Y）诱导其线粒体膜通透性转换孔（mPTP）的开放和细胞凋亡的的保护作用及其机制研究,并进一步提供基于药代动力学和药理学数据的系统网络药理学模型,以确定中药白术的有效化合物和潜在靶点,为白术对阿尔茨海默病具有神经保护作用提供理论基础。方法体外培养PC12和SH-SY5Y细胞,用20μMAβ_25-35处理细胞构建细胞损伤模型,对照组用不同浓度双白术内酯预处理2小时。实验组如下:（1）空白对照组,（2）Aβ_25-35损伤组,（3）药物对照组（低,中,高）。通过MTT法检测细胞增殖;用罗丹明123染色检测线粒体膜电位;ROS试剂盒检测细胞内ROS;蛋白质印迹分析检测线粒体相关蛋白CypD和CytC的变化。网络药理学能构建生物网络并分析网络中成分、靶点和疾病之间的联系。我们通过使用Cytoscape 3.2.1软件构建了以下网络图:（1）C-T（成分-靶点图）,在TCMSP和SWISS数据... 

【文章来源】：湖南师范大学湖南省 211工程院校

【文章页数】：84 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
Abstract
摘要
Chapter1.Introduction
Chapter2.Experimental Materials
    2.1 Experimental cell
    2.2 Main Experimental instruments
    2.3 Main reagents and Kits
    2.4 Main reagent preparation
        2.4.1.Incubation of Aβ25-
        2.4.2.Preparation of BD
        2.4.3.Preparation of Rhodamine123 stain
        2.4.4.Western-blot main reagent preparation
            2.4.4.1 10%SDS
            2.4.4.2 10%Ammonium persulfate(APS)
            2.4.4.3 TBS-T buffer
            2.4.4.4 5%BSA(blocking solution)
            2.4.4.5 1×transfer buffer
            2.4.4.6 1×running buffer
        2.4.5.0.25%Trypsin working solution
        2.4.6.Cell Cryopreservation solution
        2.4.7.Preparation of MTT
Chapter3.Methods
    3.1 Network pharmacology
        3.1.1 Data set construction
        3.1.2 Active compound screening
        3.1.3 Network construction
        3.1.4 Pathway analysis
    3.2 Experimental Investigation
        3.2.1 Materials and Methods
        3.2.2 Cell culture
        3.2.3 Experimental grouping and drug treatment
        3.2.4 Cell viability assay(MTT assay)
        3.2.5 Detection of MMP by rhodamine123 staining
        3.2.6 Measurement of intracellular ROS
        3.2.7 Western blot analysis(CYPD,Cyt C)
    3.3 Statistical analysis
Chapter4.Results
    4.1 Experimental Results
        4.1.1 MTT assay
        4.1.2 Detection of MMP by rhodamine123 staining
        4.1.3 Measurement of intracellular ROS
        4.1.4 Protein characterization
    4.2 Networks Results
        4.2.1 Active compound screening
        4.2.2 Network construction and analysis:
            4.2.2.1 C-T network
            4.2.2.2 T-D network
            4.2.2.3 Target-pathway(T-P)network
Chapter5.Discussion
Chapter6.Conclusion
Table-1
Table-2
References
Review article
    References
Published papers
Acknowledgement


【参考文献】：
期刊论文
[1]网络药理学研究相关技术与应用[J]. 彭晓飞,王丽,边育红.  天津中医药大学学报. 2015(02)
[2]中药群体药代动力学专家共识(征求意见稿)[J]. 谢雁鸣,王建农,贺福元,姜俊杰,熊昕.  中国中药杂志. 2013(18)
[3]降香化学成分、药理作用及药代特征的研究进展[J]. 杨志宏,梅超,何雪辉,孙晓波.  中国中药杂志. 2013(11)
[4]白术的化学成分研究[J]. 李伟,文红梅,崔小兵,张发成,董洁.  中草药. 2007(10)



本文编号：3399369