异水飞蓟宾活化NRF2/ARE信号缓解Aβ 25-35 诱导的HT-22细胞氧化应激损伤
发布时间：2021-09-17 21:39
目的:以小鼠海马细胞系HT-22为研究对象,在Aβ25-35诱导下,体外观察异水飞蓟宾对NRF2/ARE信号通路的影响。方法:使用MTT法检测异水飞蓟宾对HT-22细胞时间剂量毒性以及Aβ25-35对HT-22细胞时间剂量毒性。在无毒性剂量范围内,MTT法检测异水飞蓟宾缓解Aβ25-35的有效剂量范围和最佳作用时间。检测在异水飞蓟宾对Aβ25-35诱导的MDA,LDH细胞损伤指标的影响。检测在异水飞蓟宾对Aβ25-35诱导的T-AOC细胞抗氧化指标的影响。检测在异水飞蓟宾对Aβ25-35诱导的HT-22细胞内源性ROS水平的影响,并应用ROS特异性抑制剂NAC验证ROS同细胞氧化损伤之间的关系。Western blotting检测异水飞蓟宾及Aβ25-35对HT-22细胞的HO-1,AKR1C2,GST蛋白表达的影响,qPCR检测异水飞蓟宾及Aβ25-35对HT-22细胞的HO-1,AKR1C2,GST mRNA表达的影响。构建ARE荧光素酶报告质粒pG3L-ARE,将其转染到HT-22细胞中,检测异水飞蓟宾或NRF2特异性激动剂t-BHQ对pG3L-ARE报告基因表达活性荧光强度的影...
【文章来源】：皖南医学院安徽省
【文章页数】：55 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
水飞蓟素中主要的活性成分的化学分结构
皖南医学院硕士学位论文结 果水飞蓟宾缓解 Aβ25-35诱导的 HT-22 细胞活力值下降为了验证异水飞蓟宾对 HT-22 细胞的是否有毒性，使用一系列不同浓度的异水飞蓟宾.1,0.5,1,2,4,8,10,20,50 μM)孵育 HT-22 细胞 24 h，MTT 法检测不同浓度的异水飞蓟宾对-22 细胞活力值的影响，实验结果如图 2.1 所示，当异水飞蓟宾浓度大于 20 μM时会对 H2产生细胞毒性。
HT-22 细胞活力值的影响，实验结果如图 2.1 所示，当异水飞蓟宾浓度大于 20 μM时会对 HT-22产生细胞毒性。图 2.1 不同浓度异水飞蓟宾对 HT-22 细胞活力的影响(*p<0.05, **p<0.01)为了验证异水飞蓟宾毒性产生的时间，使用的 10 μM 异水飞蓟宾分别孵育 HT-22 细胞0,6,12,24,36,48,60,72 h，MTT 法检测不同浓度的异水飞蓟宾对 HT-22 细胞活力值的影响，实验结果如图 2.2 所示，10 μM 的异水飞蓟宾孵育 72 h 内对 HT-22 细胞都没有产生细胞毒性。因此异水飞蓟宾的安全剂量浓度为 10 μM。
【参考文献】：
期刊论文
[1]淀粉样β蛋白沉淀及其神经毒性与阿尔茨海默病[J]. 许志强,周华东,蒋晓江. 中国临床康复. 2006(14)
本文编号：3399542
【文章来源】：皖南医学院安徽省
【文章页数】：55 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
水飞蓟素中主要的活性成分的化学分结构
皖南医学院硕士学位论文结 果水飞蓟宾缓解 Aβ25-35诱导的 HT-22 细胞活力值下降为了验证异水飞蓟宾对 HT-22 细胞的是否有毒性，使用一系列不同浓度的异水飞蓟宾.1,0.5,1,2,4,8,10,20,50 μM)孵育 HT-22 细胞 24 h，MTT 法检测不同浓度的异水飞蓟宾对-22 细胞活力值的影响，实验结果如图 2.1 所示，当异水飞蓟宾浓度大于 20 μM时会对 H2产生细胞毒性。
HT-22 细胞活力值的影响，实验结果如图 2.1 所示，当异水飞蓟宾浓度大于 20 μM时会对 HT-22产生细胞毒性。图 2.1 不同浓度异水飞蓟宾对 HT-22 细胞活力的影响(*p<0.05, **p<0.01)为了验证异水飞蓟宾毒性产生的时间，使用的 10 μM 异水飞蓟宾分别孵育 HT-22 细胞0,6,12,24,36,48,60,72 h，MTT 法检测不同浓度的异水飞蓟宾对 HT-22 细胞活力值的影响，实验结果如图 2.2 所示，10 μM 的异水飞蓟宾孵育 72 h 内对 HT-22 细胞都没有产生细胞毒性。因此异水飞蓟宾的安全剂量浓度为 10 μM。
【参考文献】：
期刊论文
[1]淀粉样β蛋白沉淀及其神经毒性与阿尔茨海默病[J]. 许志强,周华东,蒋晓江. 中国临床康复. 2006(14)
本文编号：3399542
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