基于BMP2/Smad1/Runx2/Osterix通路探讨健骨颗粒氯仿萃取部位对体外成骨细胞分化的影响

发布时间：2021-10-02 04:13

　　目的:探讨健骨颗粒氯仿萃取部位通过BMP2/Smad1/Runx2/Osterix信号通路,对体外成骨细胞分化的影响。方法:1.药物的制备运用氯仿对健骨颗粒原方进行萃取,获得氯仿萃取溶液,经蒸发、干燥最终形成固体,得到健骨颗粒氯仿萃取部位。将充分干燥后的中药固体,用DMSO配置成30mg/ml的母液,分装后-20℃冻存备用。2.细胞干预与指标检测从BALB/c小鼠的乳鼠颅盖骨提取原代成骨细胞,取第三代细胞作为实验对象,设置健骨颗粒氯仿萃取部位不同药物浓度组（即0、2ng/ml、4ng/ml、8ng/ml、16ng/ml、32ng/ml、64ng/ml药物浓度组）,MTT实验检测各组细胞的增殖速度,选择药物的最佳干预浓度,作为后续实验的药物浓度。取第三代细胞,设空白对照组（加入含10%胎牛血清的完全培养基）、抑制剂组（加入含BMP抑制剂Noggin150ng/ml的完全培养基）、药物组（加入含健骨颗粒氯仿萃取部位最佳干预浓度的完全培养基）、抑制剂加药物组（加入含相应浓度Noggin与健骨颗粒氯仿萃取部位的完全培养基）,分别进行相关干预;实时荧光定量 PCR（Quantitative Re... 

【文章来源】：福建中医药大学福建省

【文章页数】：62 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
中英文缩略词
中文摘要
ABSTRACT
引言
材料和方法
    1. 实验材料
        1.1 实验动物
        1.2 实验药物
        1.3 主要实验试剂
        1.4 主要实验仪器
        1.5 主要实验试剂的配制
    2. 实验方法
        2.1 健骨颗粒氯仿萃取部位的制备
        2.2 成骨细胞的分离
        2.3 成骨细胞的培养及传代
        2.4 药物干预与指标检测
    3. 统计学处理
实验结果
    1. 成骨细胞分离与培养情况
    2. 成骨细胞碱性磷酸酶染色结果
    3. 最佳给药浓度的选择
    4. 相关指标MRNA表达检测结果
    5. 相关指标蛋白表达检测结果
讨论
    1. 组织块法联合酶消化法,可提高提取原代成骨细胞的数量
    2. 补肾健脾法治疗绝经后骨质疏松症中医理论基础
    3. 健骨颗粒氯仿萃取部位对体外成骨细胞分化与BMP2/SMAD1/RUNX2/OSTERIX通路的影响
结论
参考文献
文献综述
    参考文献
致谢
作者简历


【参考文献】：
期刊论文
[1]补肾中药调控BMP-Smad信号通路促进牵张成骨的研究进展[J]. 余翔,姜自伟,郑晓辉,蔡群斌,李悦,黄枫,李康活,金志超,欧阳崇志,孙世栋,黄泽青,吕迪,莫颖杰.  辽宁中医杂志. 2017(09)
[2]雌激素影响绝经后骨质疏松分子机制研究进展[J]. 孙伟明,刘爽.  中国老年学杂志. 2017(02)
[3]Noggin基因沉默对BMP和Wnt信号通路表达的影响[J]. 马雨楠,游颖,沈欢欢,孙兆增,曾林,法云智.  中国实验动物学报. 2016(05)
[4]天然药物化学史话:青蒿素——中药研究的丰碑[J]. 张铁军,王于方,刘丹,李力更,郭瑞霞,史清文,董燕平.  中草药. 2016(19)
[5]当归挥发油对高血脂模型大鼠的降血脂作用及血管内皮保护作用[J]. 吴国泰,刘五州,杜丽东,妥海燕,任远,郭玫.  中国动脉硬化杂志. 2016(10)
[6]2型糖尿病肾病大鼠肾动脉上BMP2/Smad1/Runx2/Osterix信号通路的激活[J]. 覃春美,龚财判,魏晓,吴蔚桦,刘建,欧三桃.  中国动脉硬化杂志. 2016(10)
[7]中医治疗绝经后骨质疏松症研究进展[J]. 彭娟娟,王冰,王旭东.  河南中医. 2016(05)
[8]血管钙化大鼠肾动脉BMP2/Smad1/Runx2信号通路的表达[J]. 覃春美,魏晓,龚财判,吴蔚桦,刘建,樊均明,欧三桃.  四川大学学报(医学版). 2016(02)
[9]雌激素缺乏性骨质疏松症的骨代谢研究进展[J]. 王迎彬,黄秀峰,王金花.  右江民族医学院学报. 2016(01)
[10]当归挥发油对小鼠急性心肌缺血损伤的保护作用[J]. 罗慧英,黄亚红.  中国现代应用药学. 2016(02)

博士论文
[1]BMP-Smad信号通路的调节及其在成骨分化中的作用[D]. 李丽莉.山东大学 2013
[2]淫羊藿苷对成骨细胞增殖分化的影响及机制探讨[D]. 高毅.河北医科大学 2013

硕士论文
[1]丹参酮包合物制备及体外抑菌活性研究[D]. 强喆.甘肃农业大学 2013
[2]健骨颗粒含药血清对大鼠成骨细胞增殖周期的影响及其机理研究[D]. 袁俊.福建中医学院 2007



本文编号：3417984