转化生长因子β相关激酶1抑制剂对人肝癌细胞系HepG2脂滴积累的影响及其机制
发布时间:2021-10-11 20:59
目的观察转化生长因子β相关激酶1(TAK1)抑制剂(NG25)对人肝癌细胞系HepG2脂滴积累的影响,并探讨其作用机制。方法取HepG2细胞并分为两组,处理组细胞加入2μmol/L NG25处理24 h,对照组加入等体积DMSO处理24 h,两组均同时用终浓度为250μmol/L脂肪酸(OA、PA各125μmol/L)共同孵育,采用油红O染色观察细胞脂滴积累情况(油红O染色红光强度),荧光定量PCR法和蛋白免疫印迹法检测细胞过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)、诱导细胞凋亡DNA分裂因子样效应因子C(CIDEC)mRNA、蛋白相对表达量,双荧光素酶报告基因检测系统检测细胞荧光素酶活性。另取HepG2细胞并分为3组,恢复组细胞预先转染1μg质粒PPARγ后再加入2μmol/L NG25处理24 h,处理组细胞加入2μmol/L NG25处理24 h,对照组细胞加入等体积DMSO处理24 h,3组同时用终浓度250μmol/L脂肪酸(OA、PA各125μmol/L)共同孵育,荧光定量PCR法和蛋白免疫印迹法检测细胞CIDEC mRNA、蛋白。结果与对照组比较,处理组油红O染色红光强度...
【文章来源】:山东医药. 2020,60(24)
【文章页数】:5 页
【文章目录】:
1 材料与方法
1.1 细胞及主要试剂
1.2 NG25处理的HepG2细胞油红O染色红光强度观察
1.3 NG25处理的HepG2细胞PPARγ mRNA、蛋白及PPARγ启动子转录活性检测
1.4 NG25处理的HepG2细胞CIDEC mRNA、蛋白检测
1.5 超表达PPARγ的HepG2细胞CIDEC mRNA、蛋白检测
1.6 统计学方法
2 结果
2.1 处理组和对照组油红O染色红光强度比较
2.2 处理组和对照组PPARγ mRNA、蛋白相对表达量及PPARγ启动子荧光素酶活性比较
2.3 处理组和对照组CIDEC mRNA、蛋白相对表达量比较
2.4 恢复组、处理组、对照组CIDEC mRNA和蛋白相对表达量比较
3 讨论
本文编号:3431229
【文章来源】:山东医药. 2020,60(24)
【文章页数】:5 页
【文章目录】:
1 材料与方法
1.1 细胞及主要试剂
1.2 NG25处理的HepG2细胞油红O染色红光强度观察
1.3 NG25处理的HepG2细胞PPARγ mRNA、蛋白及PPARγ启动子转录活性检测
1.4 NG25处理的HepG2细胞CIDEC mRNA、蛋白检测
1.5 超表达PPARγ的HepG2细胞CIDEC mRNA、蛋白检测
1.6 统计学方法
2 结果
2.1 处理组和对照组油红O染色红光强度比较
2.2 处理组和对照组PPARγ mRNA、蛋白相对表达量及PPARγ启动子荧光素酶活性比较
2.3 处理组和对照组CIDEC mRNA、蛋白相对表达量比较
2.4 恢复组、处理组、对照组CIDEC mRNA和蛋白相对表达量比较
3 讨论
本文编号:3431229
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