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中药复方洁泽1号体外抗HSV-2部分作用机制的研究

发布时间:2021-10-13 04:42
  第一部分HSV-2感染VK2/E6E7细胞模型稳定性相关参数的完善【目的】前期课题组已构建相对稳定的体外HSV-2病毒感染VK2/E6E7细胞模型,但在后期实验中,发现此模型尚有不足之处,为了实验的顺利进行,故对该模型相关参数进行进一步的完善。【方法】由Vero细胞扩增HSV-2,利用半数致组织或细胞病变(TCID50)方法测定收获的HSV-2的毒力,平均每周测定一次,连续测定9周(HSV-2于4℃冰箱中保存)。将收获的于Vero细胞上扩增的HSV-2在Vero细胞上再次扩增,且进行病毒浓缩;观察Vero细胞的病变效应(CPE),选择合理时机收获;将收获的HSV-2稀释5倍、10倍、20倍,与96孔板中的VK2/E6E7细胞共孵育24h,以MTT方法测定VK2/E6E7细胞的存活率,评估HSV-2的毒力。选取状态较好的VK2/E6E7细胞,即细胞呈梭形,如铺路石样且胞质丰富、细胞体积大、细胞膜、细胞核轮廓清晰,进行培养,将HSV-2原液稀释10倍加入已接种此状态的VK... 

【文章来源】:华中科技大学湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】:80 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

中药复方洁泽1号体外抗HSV-2部分作用机制的研究


HSV-2在4℃保存的毒力衰减曲线

衰减曲线,倒置显微镜,4℃保存,毒力


图 1 HSV-2 在 4℃保存的毒力衰减曲线注:此图纵坐标(Y 值)以 lgTCID50 表示,即 TCID50 的 10 的根数。由图 1 可推断,在第 0 周—第 4 周,TCID50 逐渐降低;在第 4 周—第 7w,出现平台期;第 7 周—第 9 周,又大概以先前的速率下降。2.采用浓缩方法扩增在 Vero 细胞上扩增 HSV-22.1 HSV-2 感染 Vero 细胞的形态学

毒力测定,细胞形态学,存活率,细胞


图 3 浓缩方法收获的 HSV-2 毒力测定**:与正常组相比有统计学差异,P〈0.001.可知,HSV-2 稀释 5 倍、10 倍、20 倍组与正常组(C)相比,异,P〈0.001,其存活率分别为:稀释 5 倍组:43.5% 1.4% 1.1%;稀释 20 倍组:48.2% 1.8%。V-2 在不同状态 VK2/E6E7 细胞复壮2/E6E7 细胞形态学观察

【参考文献】:
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本文编号:3433971

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