瑞香素对油酸诱导的HepG2细胞脂代谢、胰岛素敏感性与氧化应激的影响
发布时间：2021-11-11 16:57
研究目的非酒精性脂肪肝（non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD）是指非酒精和其他明确因素所致的代谢综合征,弥漫性肝细胞中大泡性的脂肪病变是NAFLD的主要病理特征,有单纯性脂肪肝、非酒精性脂肪肝炎（non-alcoholic steatohepatitis,NASH）和肝硬化三个阶段。非酒精性脂肪肝的发病机制目前尚不清楚,比较被认可的发病机制是“二次打击”学说。瑞香素（Daphnetin,DAP）是从瑞香属（DaphneLinn）植物长白瑞香中提取出来的有效成分,具有良好的抗氧化、抗炎活性。目前尚未见瑞香素对非酒精脂肪肝影响的文献报道。本文以油酸处理的HepG2细胞作为非酒精性脂肪肝炎体外研究模型,从脂代谢、胰岛素敏感性和氧化应激三方面,研究了瑞香素对NASH的预防和治疗作用及其机制。实验方法HepG2细胞经0.5 mM油酸（oleic acid,OA）处理24h作为体外研究NASH的细胞模型,DAP给药方式分为预防模式与治疗模式两类。在预防模式时,HepG2细胞用OA和DAP（5、20、50μM）同时处理24h;在治疗模式时,HepG2细胞先用...
【文章来源】：湖北大学湖北省
【文章页数】：51 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图３－１瑞香素对ＮＡＳＨ模型细胞存活率的影响??
本实验主要研宄不同浓度的瑞香素对非酒精性脂肪肝的预防和治疗作用，ＨｅｐＧ２细??胞作为非酒精性脂肪肝炎的体外模型细胞，首先检测不同浓度５ｐＭ、２０ｐＭ、５０＾Ｍ和??ＩＯＯｈＭ的瑞香素对油酸诱导的ＨｅｐＧ２细胞的存活率是否有影响，处理２４ｈ。如图３－１所??示，在浓度范围为如Ｍ－５０ｐＭ时，瑞香素对ＨｅｐＧ２细胞的存活能力没有明显的影响，??但ｌＯＯ＾Ｍ的瑞香素对ＨｅｐＧ２细胞有轻微的增殖效果。根据该ＭＴＴ结果，瑞香素给药??低、中、高剂量确定为扣Ｍ、２〇ｎＭ和５０ｐＭ。??１?ｍｉｌｌ??＿＿＿＿＿＿??ＤＵＳＯ?Ｃｏｎｔｒｏｌ?Ｓ＾ｉＭ?２〇ｍ？?ＳＧ＾ｉＭ?１００ｐＭ??Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ?ｏｆ?ＤＡＰ??图３－１瑞香素对ＮＡＳＨ模型细胞存活率的影响??３．２瑞香素体外抗ＮＡＳＨ预防作用研究??３．２．１瑞香素对模型细胞脂堆积的影响??１２０－１??＃＃??１００．?ｐ—；—??Ｗ－?＊??為?￣￣■—１?＊＊??〇?６０?＊?—］■—?＊＊??■??４０?？??２０．??■?１?ｍ?Ｍ?１，１１，１?１?，??ＯＡ｛０．５?ｍＭ）?＊?＋?＋?＋?＋??ＤＡＰ（ｍＭ）?‘?？?５?２０?５０??图３－２预防模式下瑞香素对ＮＡＳＨ模型细胞脂堆积的影响??２
?本实验为了研究瑞香素对ＮＡＳＨ模型细胞脂堆积是否有影响，我们检测了模型细胞??内甘油三酯（ＴＧ）的含量，结果如图３－２所示，图中的纵坐标表示相较于０Ａ模型组细??胞内ＴＧ含量的百分比。浓度为５、２０和５０［ｉＭ的瑞香素和油酸同时处理细胞２４ｈ。从??图中可以看出，给予ＯＡ处理后，细胞内ＴＧ含量极显著升高（＃＃ｐ＜０．０１），同时处理ＤＡＰ??和ＯＡ后，细胞内的ＴＧ含量呈浓度依赖性的降低（＞＜０．０５，?＋＞＜０．０１），其中在瑞香素??的浓度到５〇ｔｉＭ时，胞内ＴＧ的含量与模型组有极显著性差异的降低，该结果表示瑞香??素可以降低预防模式下ＮＡＳＨ模型细胞脂堆积情况。??在生化指标的检测中，已经发现细胞中ＴＧ含量在给药处理后有所下降，为了探索??瑞香素减少脂堆积的机制，我们检测了瑞香素处理后的细胞中脂代谢相关基因的ｍＲＮＡ??（图３－３）和蛋白（图３－４）的表达。??Ａ?Ｂ?ｃａ？？：?Ｃ??＃?＊?．?？＊＇?？?？?ｒｎ??ｉｕ－ｎ?！？■?■?ｎ?－卜：厂１?ｎ?＇?ｉ??ｎ?ｎ?ｎ?ｉ：：?ｍ?）??！匕?Ｉ??’＊?Ｍ，??…?ｎ?，＇．?－?ｉ??丨
【参考文献】：
期刊论文
[1]PI3K/Akt信号通路在胰岛素抵抗中作用的研究进展[J]. 王帅,金磊,海春旭,李文丽. 毒理学杂志. 2015(04)
[2]非酒精性脂肪肝发病机制——“二次打击”学说研究进展[J]. 董姝,刘平,孙明瑜. 临床肝胆病杂志. 2012(07)
[3]非酒精性脂肪肝的治疗策略[J]. 王静艳,刘洪波,丁洋,窦晓光. 医学与哲学(临床决策论坛版). 2007(01)
[4]瑞香素的抗疟作用及其高效液相色谱分析方法[J]. 王琴美,刘云光,陶奕,王鸣杰,倪奕昌. 中国药物与临床. 2004(01)
[5]非酒精性脂肪性肝病的治疗现状[J]. 王雁翔,王灵台. 中西医结合肝病杂志. 2003(05)
[6]瑞香素体外抗疟作用与其铁螯合能力的关系(英文)[J]. 牟凌云,王琴美,倪奕昌. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志. 2002(02)
[7]瑞香素对家兔实验性急性心肌缺血的保护作用及心血管系统的影响(摘要)[J]. 曲淑岩. 中医杂志. 1980(06)
本文编号：3489189
【文章来源】：湖北大学湖北省
【文章页数】：51 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图３－１瑞香素对ＮＡＳＨ模型细胞存活率的影响??
本实验主要研宄不同浓度的瑞香素对非酒精性脂肪肝的预防和治疗作用，ＨｅｐＧ２细??胞作为非酒精性脂肪肝炎的体外模型细胞，首先检测不同浓度５ｐＭ、２０ｐＭ、５０＾Ｍ和??ＩＯＯｈＭ的瑞香素对油酸诱导的ＨｅｐＧ２细胞的存活率是否有影响，处理２４ｈ。如图３－１所??示，在浓度范围为如Ｍ－５０ｐＭ时，瑞香素对ＨｅｐＧ２细胞的存活能力没有明显的影响，??但ｌＯＯ＾Ｍ的瑞香素对ＨｅｐＧ２细胞有轻微的增殖效果。根据该ＭＴＴ结果，瑞香素给药??低、中、高剂量确定为扣Ｍ、２〇ｎＭ和５０ｐＭ。??１?ｍｉｌｌ??＿＿＿＿＿＿??ＤＵＳＯ?Ｃｏｎｔｒｏｌ?Ｓ＾ｉＭ?２〇ｍ？?ＳＧ＾ｉＭ?１００ｐＭ??Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ?ｏｆ?ＤＡＰ??图３－１瑞香素对ＮＡＳＨ模型细胞存活率的影响??３．２瑞香素体外抗ＮＡＳＨ预防作用研究??３．２．１瑞香素对模型细胞脂堆积的影响??１２０－１??＃＃??１００．?ｐ—；—??Ｗ－?＊??為?￣￣■—１?＊＊??〇?６０?＊?—］■—?＊＊??■??４０?？??２０．??■?１?ｍ?Ｍ?１，１１，１?１?，??ＯＡ｛０．５?ｍＭ）?＊?＋?＋?＋?＋??ＤＡＰ（ｍＭ）?‘?？?５?２０?５０??图３－２预防模式下瑞香素对ＮＡＳＨ模型细胞脂堆积的影响??２
?本实验为了研究瑞香素对ＮＡＳＨ模型细胞脂堆积是否有影响，我们检测了模型细胞??内甘油三酯（ＴＧ）的含量，结果如图３－２所示，图中的纵坐标表示相较于０Ａ模型组细??胞内ＴＧ含量的百分比。浓度为５、２０和５０［ｉＭ的瑞香素和油酸同时处理细胞２４ｈ。从??图中可以看出，给予ＯＡ处理后，细胞内ＴＧ含量极显著升高（＃＃ｐ＜０．０１），同时处理ＤＡＰ??和ＯＡ后，细胞内的ＴＧ含量呈浓度依赖性的降低（＞＜０．０５，?＋＞＜０．０１），其中在瑞香素??的浓度到５〇ｔｉＭ时，胞内ＴＧ的含量与模型组有极显著性差异的降低，该结果表示瑞香??素可以降低预防模式下ＮＡＳＨ模型细胞脂堆积情况。??在生化指标的检测中，已经发现细胞中ＴＧ含量在给药处理后有所下降，为了探索??瑞香素减少脂堆积的机制，我们检测了瑞香素处理后的细胞中脂代谢相关基因的ｍＲＮＡ??（图３－３）和蛋白（图３－４）的表达。??Ａ?Ｂ?ｃａ？？：?Ｃ??＃?＊?．?？＊＇?？?？?ｒｎ??ｉｕ－ｎ?！？■?■?ｎ?－卜：厂１?ｎ?＇?ｉ??ｎ?ｎ?ｎ?ｉ：：?ｍ?）??！匕?Ｉ??’＊?Ｍ，??…?ｎ?，＇．?－?ｉ??丨
【参考文献】：
期刊论文
[1]PI3K/Akt信号通路在胰岛素抵抗中作用的研究进展[J]. 王帅,金磊,海春旭,李文丽. 毒理学杂志. 2015(04)
[2]非酒精性脂肪肝发病机制——“二次打击”学说研究进展[J]. 董姝,刘平,孙明瑜. 临床肝胆病杂志. 2012(07)
[3]非酒精性脂肪肝的治疗策略[J]. 王静艳,刘洪波,丁洋,窦晓光. 医学与哲学(临床决策论坛版). 2007(01)
[4]瑞香素的抗疟作用及其高效液相色谱分析方法[J]. 王琴美,刘云光,陶奕,王鸣杰,倪奕昌. 中国药物与临床. 2004(01)
[5]非酒精性脂肪性肝病的治疗现状[J]. 王雁翔,王灵台. 中西医结合肝病杂志. 2003(05)
[6]瑞香素体外抗疟作用与其铁螯合能力的关系(英文)[J]. 牟凌云,王琴美,倪奕昌. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志. 2002(02)
[7]瑞香素对家兔实验性急性心肌缺血的保护作用及心血管系统的影响(摘要)[J]. 曲淑岩. 中医杂志. 1980(06)
本文编号：3489189
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