姜黄素对人瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖及周期的影响研究
发布时间：2021-12-30 10:09
目的通过姜黄素（Curcumin）对体外培养的人瘢痕疙瘩成纤维细胞（Human keloid fibroblasts,HKF）的异常增殖、细胞凋亡及各周期的影响,初步分析其可能的作用机制。方法（1）体外培养人瘢痕疙瘩成纤维细胞,选取同一代生长状态良好处于对数生长期的人瘢痕疙瘩成纤维细胞,经不同浓度（0、5、10、20μmol/1）的姜黄素处理后,以MTT法检测其增殖抑制情况。（2）通过流式细胞术（Flow cytometry,FCM）检测经姜黄素处理的人瘢痕疙瘩成纤维细胞,随着药物浓度的增加各细胞周期的分布情况及凋亡情况。（3）通过免疫印迹法（Western blot）检测将人瘢痕疙瘩成纤维细胞经不同浓度姜黄素处理后,人瘢痕疙瘩成纤维细胞p27的表达情况。结果（1）人瘢痕疙瘩成纤维细胞经不同浓度姜黄素处理后,MTT结果显示,姜黄素对人瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖有抑制作用（P<0.01）,且其细胞增殖抑制率与姜黄素浓度呈正相关。（2）流式细胞术检测凋亡结果显示,人瘢痕疙瘩成纤维细胞总凋亡率随着姜黄素浓度的增加而增加（P<0.01）,且呈浓度依赖性。流式细胞术检测细胞周期结果显示,...
【文章来源】：延边大学吉林省 211工程院校
【文章页数】：44 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１姜黄素对ＨＫＦ的增值抑制作用??表１?ＭＴＴ細賴舖对人瘩藤维细胞（ＨＫＦ?）的作用（ｎ?＝?６?，?Ｘ±Ｓ?）??
增殖抑制实验中看到姜黄素可有效抑制人瘢痕疙瘩成纤维细胞的增殖，??但是关于其是否能有效诱导人瘢痕疙瘩成纤维细胞凋亡，我们后期采用??了流式细胞术（ＡｎｎｅｘｉｎＶ－ＦＩＴＣ／ＰＩ双染法）进行了实验观察。由图２及??表２我们可以看出，经不同浓度（５、１０、２０＿〇１／Ｌ）姜黄素处理的ＨＫＦ??与对照组（ＯＭｏｌ／Ｌ）相比细胞凋亡率均明显增高，各组之间差异显著??（胤?０１）。??１?…．．．．．?一．．．．．．．—，?＊ｒ??－?１１．２３?２１?｜?３１．７４?２１?３５．２２１?２１?４６．３６??Ａ?＾?２＂?３?ｓ＇?ｃ?ｔ?０??＿．ｊ考?ａ，???图２流式细胞术观察姜黄素处理后ＨＫＦ凋亡情况??Ａ．?〇Ｍ－ｍｏｌ／Ｌ；?Ｂ．?５Ｍ＊ｍｏｌ／Ｌ；?Ｃ．?ｌ〇Ｍ＊ｍｏｌ／Ｌ；?Ｄ．?２０＾ｍｏｌ／Ｌ??表２姜黄素处理后ＨＫＦ的总凋亡率（ｎ＝３?，?ＸｔＳ?）??姜黄素浓度（ｐｍ〇ｌ／Ｌ?）?总凋亡率（％?）??０?１３．４３±０．７５??５?３６．９７±１．９２＊＊??１０?４２．８５±２．７８＊＊??２０?５２．３７±１．６７＊＊??注：各组间细胞总凋亡率比较Ｐ＜ＣＩ．〇ｌ??１２??
３．?３细胞周期分布试验结果??细胞周期是各种细胞生命活动的重要基本程序之一，而且肿瘤发生、发??展与细胞周期失控有着密不可分的关系。细胞周期包括ＤＮＡ合成前期??（Ｇ０－Ｇ１）、ＤＮＡ合成期（Ｇｌ－Ｓ）、ＤＮＡ合成后期（Ｇ２－Ｍ）。细胞要完成一??次完整的增殖要经过Ｇｌ?—Ｓ?—?Ｇ２?—Ｍ四个时期，有研究认为，Ｇ１／Ｓ期调??控点和Ｇ２／Ｍ期调控点最为重要。这两个阶段相对而言比较容易受到环境??条件的影响，因此这些调控点上的失控就很容易导致肿瘤的发生。流式??细胞仪检测姜黄素对人瘢痕疙瘩成纤维细胞，细胞周期的结果显示，不??同浓度的姜黄素对人瘢痕疙瘩成纤维细胞，细胞周期的影响不同。随着??姜黄素药物浓度（〇、５、１０、２０ｗｎｏｌ／Ｌ）的增加，Ｇ１细胞所占的百分比??越来越大，Ｇ１期是细胞有丝分裂间期运行的前期，是药物作用的敏感点。??采用流式细胞仪检测结果显示，各浓度的姜黄素作用于人瘢痕疙瘩成纤??维细胞后，均导致Ｇ０／Ｇ１期细胞堆积，阻滞Ｇ１期细胞向Ｓ期的发展，细胞??的凋亡率升高。如下图３及表３。??
【参考文献】：
期刊论文
[1]点阵CO2激光治疗兔耳增生性瘢痕后成纤维细胞凋亡及VEGF变化规律的研究[J]. 谭军,郭君,李高峰,朱轶,丁卫. 中国美容医学. 2012(17)
[2]丹参酮ⅡA诱导瘢痕疙瘩成纤维细胞凋亡及细胞周期阻滞的实验研究[J]. 陈刚,梁奕敏,李青峰. 组织工程与重建外科杂志. 2012(02)
[3]平阳霉素在耳廓瘢痕疙瘩治疗中的作用[J]. 李赞峰. 中国实用医药. 2012(10)
[4]5-氟尿嘧啶对瘢痕疙瘩成纤维细胞MMPS及TIMPS表达的影响[J]. 贾涛,陈天新,关德宏,李明. 中国医刊. 2012 (01)
[5]手术联合术后即时放射治疗瘢痕疙瘩[J]. 李鹏程,贾赤宇,李月敏,聂开瑜,池迎春,胡国栋,邱亚斌,刘真. 中华医学杂志. 2011 (45)
[6](90)Sr敷贴器治疗瘢痕疙瘩218例疗效分析[J]. 王夕文,王艳萍,秦涛,杨美,张淑萍. 中国实用医药. 2011(29)
[7]90Sr/90Y敷贴联合手术切除治疗增生性瘢痕疙瘩效果观察[J]. 林辉. 北方药学. 2011(07)
[8]液氮冷冻联合平阳霉素治疗瘢痕疙瘩的临床观察[J]. 廖启军. 中外医学研究. 2011(20)
[9]三种不同方法治疗瘢痕疙瘩的疗效比较[J]. 李新技,夏廷毅,常冬姝,郭久璋,李平. 中国美容医学. 2011(06)
[10]无花果叶补骨脂素对体外培养瘢痕疙瘩成纤维细胞的影响[J]. 王涛,陶如,李清华,高永峰,周成军,刘金成. 中国药房. 2011(19)
本文编号：3557986
【文章来源】：延边大学吉林省 211工程院校
【文章页数】：44 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１姜黄素对ＨＫＦ的增值抑制作用??表１?ＭＴＴ細賴舖对人瘩藤维细胞（ＨＫＦ?）的作用（ｎ?＝?６?，?Ｘ±Ｓ?）??
增殖抑制实验中看到姜黄素可有效抑制人瘢痕疙瘩成纤维细胞的增殖，??但是关于其是否能有效诱导人瘢痕疙瘩成纤维细胞凋亡，我们后期采用??了流式细胞术（ＡｎｎｅｘｉｎＶ－ＦＩＴＣ／ＰＩ双染法）进行了实验观察。由图２及??表２我们可以看出，经不同浓度（５、１０、２０＿〇１／Ｌ）姜黄素处理的ＨＫＦ??与对照组（ＯＭｏｌ／Ｌ）相比细胞凋亡率均明显增高，各组之间差异显著??（胤?０１）。??１?…．．．．．?一．．．．．．．—，?＊ｒ??－?１１．２３?２１?｜?３１．７４?２１?３５．２２１?２１?４６．３６??Ａ?＾?２＂?３?ｓ＇?ｃ?ｔ?０??＿．ｊ考?ａ，???图２流式细胞术观察姜黄素处理后ＨＫＦ凋亡情况??Ａ．?〇Ｍ－ｍｏｌ／Ｌ；?Ｂ．?５Ｍ＊ｍｏｌ／Ｌ；?Ｃ．?ｌ〇Ｍ＊ｍｏｌ／Ｌ；?Ｄ．?２０＾ｍｏｌ／Ｌ??表２姜黄素处理后ＨＫＦ的总凋亡率（ｎ＝３?，?ＸｔＳ?）??姜黄素浓度（ｐｍ〇ｌ／Ｌ?）?总凋亡率（％?）??０?１３．４３±０．７５??５?３６．９７±１．９２＊＊??１０?４２．８５±２．７８＊＊??２０?５２．３７±１．６７＊＊??注：各组间细胞总凋亡率比较Ｐ＜ＣＩ．〇ｌ??１２??
３．?３细胞周期分布试验结果??细胞周期是各种细胞生命活动的重要基本程序之一，而且肿瘤发生、发??展与细胞周期失控有着密不可分的关系。细胞周期包括ＤＮＡ合成前期??（Ｇ０－Ｇ１）、ＤＮＡ合成期（Ｇｌ－Ｓ）、ＤＮＡ合成后期（Ｇ２－Ｍ）。细胞要完成一??次完整的增殖要经过Ｇｌ?—Ｓ?—?Ｇ２?—Ｍ四个时期，有研究认为，Ｇ１／Ｓ期调??控点和Ｇ２／Ｍ期调控点最为重要。这两个阶段相对而言比较容易受到环境??条件的影响，因此这些调控点上的失控就很容易导致肿瘤的发生。流式??细胞仪检测姜黄素对人瘢痕疙瘩成纤维细胞，细胞周期的结果显示，不??同浓度的姜黄素对人瘢痕疙瘩成纤维细胞，细胞周期的影响不同。随着??姜黄素药物浓度（〇、５、１０、２０ｗｎｏｌ／Ｌ）的增加，Ｇ１细胞所占的百分比??越来越大，Ｇ１期是细胞有丝分裂间期运行的前期，是药物作用的敏感点。??采用流式细胞仪检测结果显示，各浓度的姜黄素作用于人瘢痕疙瘩成纤??维细胞后，均导致Ｇ０／Ｇ１期细胞堆积，阻滞Ｇ１期细胞向Ｓ期的发展，细胞??的凋亡率升高。如下图３及表３。??
【参考文献】：
期刊论文
[1]点阵CO2激光治疗兔耳增生性瘢痕后成纤维细胞凋亡及VEGF变化规律的研究[J]. 谭军,郭君,李高峰,朱轶,丁卫. 中国美容医学. 2012(17)
[2]丹参酮ⅡA诱导瘢痕疙瘩成纤维细胞凋亡及细胞周期阻滞的实验研究[J]. 陈刚,梁奕敏,李青峰. 组织工程与重建外科杂志. 2012(02)
[3]平阳霉素在耳廓瘢痕疙瘩治疗中的作用[J]. 李赞峰. 中国实用医药. 2012(10)
[4]5-氟尿嘧啶对瘢痕疙瘩成纤维细胞MMPS及TIMPS表达的影响[J]. 贾涛,陈天新,关德宏,李明. 中国医刊. 2012 (01)
[5]手术联合术后即时放射治疗瘢痕疙瘩[J]. 李鹏程,贾赤宇,李月敏,聂开瑜,池迎春,胡国栋,邱亚斌,刘真. 中华医学杂志. 2011 (45)
[6](90)Sr敷贴器治疗瘢痕疙瘩218例疗效分析[J]. 王夕文,王艳萍,秦涛,杨美,张淑萍. 中国实用医药. 2011(29)
[7]90Sr/90Y敷贴联合手术切除治疗增生性瘢痕疙瘩效果观察[J]. 林辉. 北方药学. 2011(07)
[8]液氮冷冻联合平阳霉素治疗瘢痕疙瘩的临床观察[J]. 廖启军. 中外医学研究. 2011(20)
[9]三种不同方法治疗瘢痕疙瘩的疗效比较[J]. 李新技,夏廷毅,常冬姝,郭久璋,李平. 中国美容医学. 2011(06)
[10]无花果叶补骨脂素对体外培养瘢痕疙瘩成纤维细胞的影响[J]. 王涛,陶如,李清华,高永峰,周成军,刘金成. 中国药房. 2011(19)
本文编号：3557986
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