新藤黄酸对小细胞肺癌抗肿瘤作用的体内外研究
发布时间：2021-12-31 15:50
目的:本课题通过体内外实验探讨新藤黄酸（Gambogenic acid,GNA）对小细胞肺癌细胞株（NCI-H446、NCI-H1688）的抗肿瘤作用及其相关机制,旨在为后期临床药物试验提供实验依据。方法:体外实验:1.应用CCK8法检测GNA对小细胞肺癌细胞株（NCI-H446、NCI-H1688）的细胞增殖的影响。2.应用流式细胞术法（Flow cytometry）检测GNA对两株细胞（NCI-H446、NCI-H1688）细胞凋亡与细胞周期的影响。3.应用蛋白质印迹法（Western-Blot）定量检测GNA处理后两株细胞株（NCI-H446、NCI-H1688）内细胞凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、Cleaved-caspase3,8,9、PARP及p53的表达,以期进一步探究GNA作用的相关分子机制。体内实验:1.为进一步研究GNA对小细胞肺癌（small cell lung cancer,SCLC）的作用,通过建立NCI-H446裸鼠移植瘤模型,应用公式法测定不同浓度GNA的抑瘤率、TUNEL法（Terminal-deoxynucleoitidyl Transferase ...
【文章来源】：东南大学江苏省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：48 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
GNA对NCI-H446、NCI-H1688两株细胞增殖的影响：不同浓度（0.6μM-3.2μM）的GNA对NCI-H446、(a)(b)
Group（μM) UL(%) UR(%) LL(%) LR(%) Apoptosis(%)0 1.70 3.23 92.40 2.62 5.851.4 4.90 20.50 60.20 14.40 34.902 10.50 42.30 18.30 28.90 71.20（a）Group（μM) UL(%) UR(%) LL(%) LR(%) Apoptosis(%)0 0.07 0.12 95.42 4.39 4.512.4 2.40 17.01 64.82 15.77 32.783 0.65 45.53 20.53 33.38 78.91(b)
图 2.3 GNA 诱导 NCI-H446(a)、NCI-H1688(b)两株细胞周期阻滞。选用 0μM、0.6μM 和 1.2μM 的 G作用于 NCI-H446，选用 0μM、1.5μM 和 2.2μM 的 GNA 作用于 NCI-H1688，24h 后应用 FCM 检测细胞期。从上述图表中我们可以看出，低浓度的 GNA 将 NCI-H446 细胞阻滞于 G0/G1 期，而高浓度的 GNA将细胞阻滞于 S 期。而对于 NCI-H1688，各组细胞均发生 S 期周期阻滞。表(a)、(b)分别代表 H446、H1两株细胞各周期比率；图(a)、(b)分别代表 H446、H1688 两株细胞各周期比率的柱形图，应用 T 检验法各实验组与对照组间存在统计学差异，p<0.05（*）。2.4 GNA 影响 NCI-H446、NCI-H1688 细胞凋亡相关蛋白的表达为进一步探讨 GNA 诱导两株细胞凋亡的作用及其可能的分子机制，采用 Western-B法检测了凋亡相关蛋白。根据 CCK8 结果及预实验浓度探究，本实验选用 1.1μM、1.3μM2.0μM、2.3μM 的 GNA 分别作用于 NCI-H446、NCI-H1688 细胞 24h 后，测定细胞内 BaBcl-2、Cleaved-caspase3,8,9、p53、PARP 的表达量。结果显示：与对照组相比，两株细胞的促凋亡蛋白 Bax、Cleaved-caspase3,8,9、p53、PA
【参考文献】：
期刊论文
[1]新藤黄酸联合阿霉素通过JNK信号通路诱导人乳腺癌细胞凋亡的相关机制研究[J]. 徐婷,谢晨烨,程卉,苏婧婧,李庆林. 中华中医药杂志. 2017(06)
[2]新藤黄酸通过Ras/Raf/Erk信号通路诱导肺腺癌A549细胞凋亡的研究[J]. 彭程,孙美灵,苏婧婧,李庆林. 中药新药与临床药理. 2016(02)
[3]注射用紫杉醇(清蛋白结合型)抗肿瘤作用[J]. 王彩霞,高玉清,李艳玲,毕宇鑫,魏娜,赵倩,李春雷. 医药导报. 2015(04)
[4]藤黄酸对人结肠癌SW480细胞裸鼠移植瘤生长及血管生成的影响[J]. 梁文龙,曹杰,杨平,李旺林,廖述文,张通,陈熙文,王强,孙政. 广东医学. 2014(16)
[5]顺铂联合依托泊苷或伊立替康及拓扑替康一线治疗小细胞肺癌的比较研究[J]. 尹良伟,马海英,王颖,杜晓红. 中华肿瘤防治杂志. 2013(10)
[6]新藤黄酸抑制人乳腺癌细胞株MCF-7增殖的实验研究[J]. 陆彬彬,刘新姿,王娟,周晶,王继荣,沈群,王科明. 临床肿瘤学杂志. 2012(08)
[7]新藤黄酸包合物冻干粉针制备及工艺优化[J]. 胡海霞,王效山,彭代银,李庆林. 中草药. 2012(01)
[8]新藤黄酸诱导细胞凋亡抑制A549细胞裸鼠移植瘤增长的研究[J]. 杨莉,王梅,程卉,李庆林. 中国中药杂志. 2011(09)
[9]细胞周期中MicroRNA的调控作用[J]. 侯丽娟,汤华. 中国生物化学与分子生物学报. 2008(05)
[10]Anticancer effect and apoptosis induction of gambogic acid in human gastric cancer line BGC-823[J]. Wei Liu, Qing-Long Guo, Li Zhao, Hong-Yan Gu, Department of Physiology, China Pharmaceutical University, Nanjing 210009, Jiangsu Province, China Qi-Dong You, Department of Medicinal Chemistry, China Pharmaceutical University, Nanjing 210009, Jiangsu Province, China Sheng-Tao Yuan, the National Laboratory of New Drug Screen, China Pharmaceutical University, Nanjing 210009, Jiangsu Province, China. World Journal of Gastroenterology. 2005(24)
博士论文
[1]PM2.5对肺癌细胞及大鼠肺组织细胞周期的影响[D]. 赵辉.吉林大学 2017
[2]PARP-1和EMT在卵巢癌中的生物学功能及意义[D]. 苏姗.山东大学 2017
[3]PARP新型抑制剂希明哌瑞抗肿瘤作用及机制研究[D]. 袁博.中国科学院大学(中国科学院上海药物研究所) 2017
[4]生物钟基因Per2对人口腔鳞癌细胞增殖、凋亡和细胞周期的调控作用[D]. 王青青.重庆医科大学 2016
硕士论文
[1]PARP抑制剂抗肿瘤活性的筛选与评价[D]. 郭林.广西医科大学 2017
[2]PARP-1对淋巴瘤Raji细胞增殖与凋亡的影响及机制探讨[D]. 郭文娴.青岛大学 2017
[3]SIRT1过表达对THP-1细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响及作用机制探讨[D]. 李登峰.广西医科大学 2017
[4]PARP-1抑制剂对人H460肺癌细胞放疗增敏作用及其机制研究[D]. 罗婧.天津医科大学 2017
本文编号：3560536
【文章来源】：东南大学江苏省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：48 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
GNA对NCI-H446、NCI-H1688两株细胞增殖的影响：不同浓度（0.6μM-3.2μM）的GNA对NCI-H446、(a)(b)
Group（μM) UL(%) UR(%) LL(%) LR(%) Apoptosis(%)0 1.70 3.23 92.40 2.62 5.851.4 4.90 20.50 60.20 14.40 34.902 10.50 42.30 18.30 28.90 71.20（a）Group（μM) UL(%) UR(%) LL(%) LR(%) Apoptosis(%)0 0.07 0.12 95.42 4.39 4.512.4 2.40 17.01 64.82 15.77 32.783 0.65 45.53 20.53 33.38 78.91(b)
图 2.3 GNA 诱导 NCI-H446(a)、NCI-H1688(b)两株细胞周期阻滞。选用 0μM、0.6μM 和 1.2μM 的 G作用于 NCI-H446，选用 0μM、1.5μM 和 2.2μM 的 GNA 作用于 NCI-H1688，24h 后应用 FCM 检测细胞期。从上述图表中我们可以看出，低浓度的 GNA 将 NCI-H446 细胞阻滞于 G0/G1 期，而高浓度的 GNA将细胞阻滞于 S 期。而对于 NCI-H1688，各组细胞均发生 S 期周期阻滞。表(a)、(b)分别代表 H446、H1两株细胞各周期比率；图(a)、(b)分别代表 H446、H1688 两株细胞各周期比率的柱形图，应用 T 检验法各实验组与对照组间存在统计学差异，p<0.05（*）。2.4 GNA 影响 NCI-H446、NCI-H1688 细胞凋亡相关蛋白的表达为进一步探讨 GNA 诱导两株细胞凋亡的作用及其可能的分子机制，采用 Western-B法检测了凋亡相关蛋白。根据 CCK8 结果及预实验浓度探究，本实验选用 1.1μM、1.3μM2.0μM、2.3μM 的 GNA 分别作用于 NCI-H446、NCI-H1688 细胞 24h 后，测定细胞内 BaBcl-2、Cleaved-caspase3,8,9、p53、PARP 的表达量。结果显示：与对照组相比，两株细胞的促凋亡蛋白 Bax、Cleaved-caspase3,8,9、p53、PA
【参考文献】：
期刊论文
[1]新藤黄酸联合阿霉素通过JNK信号通路诱导人乳腺癌细胞凋亡的相关机制研究[J]. 徐婷,谢晨烨,程卉,苏婧婧,李庆林. 中华中医药杂志. 2017(06)
[2]新藤黄酸通过Ras/Raf/Erk信号通路诱导肺腺癌A549细胞凋亡的研究[J]. 彭程,孙美灵,苏婧婧,李庆林. 中药新药与临床药理. 2016(02)
[3]注射用紫杉醇(清蛋白结合型)抗肿瘤作用[J]. 王彩霞,高玉清,李艳玲,毕宇鑫,魏娜,赵倩,李春雷. 医药导报. 2015(04)
[4]藤黄酸对人结肠癌SW480细胞裸鼠移植瘤生长及血管生成的影响[J]. 梁文龙,曹杰,杨平,李旺林,廖述文,张通,陈熙文,王强,孙政. 广东医学. 2014(16)
[5]顺铂联合依托泊苷或伊立替康及拓扑替康一线治疗小细胞肺癌的比较研究[J]. 尹良伟,马海英,王颖,杜晓红. 中华肿瘤防治杂志. 2013(10)
[6]新藤黄酸抑制人乳腺癌细胞株MCF-7增殖的实验研究[J]. 陆彬彬,刘新姿,王娟,周晶,王继荣,沈群,王科明. 临床肿瘤学杂志. 2012(08)
[7]新藤黄酸包合物冻干粉针制备及工艺优化[J]. 胡海霞,王效山,彭代银,李庆林. 中草药. 2012(01)
[8]新藤黄酸诱导细胞凋亡抑制A549细胞裸鼠移植瘤增长的研究[J]. 杨莉,王梅,程卉,李庆林. 中国中药杂志. 2011(09)
[9]细胞周期中MicroRNA的调控作用[J]. 侯丽娟,汤华. 中国生物化学与分子生物学报. 2008(05)
[10]Anticancer effect and apoptosis induction of gambogic acid in human gastric cancer line BGC-823[J]. Wei Liu, Qing-Long Guo, Li Zhao, Hong-Yan Gu, Department of Physiology, China Pharmaceutical University, Nanjing 210009, Jiangsu Province, China Qi-Dong You, Department of Medicinal Chemistry, China Pharmaceutical University, Nanjing 210009, Jiangsu Province, China Sheng-Tao Yuan, the National Laboratory of New Drug Screen, China Pharmaceutical University, Nanjing 210009, Jiangsu Province, China. World Journal of Gastroenterology. 2005(24)
博士论文
[1]PM2.5对肺癌细胞及大鼠肺组织细胞周期的影响[D]. 赵辉.吉林大学 2017
[2]PARP-1和EMT在卵巢癌中的生物学功能及意义[D]. 苏姗.山东大学 2017
[3]PARP新型抑制剂希明哌瑞抗肿瘤作用及机制研究[D]. 袁博.中国科学院大学(中国科学院上海药物研究所) 2017
[4]生物钟基因Per2对人口腔鳞癌细胞增殖、凋亡和细胞周期的调控作用[D]. 王青青.重庆医科大学 2016
硕士论文
[1]PARP抑制剂抗肿瘤活性的筛选与评价[D]. 郭林.广西医科大学 2017
[2]PARP-1对淋巴瘤Raji细胞增殖与凋亡的影响及机制探讨[D]. 郭文娴.青岛大学 2017
[3]SIRT1过表达对THP-1细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响及作用机制探讨[D]. 李登峰.广西医科大学 2017
[4]PARP-1抑制剂对人H460肺癌细胞放疗增敏作用及其机制研究[D]. 罗婧.天津医科大学 2017
本文编号：3560536
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