牡荆素调节自噬与自噬流介导缺氧复氧大鼠原代心肌细胞的保护作用

发布时间：2022-01-10 18:01

　　目的探讨牡荆素调节自噬与自噬流介导缺氧复氧大鼠原代心肌细胞的保护作用。方法采用原代心肌细胞缺氧/复氧（H/R）模拟缺血再灌注损伤。CCK-8检测心肌细胞的活力。试剂盒检测心肌细胞上清液中乳酸脱氢酶（LDH）水平。2′,7′-二氯荧光黄双乙酸盐（DCFH-DA）检测原代心肌细胞中活性氧（ROS）的水平。自噬双标记腺病毒（mRFP-GFP-LC3）转染原代心肌细胞,观察自噬小体和自噬溶酶体数量。Western blot检测LC3BⅡ/Ⅰ、Beclin1、P62蛋白的表达。结果大鼠原代心肌细胞缺氧复氧后, H/R组心肌细胞活力显著降低,LDH漏出增多,心肌细胞内ROS水平明显升高,而牡荆素各剂量组可提高缺氧复氧心肌细胞活力,抑制心肌细胞的LDH释放,降低心肌细胞中ROS水平。心肌细胞转染mRFP-GFP-LC3病毒后,检测结果显示,与正常对照组比较,H/R组心肌细胞出现明显的自噬和自噬流增强,而牡荆素各剂量组可抑制心肌细胞H/R后的自噬和自噬流增强,减少心肌细胞内自噬小体的累积。另外,Western blot结果显示,与正常对照组比较,H/R组原代心肌细胞中自噬蛋白Beclin 1、LC3Ⅱ... 

【文章来源】：安徽医科大学学报. 2020,55(08)北大核心

【文章页数】：6 页

【部分图文】：

牡荆素对正常培养大鼠原代心肌细胞活力的影响(n=6)

mRFP-GFP-LC3结果显示,与正常对照组比较,缺氧复氧诱导后H/R组心肌细胞出现明显的自噬和自噬流增强,并且心肌细胞LC3Ⅱ蛋白表达增加(F=16.11,P<0.01),LC3Ⅱ/Ⅰ比值增大,提示H/R后心肌细胞中自噬小体累积增加,自噬溶酶体随之增多;而牡荆素各剂量组可抑制H/R后心肌细胞的自噬和自噬流增强,LC3Ⅱ蛋白表达减少,LC3Ⅱ/Ⅰ比值减小,心肌细胞内自噬小体的累积受抑制。结果见图4。图3 牡荆素对H/R损伤心肌细胞内ROS水平的影响(n=6)

牡荆素对H/R损伤心肌细胞内ROS水平的影响(n=6)

【参考文献】：
期刊论文
[1]二苯乙烯苷减轻小鼠急性脑缺血再灌注后的氧化应激损伤及其对自噬的影响[J]. 张奇龙,薛威,徐博涵,唐虹,江勤,董六一.  安徽医科大学学报. 2019(08)
[2]《中国心血管病报告2018》概要[J]. 胡盛寿,高润霖,刘力生,朱曼璐,王文,王拥军,吴兆苏,李惠君,顾东风,杨跃进,郑哲,陈伟伟.  中国循环杂志. 2019(03)
[3]注射用牡荆素与葛根素注射液抗大鼠心肌缺血/再灌注损伤量效关系的研究[J]. 王亚男,彭成凤,甄毅岚,董六一.  安徽医科大学学报. 2015(03)



本文编号：3581167