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龙葵碱通过调节miR-140和结肠癌转移相关基因1调控胃癌细胞增殖和凋亡

发布时间:2022-01-27 11:48
  目的探讨龙葵碱对胃癌细胞增殖、凋亡的影响及其潜在分子机制。方法转染前,将胃癌SGC-7901细胞分为4组:对照组(常规培养)、低、中、高剂量龙葵碱组(分别给予25,50,100μg·mL-1龙葵碱处理48 h)。选用100μg·mL-1龙葵碱进行后续实验。将miRNA模拟物(miR-mimics)、miRNA抑制剂(miR-inhibitor)阴性对照及miR-140-mimics、miR-140-inhibitor分别转染至SGC-7901细胞,分别命名为第1转染组、第2转染组、第3转染组、第4转染组。将第3转染组和第4转染组细胞分别给予100μg·mL-1龙葵碱处理,分别命名为第5转染组和第6转染组。用噻唑蓝(MTT)法和流式细胞仪分别检测细胞增殖和凋亡情况,用实时荧光定量链式聚合酶反应(RT-qPCR)检测miR-140、结肠癌转移相关基因1(MACC1) mRNA相对表达量表达。结果对照组、高剂量龙葵碱组、第1转染组、第2转染组、第3转染组、第4转染组、第5转染组、第6转染组的细胞增殖率分别为(100.00±9.... 

【文章来源】:中国临床药理学杂志. 2020,36(16)北大核心CSCD

【文章页数】:4 页

【文章目录】:
材料与方法
    1 材料
    2 实验方法
        2.1 细胞培养[1]
        2.2 转染前分组及处理
        2.3 细胞转染和转染后分组与处理
        2.4 用MTT法检测细胞增殖情况
        2.5 用流式细胞仪检测细胞凋亡情况
        2.6 用实时荧光定量链式聚合酶反应(RT-qPCR)检测miR-140、MACC1 mRNA相对表达量
        2.7 双荧光素酶报告基因实验
    3 统计学处理
结 果
    1 不同浓度的龙葵碱对胃癌细胞的增殖和凋亡影响
    2 过表达miR-140对胃癌细胞的增殖和凋亡的影响
    3 抑制miR-140影响龙葵碱对胃癌细胞的抑制作用
    4 各组miR-140和MACC1 mRNA表达
    5 miR-140与MACC1的靶向关系
讨 论


【参考文献】:
期刊论文
[1]miR-9对人胃癌细胞株活化白细胞黏附分子基因表达的靶向调控作用[J]. 余丹纯,聂玉强,黄耀星,孙小娟.  胃肠病学和肝病学杂志. 2019(01)
[2]从调控TGF-β/Smads通路途径探讨龙葵防治肝癌的机理[J]. 杨旭峰.  陕西中医. 2017(05)
[3]龙葵碱对胰腺癌细胞裸鼠移植瘤的抑制作用及机制研究[J]. 周怡,李影,孔鸿儒,张青顺,周蒙滔,孙洪伟.  肝胆胰外科杂志. 2016(03)
[4]龙葵碱体外诱导人结肠癌SW480细胞凋亡及其对相关因子的影响[J]. 赵逸斌,邓科,杨少辉,崔蘶.  上海中医药杂志. 2015(12)
[5]MTT比色法在细胞生物学实验教学中的实验安排与效果分析[J]. 薛雅蓉,庄重,钟昭昭,高倩倩.  高校生物学教学研究(电子版). 2015(03)
[6]电穿孔转染法与脂质体转染法对K562和HepG2细胞转染效率的影响[J]. 隋娟,张高丽,李平法,于海川.  新乡医学院学报. 2015(08)
[7]龙葵碱对人胃癌MGC-803荷瘤小鼠癌细胞钙粘蛋白表达的影响[J]. 张卫东,孙睿,李莉,张丽敏,薛春梅,罗志文.  安徽农业科学. 2013(30)



本文编号:3612430

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