柑橘果实黄酮类物质的降糖活性研究
发布时间：2022-02-17 10:27
已有研究表明,柑橘果实具有包括降糖在内的多种生物活性。本研究利用HepG2细胞-葡萄糖消耗模型,对35个不同品种柑橘果实（油胞层、白皮层、囊衣、汁胞）的黄酮类物质进行促葡萄糖消耗活性评价。从具有较强促葡萄糖消耗活性的柑橘品种果实中分离纯化得到多甲氧基黄酮（PMFs）组分,对其体外降糖活性进行评价,并通过实时荧光定量PCR技术（RT-qPCR）分析相关基因表达差异,开展相关机理研究;进一步利用自发型糖尿病KK-Ay小鼠模型对PMFs组分的血糖调节功能进行了验证。主要研究结果如下:（1）不同柑橘品种黄酮类物质的促葡萄糖消耗活性存在较大的差异,相同品种不同部位提取得到的黄酮类物质的潜在降糖活性也各不相同,其中发挥促葡萄糖消耗活性的黄酮类物质主要来源于油胞层和白皮层,而囊衣和汁胞提取物未能检测到该活性。因此,发挥降糖作用的活性组分主要分布于柑橘果皮中。通过以上研究,筛选出了具有潜在降糖能力的柑橘品种:’瓯柑’、’爱媛30’、’茶枝柑’、’天草’等。（2）以瓯柑果皮为材料,分离纯化得到富含PMFs的黄酮类物质,对其体外降糖作用进行研究,发现当PMFs浓度为5μg/mL时,HepG2细胞24h葡萄...
【文章来源】：浙江大学浙江省211工程院校985工程院校教育部直属院校
【文章页数】：60 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
致谢
摘要
Abstract
缩略语表
1 前言
1.1 柑橘概况
1.2 多甲氧基黄酮类化合物
1.2.1 多甲氧基黄酮类化合物的结构与理化性质
1.2.2 多甲氧基黄酮类化合物的生物活性
1.2.3 多甲氧基黄酮类化合物的降血糖活性机制
1.3 糖尿病
1.4 天然产物的血糖调节作用
1.5 研究目标与研究内容
2 柑橘果实黄酮类物质促葡萄糖消耗活性评价
2.1 材料、试剂和仪器
2.1.1 试验材料
2.1.2 试验试剂
2.1.3 试验仪器
2.2 试验方法
2.2.1 不同品种柑橘果实黄酮类物质的提取物制备
2.2.2 HepG2细胞系及细胞培养
2.2.3 促葡萄糖消耗活性评价
2.2.4 统计分析
2.3 结果与分析
2.3.1 柚类
2.3.2 橙类
2.3.3 宽皮柑橘类
2.3.4 杂柑类
2.4 讨论
3 柑橘果实PMFs组分体外降糖活性及相关机制研究
3.1 材料、试剂与仪器
3.1.1 试验材料
3.1.2 试验试剂
3.1.3 试验仪器
3.2 试验方法
3.2.1 柑橘果实PMFs组分的分离纯化
3.2.2 细胞系和细胞培养
3.2.3 PMFs组分的促葡萄糖消耗活性检测
3.2.4 RNA提取与逆转录
3.2.5 对WNT信号通路关键基因的RT-qPCR分析
3.2.6 统计分析
3.3 结果与分析
3.3.1 柑橘果实PMFs组分促葡萄糖消耗活性评价
3.3.2 基因的差异表达分析
3.4 讨论
4 柑橘果实PMFs组分对糖尿病小鼠的血糖调节活性研究
4.1 材料、试剂与仪器
4.1.1 试验材料
4.1.2 试验动物
4.1.3 试验试剂
4.1.4 试验仪器
4.2 试验方法
4.2.1 试验动物分组和给药
4.2.2 空腹血糖和口服葡萄糖耐受量测定
4.2.3 样品采集和处理
4.2.4 血清生化指标测定
4.2.5 肝脏组织H&E染色
4.2.6 肝脏组织油红O染色
4.2.7 统计分析
4.3 结果与分析
4.3.1 对小鼠体重变化和摄食量的影响
4.3.2 对小鼠空腹血糖和口服葡萄糖耐受量的影响
4.3.3 对小鼠脏器系数(体重百分比)的影响
4.3.4 对小鼠血清参数的影响
4.3.5 对小鼠肝脏组织形态的影响
4.4 讨论
5 结论与展望
5.1 结论
5.2 展望
参考文献
作者简历
【参考文献】：
期刊论文
[1]表没食子儿茶素没食子酸酯对糖尿病大鼠心脏的保护作用及对TGF-β1/Smad3信号通路表达的影响[J]. 孙敬茹,陈克研,孙倩,韩梅. 中国医科大学学报. 2019(02)
[2]DKK1在糖尿病血管病变中的研究进展[J]. 张艳萍,刘昊凌. 医学综述. 2017(15)
[3]天然黄酮类化合物治疗2型糖尿病的机制研究进展[J]. 郭颖,辛念,戴荣继. 天然产物研究与开发. 2017(10)
[4]津力达颗粒改善1型糖尿病大鼠肝损伤的机制研究[J]. 叶菲,刘子毓,陈海燕,陈向芳,刘志民. 药学服务与研究. 2016(02)
[5]国内外柚(含葡萄柚)生产与贸易分析[J]. 张放. 中国果业信息. 2015(11)
[6]磺酰脲类降糖药在治疗Ⅱ型糖尿病中的作用[J]. 杨冬梅,程景,丁伯平,黄帧桧. 医学理论与实践. 2014(09)
[7]苦瓜总皂苷对2型糖尿病大鼠降血糖作用机制的研究[J]. 马春宇,于洪宇,王慧娇,耿丽晶,关洪全. 天津医药. 2014(04)
[8]中国特有柑桔属植物基本类型不同组织类黄酮含量分析[J]. 杨朴丽. 中国果业信息. 2014(02)
[9]茶枝柑皮提取物中黄酮类成分的含量测定[J]. 甘伟发,黄庆华,吉国辉,定力. 广东药学院学报. 2013(03)
[10]2型糖尿病患者正常值范围内的较高血谷丙转氨酶与心血管危险因素簇集的相关性研究[J]. 齐婷,刘彦君,许樟荣,曹明君,王玉珍,杨小平. 中国糖尿病杂志. 2012(01)
博士论文
[1]杨梅果实酚类物质提取物降糖活性及其相关机理研究[D]. 张夏南.浙江大学 2016
[2]WNT通路基因和环境因素交互作用与2型糖尿病的关联研究[D]. 李琳琳.郑州大学 2015
[3]瓯柑和胡柚果实黄酮类化合物组分鉴定、分离纯化及生物活性研究[D]. 张九凯.浙江大学 2013
硕士论文
[1]酸橙与甜橙的遗传起源及柑橘糖酸变化初探[D]. 何发.华中农业大学 2017
[2]柑橘黄酮类化合物组分鉴定与抗氧化活性研究[D]. 钱井.浙江大学 2017
[3]柑橘精油抗氧化特性及对皮肤细胞氧化损伤的保护作用研究[D]. 黄娜娜.华中农业大学 2016
[4]宽皮柑橘速冻保鲜技术的研究[D]. 胡中海.西南大学 2015
本文编号：3629273
【文章来源】：浙江大学浙江省211工程院校985工程院校教育部直属院校
【文章页数】：60 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
致谢
摘要
Abstract
缩略语表
1 前言
1.1 柑橘概况
1.2 多甲氧基黄酮类化合物
1.2.1 多甲氧基黄酮类化合物的结构与理化性质
1.2.2 多甲氧基黄酮类化合物的生物活性
1.2.3 多甲氧基黄酮类化合物的降血糖活性机制
1.3 糖尿病
1.4 天然产物的血糖调节作用
1.5 研究目标与研究内容
2 柑橘果实黄酮类物质促葡萄糖消耗活性评价
2.1 材料、试剂和仪器
2.1.1 试验材料
2.1.2 试验试剂
2.1.3 试验仪器
2.2 试验方法
2.2.1 不同品种柑橘果实黄酮类物质的提取物制备
2.2.2 HepG2细胞系及细胞培养
2.2.3 促葡萄糖消耗活性评价
2.2.4 统计分析
2.3 结果与分析
2.3.1 柚类
2.3.2 橙类
2.3.3 宽皮柑橘类
2.3.4 杂柑类
2.4 讨论
3 柑橘果实PMFs组分体外降糖活性及相关机制研究
3.1 材料、试剂与仪器
3.1.1 试验材料
3.1.2 试验试剂
3.1.3 试验仪器
3.2 试验方法
3.2.1 柑橘果实PMFs组分的分离纯化
3.2.2 细胞系和细胞培养
3.2.3 PMFs组分的促葡萄糖消耗活性检测
3.2.4 RNA提取与逆转录
3.2.5 对WNT信号通路关键基因的RT-qPCR分析
3.2.6 统计分析
3.3 结果与分析
3.3.1 柑橘果实PMFs组分促葡萄糖消耗活性评价
3.3.2 基因的差异表达分析
3.4 讨论
4 柑橘果实PMFs组分对糖尿病小鼠的血糖调节活性研究
4.1 材料、试剂与仪器
4.1.1 试验材料
4.1.2 试验动物
4.1.3 试验试剂
4.1.4 试验仪器
4.2 试验方法
4.2.1 试验动物分组和给药
4.2.2 空腹血糖和口服葡萄糖耐受量测定
4.2.3 样品采集和处理
4.2.4 血清生化指标测定
4.2.5 肝脏组织H&E染色
4.2.6 肝脏组织油红O染色
4.2.7 统计分析
4.3 结果与分析
4.3.1 对小鼠体重变化和摄食量的影响
4.3.2 对小鼠空腹血糖和口服葡萄糖耐受量的影响
4.3.3 对小鼠脏器系数(体重百分比)的影响
4.3.4 对小鼠血清参数的影响
4.3.5 对小鼠肝脏组织形态的影响
4.4 讨论
5 结论与展望
5.1 结论
5.2 展望
参考文献
作者简历
【参考文献】：
期刊论文
[1]表没食子儿茶素没食子酸酯对糖尿病大鼠心脏的保护作用及对TGF-β1/Smad3信号通路表达的影响[J]. 孙敬茹,陈克研,孙倩,韩梅. 中国医科大学学报. 2019(02)
[2]DKK1在糖尿病血管病变中的研究进展[J]. 张艳萍,刘昊凌. 医学综述. 2017(15)
[3]天然黄酮类化合物治疗2型糖尿病的机制研究进展[J]. 郭颖,辛念,戴荣继. 天然产物研究与开发. 2017(10)
[4]津力达颗粒改善1型糖尿病大鼠肝损伤的机制研究[J]. 叶菲,刘子毓,陈海燕,陈向芳,刘志民. 药学服务与研究. 2016(02)
[5]国内外柚(含葡萄柚)生产与贸易分析[J]. 张放. 中国果业信息. 2015(11)
[6]磺酰脲类降糖药在治疗Ⅱ型糖尿病中的作用[J]. 杨冬梅,程景,丁伯平,黄帧桧. 医学理论与实践. 2014(09)
[7]苦瓜总皂苷对2型糖尿病大鼠降血糖作用机制的研究[J]. 马春宇,于洪宇,王慧娇,耿丽晶,关洪全. 天津医药. 2014(04)
[8]中国特有柑桔属植物基本类型不同组织类黄酮含量分析[J]. 杨朴丽. 中国果业信息. 2014(02)
[9]茶枝柑皮提取物中黄酮类成分的含量测定[J]. 甘伟发,黄庆华,吉国辉,定力. 广东药学院学报. 2013(03)
[10]2型糖尿病患者正常值范围内的较高血谷丙转氨酶与心血管危险因素簇集的相关性研究[J]. 齐婷,刘彦君,许樟荣,曹明君,王玉珍,杨小平. 中国糖尿病杂志. 2012(01)
博士论文
[1]杨梅果实酚类物质提取物降糖活性及其相关机理研究[D]. 张夏南.浙江大学 2016
[2]WNT通路基因和环境因素交互作用与2型糖尿病的关联研究[D]. 李琳琳.郑州大学 2015
[3]瓯柑和胡柚果实黄酮类化合物组分鉴定、分离纯化及生物活性研究[D]. 张九凯.浙江大学 2013
硕士论文
[1]酸橙与甜橙的遗传起源及柑橘糖酸变化初探[D]. 何发.华中农业大学 2017
[2]柑橘黄酮类化合物组分鉴定与抗氧化活性研究[D]. 钱井.浙江大学 2017
[3]柑橘精油抗氧化特性及对皮肤细胞氧化损伤的保护作用研究[D]. 黄娜娜.华中农业大学 2016
[4]宽皮柑橘速冻保鲜技术的研究[D]. 胡中海.西南大学 2015
本文编号：3629273
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/zhongyaolw/3629273.html
