健脾养正消癥方作用胃癌细胞上皮间质转化及其机制研究

发布时间：2022-02-17 15:22

　　目的:研究健脾养正消癥方对人胃癌细胞株MGC-803侵袭迁移粘附的影响,试图阐述其相关机制可能由于通过影响转录因子Snail来调控上皮间质转化（EMT）的发生从而发挥作用,抑制胃癌的转移。实验方法:1.采用MTT法来观察健脾养正消癥方体外作用于胃癌细胞株MGC-803在24h、48h、72h对胃癌细胞增殖的抑制作用,并选择出最佳的给药浓度,确定实验分组。2.通过划痕实验,观察健脾养正消癥方对于质粒转染及未转染的胃癌细胞株MGC-803细胞的迁移能力影响,分组进行比较。3.选择Transwell小室的实验方法,从而观察健脾养正消癥方对于未经过质粒转染及转染后的胃癌细胞株MGC-803侵袭能力的影响。4.通过CCK8法检测健脾养正消癥方对未转染及质粒转染后的胃癌细胞株MGC-803粘附能力的影响。5.Western blot方法检测健脾养正消癥方对于胃癌细胞MGC-803 EMT相关蛋白（E-Cadherin、N-Cadherin、Vimentin、Snail、slug）的影响。6.采用RT-PCR健脾养正消癥方作用过后的胃癌细胞MGC-803中EMT相关的基因表达。结果:1.2mg/ml... 

【文章来源】：南京中医药大学江苏省

【文章页数】：46 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
中文摘要
Abstract
前言
第一部分 理论研究
    一、祖国医学对于胃癌的认识和研究
        1. 胃癌的病因病机
        2. 胃癌的辨证论治
        3. 祖国医学对于胃癌转移及其治疗的概述
        4. "健脾益气、消癥散结"法指导下的中医临床研究
    二、现代医学对于胃恶性肿瘤转移的认识
        1. 肿瘤转移与上皮间质转化(EMT)的联系
        2. 胃癌发生上皮间质转化分子机制研究
        3. 中医药对肿瘤EMT干预的研究进展
    三、健脾养正消癥方的研究进展
第二部分 健脾养正消癥方对于胃癌侵袭转移影响及机制研究
    一、健脾养正消癥方对胃癌细胞株侵袭粘附迁移能力的影响
        1. 实验材料
        2. 实验方法
    二、研究结果
        1. 胃癌细胞MGC-803质粒转染
        2. 健脾养正消癥方对于胃癌细胞株MGC803细胞增值的影响
        3. 健脾养正消癥方对于转染及未转染胃癌细胞株MGC-803细胞侵袭能力的影响
        4. 健脾养正消癥方对于转染及未转染胃癌细胞株MGC-803细胞迁移能力的影响
        5. 健脾养正消癥方对于转染及未转染胃癌细胞株MGC-803细胞粘附能力的影响
    三、结论
        1. 侵袭实验结果分析
        2. 迁移实验结果分析
        3. 粘附实验结果分析
    四、小结
第三部分 健脾养正消癥方对于胃癌EMT相关基因及蛋白影响及机制研究
    1. 主要实验材料及设备
    2. 实验方法
        2.1 实时定量PCR检测
        2.2 Western blot
    3. 研究结果
        3.1 PCR实验结果
        3.2 western blot实验结果
    4. 结论
讨论
    一、Snail介导的EMT对胃癌的侵袭转移的影响
    二、健脾养正消癥方对胃癌细胞发生EMT的影响
结语
参考文献
附录
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]健脾养正消癥方对胃癌患者晚期生存期和生活质量的影响[J]. 邹玺,陈玉超,胡守友,王瑞平,王晓骁,刘沈林,刘宝瑞,陆建伟.  南京中医药大学学报. 2015(03)
[2]略论传统中医的肿瘤辨治观[J]. 韦堂军,程银.  世界科学技术-中医药现代化. 2015(04)
[3]健脾养正消癥方对胃癌细胞MGC-803粘附和侵袭能力的影响[J]. 邹玺,吴坚,刘沈林.  时珍国医国药. 2015(04)
[4]健脾养正消癥方对裸鼠胃癌移植瘤及肝转移灶的生长转移及相关基因的影响[J]. 王瑞平,朱超林,刘包欣子,朱云涛,唐晓龙,邹玺.  中国实验方剂学杂志. 2015(03)
[5]中国胃癌发病率及死亡率研究进展[J]. 邹文斌,李兆申.  中国实用内科杂志. 2014(04)
[6]“健脾养正消癥汤”改善晚期胃癌患者化疗后生活质量84例临床研究[J]. 陈玉超,刘沈林,王瑞平,邹玺.  江苏中医药. 2013(06)
[7]胃癌患者白细胞介素6水平检测的临床意义[J]. 李建芳,吴熊焰,李洁,瞿颖,朱正纲,苏丽萍.  诊断学理论与实践. 2012(03)
[8]胃肠安对SGC-7901胃癌上皮间质转化相关基因表达影响[J]. 沈克平,王海永,胡兵,刘威.  时珍国医国药. 2012(04)
[9]胃癌组织中Twist、HIF-1α表达与上皮间质转化的关系[J]. 张佐阳,邹萍,吴继锋.  临床与实验病理学杂志. 2011(11)
[10]肿瘤细胞发生细胞上皮-间质转变机制的研究[J]. 赵俊卿,李云峰,杨之斌.  肿瘤. 2010(10)

博士论文
[1]益气除痰方抗小鼠LEWIS肺癌的蛋白质组学及临床病理验证研究[D]. 王淑美.广州中医药大学 2011



本文编号：3629649