基于蛋白质组学技术测定全蝎中β-肌动蛋白的含量

发布时间：2022-02-18 07:29

　　目的:通过蛋白质组学技术手段找到适用于药材全蝎含量测定的目标蛋白质及其特征肽段,用该特征肽段形成定量方法。方法:全蝎粉碎后经PBS缓冲溶液超声提取并过滤后,得到药材的蛋白质提取溶液。上述溶液经胰蛋白酶酶解后通过高分辨质谱进行分析,确定待测的目标蛋白质（β-肌动蛋白）和与之对应的特征肽段（IIAPPER）,并进行特征肽段及其同位素内标物(IIA*(¹³C₃,¹⁵N)PPER)的合成。用得到特征肽段做对照品,同位素内标物做内标进行含量测定。色谱柱为Waters ACQUITY UPLC HSS T3（2.1 mm×100 mm,1.8μm）,流动相为0.1%甲酸溶液（V/V）-水和乙腈,梯度洗脱。质谱使用电喷雾离子源（ESI）正离子模式,采用多反应监测模式（MRM）进行信号采集。定量方法为内标法。结果:β-肌动蛋白的特征肽段在0.1～40 nmol/L浓度范围内线性良好,相关系数（r²）在0.999以上。方法检出限为0.04 mg/kg,定量限为0.13 mg/kg。加标回收率在87%～93%,重复性的... 

【文章来源】：世界中医药. 2020,15(13)

【文章页数】：8 页

【部分图文】：

对照品的MRM、TIC谱图

供试品的MRM、TIC谱图

方法空白的MRM、TIC谱图

【参考文献】：
期刊论文
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硕士论文
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本文编号：3630465