车前子壳多糖的结构解析与生物活性研究

发布时间：2022-02-19 06:40

　　车前子壳为车前科（Plantaginaceae）车前属（Plantago L.）植物的干燥成熟种皮。本课题从大粒车前子壳中提取分离纯化得到了一种纯多糖组分,并对其进行了一级结构、热降解性质、抗氧化及抗炎活性的研究。结果如下:首先,通过有机溶剂脱脂、热碱浸提、Sevag法去蛋白、双氧水脱色、乙醇醇沉等一系列分离提取步骤获得大粒车前子壳粗多糖,再借助DEAE纤维素柱层析和Sephacryl S-400葡聚糖凝胶色谱柱纯化得到精制多糖PMH。高效凝胶渗透色谱法测定其纯度为98.9%,再利用静态光散射法测定其分子量为1.4×10⁶ Da。热降解分析显示,PMH热降解温度范围为224.0-315.1oC。在这个过程中,有31.1%的PMH被降解,且PMH表观活化能相对较高,为173.1 kJ/mol,显示了其良好的热稳定性。其次,通过单糖组成、红外光谱、甲基化、GC-MS、核磁共振对PMH的一级结构进行深入研究,结果表明:PMH是一个高分支度的杂多糖,以1,4-β-D-GalpA为主链,在O-3位连接有两个分支链,分别为α-D-Galp-（3→1）-α-D-Galp-（3→... 

【文章来源】：上海交通大学上海市211工程院校985工程院校教育部直属院校

【文章页数】：84 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
主要符号及缩略词表
第一章 绪论
    1.1 车前植物概述
    1.2 车前子化学成分研究概况
        1.2.1 黄酮类
        1.2.2 苯乙醇苷类
        1.2.3 脂类
        1.2.4 氨基酸
        1.2.5 其他
    1.3 车前子多糖研究现状
        1.3.1 车前子多糖的提取分离
        1.3.2 车前子多糖的纯化
        1.3.3 车前子多糖的结构
        1.3.4 车前子多糖的功能活性
    1.4 本课题立题依据及主要研究内容
        1.4.1 立题依据
        1.4.2 主要研究内容
第二章 车前子壳多糖的制备及热重分析
    2.1 前言
    2.2 材料、试剂和仪器
        2.2.1 材料
        2.2.2 试剂
        2.2.3 仪器
    2.3 实验方法
        2.3.1 车前子壳多糖的提取
        2.3.2 车前子壳多糖的纯化
        2.3.3 糖含量的测定
        2.3.4 蛋白含量的测定
        2.3.5 车前子壳多糖的纯度测定
        2.3.6 车前子壳多糖的分子量测定
        2.3.7 车前子壳多糖的热力学参数表征
    2.4 结果与讨论
        2.4.1 提取分离及纯化
        2.4.2 多糖纯度鉴定
        2.4.3 分子量测定
        2.4.4 热降解过程
        2.4.5 表观活化能的计算
    2.5 本章小结
第三章 车前子壳多糖的结构解析
    3.1 前言
    3.2 试剂和仪器
        3.2.1 试剂
        3.2.2 仪器
    3.3 实验方法
        3.3.1 单糖组成测定
        3.3.2 甲基化气质联用
        3.3.3 红外光谱分析
        3.3.4 核磁共振波谱
    3.4 结果与讨论
        3.4.1 单糖组成测定
        3.4.2 红外光谱分析
        3.4.3 甲基化-气质联用分析
        3.4.4 核磁共振波谱分析
    3.5 本章小结
第四章 车前子壳多糖的生物活性研究
    4.1 前言
    4.2 试剂和仪器
        4.2.1 试剂
        4.2.2 仪器
    4.3 实验方法
        4.3.1 氧自由基清除实验
        4.3.2 DPPH自由基清除实验
        4.3.3 羟自由基清除实验
        4.3.4 细胞培养
        4.3.5 细胞毒性评价
        4.3.6 ELISA实验
        4.3.7 RT-PCR实验
        4.3.8 Western Blot
        4.3.9 免疫荧光实验
        4.3.10 数据分析
    4.4 结果与讨论
        4.4.1 PMH和Psyllium抗氧化活性比较
        4.4.2 PMH对小鼠巨噬细胞RAW264.7的细胞毒性评价
        4.4.3 PMH对小鼠巨噬细胞RAW264.7分泌细胞因子水平的影响
        4.4.4 PMH对小鼠巨噬细胞RAW264.7细胞因子mRNA表达的影响
        4.4.5 PMH对NF-κB信号通路的影响
        4.4.6 PMH对MAPKs信号通路的影响
    4.5 本章小结
第五章 结束语
    5.1 主要工作与创新点
    5.2 后续研究工作
参考文献
致谢
攻读硕士学位期间已发表或录用的论文及专利


【参考文献】：
期刊论文
[1]车前子多糖抗炎作用机制的实验研究[J]. 冯娜,刘芳,郭会彩,曹阿芳,王素敏.  天津医药. 2012(06)
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[3]车前子多糖对大鼠肝线粒体自由基防御功能的影响[J]. 袁从英,张然,车文文,张宁,冯娜,王素敏.  中国老年学杂志. 2011(04)
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[5]车前子多糖抗脂质过氧化作用的研究[J]. 袁从英,熊晨,郭会彩,张然,王素敏.  中国老年学杂志. 2009(10)
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博士论文
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[3]大粒车前子多糖生物活性、结构和构象特征研究及多糖分离纯化新方法初探[D]. 殷军艺.南昌大学 2012
[4]植物活性多糖对小鼠树突状细胞和巨噬细胞功能的调节作用[D]. 黄丹菲.南昌大学 2009
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硕士论文
[1]利用细胞炎症模型研究牛蒡低聚果糖的抗炎作用及相关机制[D]. 刘晶.山东大学 2013
[2]L-茶氨酸对小鼠巨噬细胞分泌细胞因子及肉仔鸡生产、免疫与抗氧化性能的影响[D]. 文慧.甘肃农业大学 2012
[3]车前子多糖的分离纯化及其功能性质研究[D]. 周超.南昌大学 2007
[4]车前子胶调血脂及降血糖作用的实验研究[D]. 栗艳彬.辽宁中医学院 2004



本文编号：3632419