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雪菊糖聚物的分离纯化、结构鉴定及药理活性研究

发布时间:2022-07-20 18:15
  本文以雪菊(Coreopsis tinctoria Nutt)糖聚物为研究对象,对其进行提取、分离纯化、结构鉴定和药理活性研究。首先采用热水和碱液对雪菊中的糖聚物进行提取,对水提液进行分级醇沉,得到三个部位的粗糖聚物P50、P70、P90,碱提取液醇沉得到粗糖聚物PB。采用苯酚-硫酸法测得四个部位糖聚物的糖含量分别为:66.60%、54.41%、80.78%、50.68%。将溶解性较好且糖含量高的50和70部位粗糖聚物进行脱蛋白、透析,然后用DEAE-Cellulose 52柱进行分离,再用Sephacryl S-100或Sephadex G-75进一步纯化,得到五个糖聚物CT50-2、CT70-1、CT70-1A、CT70-1B和CT70-3。采用高效凝胶渗透色谱法和比旋光度进行纯度验证,结果表明它们都为均一糖聚物,且比旋光度[a]~2 D~0分别是-12°、-45°、-9°、-37°、-20°。CT50-2、CT70-1和CT70-3相对分子量经高效凝胶渗透色谱法计算分别是10012、2100 Da和1247 Da,CT70-1A和CT70-1B经MALDI-... 

【文章页数】:105 页

【学位级别】:硕士

【文章目录】:
摘要
abstract
中英文缩略词表
第一章 前言
    1.1 雪菊的研究进展
        1.1.1 雪菊主要化学成分
        1.1.2 雪菊的药理活性
    1.2 糖聚物的研究进展
        1.2.1 糖聚物的提取
        1.2.2 糖聚物的分离纯化
        1.2.3 糖聚物的结构研究
        1.2.4 糖聚物的生物活性研究
    1.3 雪菊糖聚物的研究现状
    1.4 本研究的目的和意义
第二章 雪菊糖聚物的分离纯化
    2.1 仪器与试剂
        2.1.1 仪器
        2.1.2 药材
        2.1.3 试剂
    2.2 实验方法
        2.2.1 粗糖聚物的提取
        2.2.2 粗糖聚物的糖含量测定
        2.2.3 除蛋白
        2.2.4 雪菊糖聚物的分离纯化
        2.2.5 雪菊糖聚物的纯度验证及分子量测定
    2.3 结果与讨论
        2.3.1 粗糖聚物的糖含量测定
        2.3.2 雪菊糖聚物的分离纯化
        2.3.3 雪菊糖聚物的纯度验证及分子量测定
    2.4 小结
第三章 雪菊糖聚物的结构研究
    3.1 仪器与试剂
        3.1.1 仪器
        3.1.2 试剂
    3.2 实验方法
        3.2.1 糖聚物的单糖组成
        3.2.2 红外光谱分析
        3.2.3 糖聚物的完全甲基化及GC-MS分析
        3.2.4 糖聚物的核磁共振分析
        3.2.5 糖聚物的圆二色谱分析
        3.2.6 糖聚物的扫描电镜分析
    3.3 结果与讨论
        3.3.1 CT50-2的结构解析
        3.3.2 CT70-1的结构解析
        3.3.3 CT70-1A的结构解析
        3.3.4 CT70-1B的结构解析
        3.3.5 CT70-3的结构解析
    3.4 小结
第四章 雪菊糖聚物的活性研究
    4.1 仪器与试剂
        4.1.1 仪器
        4.1.2 试剂
    4.2 实验方法
        4.2.1 雪菊糖聚物对α-葡萄糖苷酶的抑制活性
        4.2.2 雪菊糖聚物对α-淀粉酶的抑制活性
        4.2.3 雪菊糖聚物对RAW264.7细胞活力的影响
        4.2.4 雪菊糖聚物对RAW264.7细胞产生NO量的影响
        4.2.5 雪菊糖聚物对BV2细胞活力的影响
        4.2.6 雪菊糖聚物对BV2细胞产生NO量的影响
    4.3 结果与讨论
        4.3.1 雪菊糖聚物对α-葡萄糖苷酶的抑制活性
        4.3.2 雪菊糖聚物对α-淀粉酶的抑制活性
        4.3.3 雪菊糖聚物对RAW264.7细胞活力的影响
        4.3.4 雪菊糖聚物对RAW264.7细胞产生NO量的影响
        4.3.5 雪菊糖聚物对BV2细胞活力的影响
        4.3.6 雪菊糖聚物对BV2细胞产生NO量的影响
    4.4 小结
第五章 结论与展望
参考文献
致谢
攻读硕士学位期间发表论文



本文编号:3664504

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