基于代谢组学的车叶草苷抗衰老作用评价及机制研究

发布时间：2022-08-01 16:53

　　衰老是生物进程的必然阶段,同时伴随着各种增龄性和退行性疾病,如心脑血管疾病、糖尿病、呼吸系统疾病、癌症等。因此延缓机体衰老,提高生命的质量,具有重要的意义。车叶草苷（Asperuloside）可以从杜仲科（Eucommiaecae）、茜草科（Rubiaceae）拉拉藤属（Galium）、巴戟天属（Morinda）等植物中提取分离得到的一种环烯醚萜化合物。近年来的药理研究表明,车叶草苷具有抗炎镇痛、降血压、抗细胞染色体诱变作用多种药理活性,但是关于车叶草苷抗衰老的研究却很少。本文以车叶草苷为研究对象,以果蝇为模式生物,对车叶草苷抗氧化、延缓衰老的作用进行评价。旨在研究车叶草苷的抗氧化和延缓衰老的作用及机制,为车叶草苷的研究与开发利用提供试验理论依据。实验研究的主要结果如下:1.车叶草苷延长野生型黑腹果蝇的寿命及作用机制以OR系野生型黑腹果蝇为模式生物,考察车叶草苷对自然衰老模型中雄性果蝇的平均寿命、最高寿命、半数死亡时间的影响。在15 d龄和35 d龄时,检测雄果蝇体内CAT的含量。在35 d龄时进行双氧水急性氧化损伤实验,研究车叶草苷对氧化应激的保护作用。在0、15和35 d龄时,采用... 

【文章页数】：89 页

【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
缩略词英文注释表
第一章 绪论
    1.1 衰老的研究进展
        1.1.1 自由基学说
        1.1.2 端粒学说
        1.1.3 DNA损伤学说
        1.1.4 遗传学说
        1.1.5 线粒体学说
    1.2 代谢组学
        1.2.1 代谢组学分析流程
        1.2.2 基于代谢组学的分析技术手段
        1.2.3 代谢组学的应用
    1.3 车叶草苷药理活性的研究概述
        1.3.1 抗炎
        1.3.2 镇痛
        1.3.3 降血压
        1.3.4 抗细胞染色体诱变
        1.3.5 抗肥胖
        1.3.6 抗菌
        1.3.7 抗肿瘤
        1.3.8 其他药理作用
    1.4 本课题研究的背景和意义
    1.5 本课题的主要研究思路、技术路线、研究内容和创新点
        1.5.1 实验技术路线
        1.5.2 主要研究内容
        1.5.3 创新点
第二章 车叶草苷延长OR果蝇的寿命及机制研究
    2.1 实验材料
        2.1.1 实验药物
        2.1.2 实验动物
        2.1.3 培养基配制
            2.1.3.1 基础培养基的配制
            2.1.3.2 给药培养基的配制
        2.1.4 实验试剂
        2.1.5 实验仪器
    2.2 试验方法
        2.2.1 车叶草苷对OR果蝇寿命的影响
            2.2.1.1 果蝇性别辨别
            2.2.1.2 实验果蝇分组
            2.2.1.3 果蝇考察指标
        2.2.2 果蝇垂直攀爬能力的检测
        2.2.3 果蝇体内CAT活力的测定
        2.2.4 双氧水急性氧化果蝇模型寿命试验
        2.2.5 果蝇体内衰老相关基因表达的测定
            2.2.5.1 果蝇总RNA的提取
            2.2.5.2 RNA纯度和浓度的测定
            2.2.5.3 RNA完整性的检测
            2.2.5.4 RNA逆转录
            2.2.5.5 qRT-PCR反应
            2.2.5.6 试验数据分析
    2.3 实验结果
        2.3.1 车叶草苷延长了OR果蝇的寿命
        2.3.2 车叶草苷对OR果蝇垂直爬行能力的影响
        2.3.3 车叶草苷对OR果蝇CAT活力的影响
        2.3.4 车叶草苷改善了OR果蝇的抗氧化应激能力
        2.3.5 车叶草苷调节OR果蝇体内衰老相关基因的表达量
    2.4 讨论
    2.5 本章小结
第三章 车叶草苷延长w1118 果蝇的寿命
    3.1 实验材料
        3.1.1 实验药物
        3.1.2 实验动物
        3.1.3 培养基配制
            3.1.3.1 基础培养基的配制
            3.1.3.2 给药培养基的配制
        3.1.4 主要试剂
        3.1.5 主要仪器
    3.2 实验方法
        3.2.1 摄食限制w1118 果蝇模型寿命试验
            3.2.1.1 实验分组
            3.2.1.2 指标考察
        3.2.2 车叶草苷延长w1118 果蝇的寿命
            3.2.2.1 果蝇分组
            3.2.2.2 指标考察
        3.2.3 w1118 果蝇的急性损伤实验
        3.2.4 w1118 果蝇味觉行为学检测
            3.2.4.1 果蝇腹部红色程度的考察
            3.2.4.2 建立果蝇摄食量标准曲线
            3.2.4.4 比色法测定果蝇摄食量
        3.2.5 w1118 果蝇总SOD1 活性检测
        3.2.6 统计学分析
    3.3 实验结果
        3.3.1 摄食限制对w1118 果蝇寿命的影响
        3.3.2 车叶草苷对w1118 果蝇寿命的影响
        3.3.3 车叶草苷改善了w1118 果蝇的抗氧化应激能力
        3.3.4 车叶草苷对w1118 果蝇食物摄入的影响
        3.3.5 车叶草苷对w1118 果蝇体内SOD1 活力的影响
    3.4 讨论
    3.5 本章小结
第四章 基于GC-MS技术w1118 果蝇代谢组学的研究
    4.1 实验材料
        4.1.1 主要仪器
        4.1.2 主要试剂
        4.1.3 实验动物
        4.1.4 实验药物
    4.2 实验方法
        4.2.1 果蝇的培养
        4.2.2 样品预处理
        4.2.3 GC-MS分析条件
        4.2.4 统计学分析
    4.3 实验结果
        4.3.1 果蝇样品的GC-MS分析
        4.3.2 果蝇样品的GC-MS数据的统计学分析
    4.4 讨论
    4.5 本章小结
第五章 全文总结与展望
    5.1 研究工作总结
    5.2 工作展望
参考文献
致谢
攻读硕士学位期间发表的学术论文及其他科研成果


【参考文献】：
期刊论文
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博士论文
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[4]鸡矢藤环烯醚萜苷镇痛作用及机制的实验研究[D]. 刘梅.安徽医科大学 2009
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本文编号：3667823