隐丹参酮与丹参酚酸类化合物的心肌保护作用及对eNOS/GRK2的调节作用
发布时间：2022-09-29 19:49
心肌缺血再灌注损伤会加速心肌死亡,严重威胁人类健康。丹参是心血管疾病常用中药,其活性成分主要分为脂溶性丹参酮类(隐丹参酮（Cryptotanshinone,CT）和水溶性的丹参酚酸类(丹参素（Danshensu,DSS）和原儿茶酸（Protocatechuic acid,PCA）,对心血管系统均有一定的保护作用,但两者作用机制、途经有所不同。本课题组通过建立心肌缺血再灌注模型及Western Blot研究隐丹参酮和丹参酚酸类化合物（Salvianolic acids,SAs）联用的心肌保护作用,探讨化合物联用对eNOS/GRK2的调节作用。方法:体外建立大鼠心肌细胞缺氧-复氧（Hypoxia-reoxygenation,HR）模型。以单硝酸异山梨酯（10μM）为阳性对照药,检测CT（1、3和10μM）、DSS和PCA（3、10和30μM）、CT与DSS、CT与PCA联用的细胞保护作用。并测定培养液中的LDH、MDA和SOD的含量。体内建立大鼠心肌缺血再灌注损伤（Ischemia-reperfusion injury,IRI）模型。将大鼠随机分为:正常组、假手术组、模型组、阳性（单硝酸异...
【文章页数】：75 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
Abstract
英文缩略词表
第一部分 心肌损伤的心血管系统平衡的调节机制及心血管疾病生物标志物的研究进展
1 心肌损伤时心血管系统平衡的调节机制
1.1 线粒体融合与裂变
1.2 代谢物
1.3 其他分子靶点
2 心血管生物标志物研究进展
2.1 临床常用心血管标志物
2.1.1 心肌肌钙蛋白
2.1.2 肌酸激酶MB
2.1.3 高敏C反应蛋白
2.1.4 B型利钠肽和氨基末端脑钠肽前体
2.1.5 肌红蛋白
2.1.6 缺血修饰白蛋白
2.1.7 生长刺激表达基因2蛋白
2.2 其他心血管生物标志物
2.2.1 非编码RNA
2.2.2 半乳糖凝集素-3
2.2.3 碳水化合物抗原-125
2.2.4 其他
2.3 生物标志物联用
3 本课题的目的及意义
第二部分CT与SAs对离体HR损伤心肌细胞活力的影响
1. 实验材料
1.1 实验仪器
1.2 实验样品及试剂
1.3 实验动物
2 实验方法
2.1 试剂配制
2.1.1 PBS缓冲盐
2.1.2 0.1%原型胶原酶Ⅱ
2.1.3 样品溶液
2.2 原代心肌细胞的提取、纯化及培养
2.3 实验分组
2.4 CT与SAs对原代心肌细胞活力的影响
2.5 CT与SAs对离体HR损伤心肌细胞活力的影响
2.5.1 细胞HR损伤模型的建立
2.5.2 CT与SAs对离体HR损伤心肌细胞活力的影响
2.6 心肌细胞培养液中LDH、SOD和MDA含量的检测
2.7 统计学分析
3 实验结果
3.1 原代心肌细胞形态和存活率
3.2 CT与SAs对原代心肌细胞活力的影响
3.3 CT与SAs对离体HR损伤心肌细胞活力的影响
3.4 心肌细胞培养液中LDH、MDA和SOD的含量
4 实验小结
5 实验讨论
5.1 细胞及阳性对照药的选择
5.2 正式实验药物及其剂量的确定
5.3 药物联用浓度的选择依据及实验结果
5.4 CT与SAs联用可能的机制
第三部分CT与SAs对e NOS/GRK2的调节作用
1 实验材料
1.1 实验仪器
1.2 实验样品及试剂
1.3 实验细胞
2 实验方法
2.1 细胞培养及蛋白样本的制备
2.2 Western Blot 检测eNOS/GRK2 的表达量
2.3 统计学分析
3 实验结果
4 实验小结
5 实验讨论
5.1 心肌细胞的选择及剂量选择依据
5.2 药物联用对e NOS/GRK2的调节作用
第四部分CT与SAs对IR损伤大鼠心肌的保护作用
1. 实验材料
1.1 实验仪器
1.2 实验样品及试剂
1.3 实验动物
2 实验方法
2.1 样品及试剂配制
2.2 实验动物分组
2.3 动物IR损伤模型的建立
2.4 CT与SAs对IR损伤大鼠的影响
2.4.1 心肌梗死面积
2.4.2 心肌生化指标
3 实验结果
3.1 结扎冠状动脉左前降支对大鼠心电图的影响
3.2 CT与SAs对IR损伤大鼠心肌梗死率的影响
3.3 CT与SAs对IR损伤大鼠生化指标的影响
4 实验小结
5 实验讨论
5.1 IR损伤模型及阳性对照药的选择
5.2 药物剂量选择及实验结果
第五部分CT与SAs对e NOS/GRK2的调节作用
1 实验材料
2 实验方法
3 实验结果
4 实验小结
5 实验讨论
全文总结
参考文献
个人简历
科研情况
致谢
本文编号：3683202
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【学位级别】：硕士
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摘要
Abstract
英文缩略词表
第一部分 心肌损伤的心血管系统平衡的调节机制及心血管疾病生物标志物的研究进展
1 心肌损伤时心血管系统平衡的调节机制
1.1 线粒体融合与裂变
1.2 代谢物
1.3 其他分子靶点
2 心血管生物标志物研究进展
2.1 临床常用心血管标志物
2.1.1 心肌肌钙蛋白
2.1.2 肌酸激酶MB
2.1.3 高敏C反应蛋白
2.1.4 B型利钠肽和氨基末端脑钠肽前体
2.1.5 肌红蛋白
2.1.6 缺血修饰白蛋白
2.1.7 生长刺激表达基因2蛋白
2.2 其他心血管生物标志物
2.2.1 非编码RNA
2.2.2 半乳糖凝集素-3
2.2.3 碳水化合物抗原-125
2.2.4 其他
2.3 生物标志物联用
3 本课题的目的及意义
第二部分CT与SAs对离体HR损伤心肌细胞活力的影响
1. 实验材料
1.1 实验仪器
1.2 实验样品及试剂
1.3 实验动物
2 实验方法
2.1 试剂配制
2.1.1 PBS缓冲盐
2.1.2 0.1%原型胶原酶Ⅱ
2.1.3 样品溶液
2.2 原代心肌细胞的提取、纯化及培养
2.3 实验分组
2.4 CT与SAs对原代心肌细胞活力的影响
2.5 CT与SAs对离体HR损伤心肌细胞活力的影响
2.5.1 细胞HR损伤模型的建立
2.5.2 CT与SAs对离体HR损伤心肌细胞活力的影响
2.6 心肌细胞培养液中LDH、SOD和MDA含量的检测
2.7 统计学分析
3 实验结果
3.1 原代心肌细胞形态和存活率
3.2 CT与SAs对原代心肌细胞活力的影响
3.3 CT与SAs对离体HR损伤心肌细胞活力的影响
3.4 心肌细胞培养液中LDH、MDA和SOD的含量
4 实验小结
5 实验讨论
5.1 细胞及阳性对照药的选择
5.2 正式实验药物及其剂量的确定
5.3 药物联用浓度的选择依据及实验结果
5.4 CT与SAs联用可能的机制
第三部分CT与SAs对e NOS/GRK2的调节作用
1 实验材料
1.1 实验仪器
1.2 实验样品及试剂
1.3 实验细胞
2 实验方法
2.1 细胞培养及蛋白样本的制备
2.2 Western Blot 检测eNOS/GRK2 的表达量
2.3 统计学分析
3 实验结果
4 实验小结
5 实验讨论
5.1 心肌细胞的选择及剂量选择依据
5.2 药物联用对e NOS/GRK2的调节作用
第四部分CT与SAs对IR损伤大鼠心肌的保护作用
1. 实验材料
1.1 实验仪器
1.2 实验样品及试剂
1.3 实验动物
2 实验方法
2.1 样品及试剂配制
2.2 实验动物分组
2.3 动物IR损伤模型的建立
2.4 CT与SAs对IR损伤大鼠的影响
2.4.1 心肌梗死面积
2.4.2 心肌生化指标
3 实验结果
3.1 结扎冠状动脉左前降支对大鼠心电图的影响
3.2 CT与SAs对IR损伤大鼠心肌梗死率的影响
3.3 CT与SAs对IR损伤大鼠生化指标的影响
4 实验小结
5 实验讨论
5.1 IR损伤模型及阳性对照药的选择
5.2 药物剂量选择及实验结果
第五部分CT与SAs对e NOS/GRK2的调节作用
1 实验材料
2 实验方法
3 实验结果
4 实验小结
5 实验讨论
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个人简历
科研情况
致谢
本文编号：3683202
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