滇南艾中倍半萜类物质体外抗炎活性研究

发布时间：2022-11-10 22:33

　　本论文由四部分组成:第一部分为炎症及其相关体外模型的研究进展概述;第二部分为滇南艾中两类愈创木烷型倍半萜内酯类化合物的抗炎活性研究;第三部分为实验部分;第四部分为讨论与展望。本论文主要利用LPS诱导的小鼠巨噬细胞RAW264.7模型,对从滇南艾（Artemisia austro-yunnanensis Ling et Y.R.Ling）中分离得到的13个倍半萜类化合物进行了体外抗炎活性研究。滇南艾为菊科蒿属植物。前期研究显示,蒿属植物中倍半萜类物质丰富,且活性广泛。本论文中所测试的13个化合物,除1个化合物在较小剂量下对小鼠巨噬细胞RAW264.7具有毒性外,其余12个化合物均可不同程度的抑制LPS诱导的小鼠巨噬细胞RAW264.7模型中iNOS与COX-2的表达,从而抑制NO,ROS,TNF-α,PGE2,IL-6,IL-1β,IL-10的产生;进一步的Westren Blot实验显示,这些化合物可抑制NF-κB p65的磷酸化,阻断核因子p65的转位入核。此外,本论文运用PCA分析方法,对所测化合物与炎症因子的关系进行了初步分析。 

【文章页数】：90 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
缩略词
第一章 绪论
    1.1 炎症
    1.2 抗炎药物
    1.3 细胞模型在抗炎药物研究中的应用
        1.3.1 巨噬细胞RAW264.7模型在抗炎药物研究中的应用
        1.3.2 巨噬细胞BMDM模型在抗炎药物研究中的应用
        1.3.3 中性粒细胞模型在抗炎药物研究中的应用
        1.3.4 成纤维上皮细胞L929模型在抗炎药物研究中的应用
        1.3.5 THP-1细胞模型在抗炎药物研究中的应用
        1.3.6 NR8383细胞模型在抗炎药物研究中的应用
        1.3.7 NIH/3T3细胞模型在抗炎药物研究中的应用
        1.3.8 斑马鱼模型在抗炎药物研究中的应用
    1.4 NO与炎症
    1.5 经典的NF-κB炎症信号转导途径
    1.6 研究目的与意义
    1.7 研究技术路线
第二章 滇南艾中倍半萜类化合物的抗炎活性研究
    2.1 引言
    2.1 1,10-裂环愈创木烷型倍半萜的抗炎活性研究
        2.1.1 1,10-裂环愈创木烷型倍半萜对RAW264.7细胞活力的影响
        2.1.2 1,10-裂环愈创木烷型倍半萜对NO的影响
        2.1.3 1,10-裂环愈创木烷型倍半萜对炎症因子的影响
        2.1.4 蛋白定量标准曲线绘制
        2.1.5 1,10-裂环愈创木烷型倍半萜对COX-2、iNOS的影响
        2.1.6 1,10-裂环愈创木烷型倍半萜对NF-κB活化的影响
        2.1.7 主成分分析
    2.2 倍半萜内酯类化合物的抗炎活性研究
        2.2.1 倍半萜内酯类化合物对RAW264.7细胞活力的影响
        2.2.2 倍半萜内酯类化合物对NO的影响
        2.2.3 倍半萜内酯类化合物对活性氧(ROS)的影响
        2.2.4 倍半萜内酯类化合物炎症因子的影响
        2.2.5 倍半萜内酯类化合物对COX2、iNOS的影响
        2.2.6 倍半萜内酯类化合物对NF-κB活化的影响
        2.2.7 主成分分析
第三章 材料与方法
    3.1 材料与仪器
        3.1.1 主要仪器
        3.1.2 主要试剂
        3.1.3 主要试剂配制
    3.3 实验方法
        3.3.0 小鼠单核巨噬细胞RAW264.7的培养
        3.3.1 细胞冻存
        3.3.2 细胞冻存
        3.3.3 细胞复苏
        3.3.4 细胞记数
        3.3.5 化合物对细胞活力的影响——MTT法
        3.3.6 NO的检测
        3.3.7 抑制NO生成活性实验
        3.3.8 ROS的检测
        3.3.9 TNF-α的检测
        3.3.10 IL-1β的检测
        3.3.11 IL-6的检测
        3.3.12 IL-10的检测
        3.3.13 PGE2的检测
        3.3.14 COX-2、iNOS以及NF-κB的检测
        3.3.15 数据分析
第四章 讨论与展望
致谢
参考文献
附录：硕士期间发表和待发表的论文


【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3705399