鼠尾草酚通过激活SIRT1/EZH2信号通路减轻肝脏纤维化

发布时间：2023-03-13 19:45

　　背景:肝纤维化(liver fibrosis)是多种慢性肝损害所致的可逆性病理改变,是肝硬化发展的必经阶段。其主要表现为肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC)激活所致的肝细胞外间质成分过度异常沉积,影响肝脏的功能。目前肝纤维化在诊治方面虽然有一些进展,但仍缺乏确定有效的药物,且相关分子机制尚不完全明确。有研究表明Enhancer of Zeste Homolog 2(EZH2)在促进肌成纤维细胞(myofibroblast,MFB)分化中发挥重要作用,但其具体机制仍不完全清楚。鼠尾草酚(carnosol,CS)是迷迭香中提取的一种脂溶性有效成分,具有抗炎、抗氧化、抗肿瘤等多种药理活性,但其对肝纤维化的治疗作用国内外未见报道。目的:探究CS对肝纤维化的保护作用,以及Sirtuin 1(SIRT1)/EZH2在抗肝纤维化中的分子机制。方法:1.CS在大鼠肝纤维化中保护作用的研究60只雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为五组:(A)空白对照组;(B)CS空白给药组(30mg/kg);(C)CCl4腹腔注射组;(D)CCl4+CS低剂量(15mg/kg)给药组...

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【学位级别】：硕士

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中文摘要
英文摘要
前言
材料与方法
    1.药物及试剂
    2.主要仪器
    3.主要溶液配制
    4.药物配制
    5.实验动物
    6.大鼠肝纤维化模型建立
    7.动物分组及给药
    8.肝组织HE染色、Masson染色
    9.生化指标检测
    10.实验用细胞株
    11.细胞培养
    12.细胞分组及给药
    13.SIRT1-siRNA,EZH2-siRNA,EZH2过表达质粒转染
    14.Westernblot法测定SIRT1,EZH2,acetyl-EZH2,α-SMA,CollagenⅠ,E-cadherin,Vimentin蛋白表达水平
    15.免疫沉淀法测定乙酰化EZH2水平
    16.免疫荧光法观察E-Cadherin,Vimentin在个分组中的变化情况
    17.Real-TimePCR法检测CollagenⅠ,α-SMA,TIMP1CTGF的mRNA水平
    18.统计学结果
结果
    1.CS对CCl4及TGFβ1诱导的肝纤维化的保护作用
        1.1 CS对CCl4诱导的大鼠肝损伤的影响
        1.2 CS对CCl4诱导的大鼠肝纤维化的影响
        1.3 CS对HSC激活的抑制作用
        1.4 CS对EMT现象的抑制作用
        1.5 CS对TGFβ1诱导的肝细胞纤维化的保护作用
    2.CS对肝纤维化保护作用机制的研究
        2.1 EZH2对HSC激活的影响
        2.2 EZH2对EMT现象的影响
        2.3 CS对CCl4诱导的大鼠肝脏SIRT1表达的影响
        2.4 CS对AML-12细胞中SIRT1表达的影响
        2.5 SIRT1在CS介导的肝纤维化保护中的作用
        2.6 CS对CCl4诱导的大鼠肝脏中EZH2表达的影响
        2.7 在AML12细胞中CS对EZH2的抑制作用与SIRT相关
        2.8 SIRT1对AML-12细胞中EZH2乙酰化水平的影响
        2.9 SIRT1/EZH2信号通路对肝纤维化的影响
讨论
结论
参考文献
综述 肝纤维化中肝星状细胞激活的机制研究
    参考文献
附录
    缩略词
攻读学位期间论文发表情况
致谢



本文编号：3762265