鹰嘴豆芽素A缓解PM 2.5 有机提取物所致炎症作用机制研究
发布时间：2023-03-23 23:56
炎症是机体受到PM2.5刺激时发生的防御性应激反应,在PM2.5所致肺损伤的发生和发展中扮演关键作用。鹰嘴豆芽素A(biochanin A)是具有抗炎、抗氧化活性的异黄酮类化合物,能够有效干预PM2.5所致肺损伤。本论文通过建立体外细胞模型,并结合计算机模拟分子对接理论和方法,探究鹰嘴豆芽素A缓解PM2.5有机提取物所致炎症的作用机制。基于A549人肺腺癌细胞,评价PM2.5有机提取物致炎效果及biochanin A抗炎活性。结果表明,biochanin A(10μM和20μM)能显著抑制PM2.5有机提取物(150μg/mL)引起的炎症因子IL-8、IL-6、IL-1β、TNFα的表达及释放,促进NO和PGE2的合成及其对应的关键合成酶基因iNOS和COX2的转录。通过GC-MS技术对PM2.5有机提取物主要成分进行分析,结果显示:PM2.5样品有机溶出物成分复杂,共分离出13个色谱峰,鉴...
【文章页数】：93 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
abstract
第1章 文献综述
1.1 PM2.5概述
1.1.1 PM2.5成分及危害
1.1.2 PM2.5作用机制
1.1.3 PM2.5损伤干预
1.2 炎症信号通路
1.2.1 NF-κB信号通路概述
1.2.2 NF-κB信号与PM2.5所致炎症
1.2.3 MAPK信号与PM2.5所致炎症
1.2.4 MEK5/ERK5信号概述
1.2.5 MEK5/ERK5信号调控炎症与免疫
1.2.6 MEK5/ERK5信号调控NF-κB
1.3 鹰嘴豆芽素A
1.4 研究目的及意义
1.5 研究内容和技术路线
1.5.1 研究内容
1.5.2 技术路线
第2章 鹰嘴豆芽素A对PM2.5有机提取物所致炎症作用研究
2.1 材料与仪器
2.1.1 细胞株
2.1.2 实验试剂与耗材
2.1.3 实验仪器
2.2 实验方法
2.2.1 PM2.5采集及有机组分提取
2.2.2 PM2.5有机提取物成分分析
2.2.3 细胞培养
2.2.4 细胞分组及处理
2.2.5 MTT实验
2.2.6 LDH实验
2.2.7 炎症因子/介质的测定
2.2.8 基因表达测定
2.2.9 数据统计与分析
2.3 实验结果与讨论
2.3.1 PM2.5有机提取物致细胞损伤作用评价
2.3.2 biochanin A安全作用剂量考察
2.3.3 PM2.5暴露-biochanin A保护体外细胞模型的建立
2.3.4 biochanin A抗炎作用评价
2.3.5 PM2.5有机提取物化学成分分析结果
2.3.6 PM2.5有机提取物化学成分与炎症反应相关性
2.4 本章小结
第3章 鹰嘴豆芽素A缓解PM2.5有机提取物所致炎症作用机制
3.1 材料与仪器
3.1.1 细胞株
3.1.2 实验试剂与耗材
3.1.3 实验仪器
3.2 实验方法
3.2.1 细胞总蛋白提取
3.2.2 细胞核蛋白提取
3.2.3 蛋白浓度测定及变性处理
3.2.4 蛋白质免疫印记实验
3.2.5 基因表达测定
3.2.6 数据统计与分析
3.3 实验结果与讨论
3.3.1 biochanin A抑制MEK5/ERK5信号通路
3.3.2 biochanin A抑制NF-κB信号通路
3.3.3 biochanin A通过抑制MEK5/ERK5和NF-κB通路缓解炎症
3.4 本章小结
第4章 鹰嘴豆芽素A与MEK5靶点分子互作机制研究
4.1 分子模拟平台
4.2 分子对接
4.2.1 准备文件
4.2.2 biochanin A与MEK5的分子对接
4.3 结果与讨论
4.4 本章小结
第5章 全文结论
参考文献
附录A
发表论文和参加科研情况说明
致谢
本文编号：3769015
【文章页数】：93 页
【学位级别】：硕士
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摘要
abstract
第1章 文献综述
1.1 PM2.5概述
1.1.1 PM2.5成分及危害
1.1.2 PM2.5作用机制
1.1.3 PM2.5损伤干预
1.2 炎症信号通路
1.2.1 NF-κB信号通路概述
1.2.2 NF-κB信号与PM2.5所致炎症
1.2.3 MAPK信号与PM2.5所致炎症
1.2.4 MEK5/ERK5信号概述
1.2.5 MEK5/ERK5信号调控炎症与免疫
1.2.6 MEK5/ERK5信号调控NF-κB
1.3 鹰嘴豆芽素A
1.4 研究目的及意义
1.5 研究内容和技术路线
1.5.1 研究内容
1.5.2 技术路线
第2章 鹰嘴豆芽素A对PM2.5有机提取物所致炎症作用研究
2.1 材料与仪器
2.1.1 细胞株
2.1.2 实验试剂与耗材
2.1.3 实验仪器
2.2 实验方法
2.2.1 PM2.5采集及有机组分提取
2.2.2 PM2.5有机提取物成分分析
2.2.3 细胞培养
2.2.4 细胞分组及处理
2.2.5 MTT实验
2.2.6 LDH实验
2.2.7 炎症因子/介质的测定
2.2.8 基因表达测定
2.2.9 数据统计与分析
2.3 实验结果与讨论
2.3.1 PM2.5有机提取物致细胞损伤作用评价
2.3.2 biochanin A安全作用剂量考察
2.3.3 PM2.5暴露-biochanin A保护体外细胞模型的建立
2.3.4 biochanin A抗炎作用评价
2.3.5 PM2.5有机提取物化学成分分析结果
2.3.6 PM2.5有机提取物化学成分与炎症反应相关性
2.4 本章小结
第3章 鹰嘴豆芽素A缓解PM2.5有机提取物所致炎症作用机制
3.1 材料与仪器
3.1.1 细胞株
3.1.2 实验试剂与耗材
3.1.3 实验仪器
3.2 实验方法
3.2.1 细胞总蛋白提取
3.2.2 细胞核蛋白提取
3.2.3 蛋白浓度测定及变性处理
3.2.4 蛋白质免疫印记实验
3.2.5 基因表达测定
3.2.6 数据统计与分析
3.3 实验结果与讨论
3.3.1 biochanin A抑制MEK5/ERK5信号通路
3.3.2 biochanin A抑制NF-κB信号通路
3.3.3 biochanin A通过抑制MEK5/ERK5和NF-κB通路缓解炎症
3.4 本章小结
第4章 鹰嘴豆芽素A与MEK5靶点分子互作机制研究
4.1 分子模拟平台
4.2 分子对接
4.2.1 准备文件
4.2.2 biochanin A与MEK5的分子对接
4.3 结果与讨论
4.4 本章小结
第5章 全文结论
参考文献
附录A
发表论文和参加科研情况说明
致谢
本文编号：3769015
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/zhongyaolw/3769015.html
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