威灵仙水提物对环境毒素引起胰岛细胞（INS-1）凋亡的保护作用研究

发布时间：2023-03-24 18:43

　　目的:观察不同浓度威灵仙水提物(Clematis)对多氯联苯(PCB118)诱导的胰岛β细胞凋亡的保护作用。方法:将INS-1细胞株分为对照组(control)、PCB118组(25μMPCB118)、威灵仙低剂量组(25uM PCB118 +4mg.L^-1 Clematis)以及威灵仙高剂量组(25uMPCB118 + 40mg.L^-1 Clematis),分别于药物干预 9、24、48h后于倒置显微镜下观察INS-1细胞形态,通过采用CCK-8法检测各组INS-1细胞活性,并通过流式细胞术检测细胞的凋亡率,并用Western blot检测Cleaved Caspase-3、Caspase-3 蛋白的表达。结果:于倒置显微镜下观察结果显示:PCB118刺激9、24、48h后INS-1细胞凋亡,高浓度及低浓度组的Clematis干预下PCB118诱导的INS-1细胞凋亡减少;CCK-8结果显示PCB118处理后细胞活性显著下降(P<0.01),而Clematis高低浓度组均改善PCB118的抑制作用,其中高浓度组与PCB118组相比,差...

【文章页数】：38 页

【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
前言
第一部分 研究背景
    1. 中医学对消渴的认识
        1.1 病名的认识
        1.2 病因的认识
        1.3 病机的认识
        1.4 辨证论治
    2. 现代医学对T2DM的认识
        2.1 流行病学
        2.2 发病机制
        2.3 治疗进展
    3. 威灵仙研究进展
        3.1 威灵仙化学研究
        3.2 威灵仙药理研究
        3.3 威灵仙临床研究
        3.4 威灵仙实验研究
第二部分 实验研究
    1. 实验材料
        1.1 细胞来源
        1.2 实验用药
        1.3 实验试剂及耗材
        1.4 主要仪器
        1.5 主要溶液及试剂的配制
        1.6 细胞操作
    2. 实验方法
        2.1 实验分组
        2.2 实验指标检测
        2.3 INS-1细胞形态观察
        2.4 蛋白定量分析
        2.5 CCK-8检测INS-1细胞活性
        2.6 Annexin V-FITC/PI流式细胞术检测INS-1细胞凋亡率
        2.7 统计学方法
    3. 结果
        3.1 威灵仙水提物改善PCB118诱导的LNS-1细胞凋亡形态学改变
        3.2 威灵仙水提物对INS-1细胞活性的保护作用
        3.3 流式细胞仪检测威灵仙水提物改善PCB118诱导的INS-1细胞凋亡
        3.4 威灵仙水提物对凋亡相关蛋白Caspase-3的影响
    4. 讨论
结语
    1. 本次研究取得的主要成果
    2. 本次研究的不足与展望
参考文献
附录
攻读硕士学位期间取得的学术成果
致谢



本文编号：3769644